黃芩莖葉總黃酮對(duì)高糖致血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)制研究

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1、曲珍黃芩莖葉總黃酮對(duì)高糖致血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)制研究目錄中文摘要????????????????????????????2英文摘要????????????????????????????6符號(hào)說明????????????????????????????10前言????????????????????????????12日U舌????????????????????????????12第一部分高糖致VSMCs異常增殖的作用及其機(jī)制研究實(shí)驗(yàn)一高糖對(duì)VSMCs的促增殖作用1實(shí)驗(yàn)材料?????????????????????????

2、142實(shí)驗(yàn)方法?????????????????????????153實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????????????194討論?????????????????????????24實(shí)驗(yàn)二高糖對(duì)VSMCsSOD活性、MDA含量及AR表達(dá)的影響1實(shí)驗(yàn)材料???????????????????????...?262實(shí)驗(yàn)方法?????????????????????????283實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????????????334討論?????????????????????????38第二部分SSTF抗高糖致VSMCs異

3、常增殖的作用及機(jī)制研究1實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????402實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????403實(shí)驗(yàn)結(jié)果????????????????????????424討論????????????????????????48全文結(jié)論???????????????????????????49參考文獻(xiàn)???????????????????????????50綜述???????????????????????????53致謝???????????????????????????59攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文

4、????????????????????60揚(yáng)州大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明和版權(quán)使用授權(quán)書???????????61揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文2背景:黃芩莖葉總黃酮對(duì)高糖致血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)制研究摘要糖尿病(diabetesmellitus,DM)是多種心血管疾病的共同病理基礎(chǔ),嚴(yán)重威脅著人們的健康。糖尿病往往伴隨并發(fā)癥,糖尿病慢性并發(fā)癥(DCC)以心血管并發(fā)癥較多,是患者的主要死因。血管平滑肌細(xì)胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)異常增殖是DCC發(fā)生的重要環(huán)節(jié)及重要機(jī)制,高濃度葡萄糖(1lighco

5、ncentrationofglucose,HG)fi皂*U激VSMCs異常增殖。多元醇通路(PP)是組織細(xì)胞葡萄糖的主要代謝途徑之一,醛糖還原酶(AR)是該途徑的限速酶,高糖刺激下PP激活是DCC病發(fā)的機(jī)制之一。研究表明,高濃度葡萄糖通過激活多元醇通路刺激VSMCs異常增殖,從而導(dǎo)致DCC。黃酮類化合物能抑制高糖誘導(dǎo)的VSMCs增殖,具有抗氧化、抑制AR表達(dá)的作用,黃芩莖葉總黃酮(Scutellariabaicalensisstemrleaftotalflavonoid,SSTF)是黃芩莖葉的提取物,其主要成分為黃酮類化合物,SSTF對(duì)心

6、腦血管系統(tǒng)具有普遍藥理作用。研究表明,黃酮類化合物通過作用于多元醇通路抑制高糖誘導(dǎo)的VSMCs增殖。那么,SSTF對(duì)HG誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖是否具有抑制作用?其作用機(jī)制是否與抑制AR表達(dá)有關(guān)?目前有關(guān)這方面的研究國內(nèi)外還未見報(bào)道。本研究在細(xì)胞水平觀察SSTF對(duì)高糖致VSMCs增殖的抑制作用,并對(duì)其可能的作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討,為SSTF防治DCC提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的:1.建立高糖致大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)Pfl亞(VSMCs)增殖的模型并觀察高糖對(duì)醛糖還原酶(art)表達(dá)的影響。2.觀察黃芩莖葉總黃酮(SSTF)對(duì)高糖所致VSMCs

7、增殖的抑制作用,并從分子水平探究其可能的作用機(jī)制。方法:1.高糖致VSMCs異常增殖模型的建立:體外培養(yǎng)大鼠胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞,加入濃度梯度(5.5、10、20、30、40、50mmol/L)的葡萄糖的作用于VSMCs,分別在24h、48h、曲珍黃芩莖葉總黃酮對(duì)高糖致血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制作用及其機(jī)制研究72h、96h,使用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)測定各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞活力(OD值);劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移能力;流式細(xì)胞儀(FCM)檢測細(xì)胞增殖周期及增殖指數(shù),觀察高糖對(duì)VSMCs的促增殖作用,并確定高糖的最佳作用濃度和作用時(shí)間。2.

8、高糖對(duì)SOD活性、MDA含量及醛糖還原酶(AR)表達(dá)的影響:用濃度梯度的葡萄糖誘導(dǎo)VSMCs增殖,實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組(5.5mmol/L)及高濃度葡萄糖作用組(10、20、30、40、50mm

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