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《豬流行性腹瀉病毒s、m、orf3基因的克隆和序列分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文密級豬流行性腹瀉病毒S、M、ORF3基因的克隆和序列分析CloningandSequenceAnalysisofS，MandORF3GenesofPorcineEpidemicDiarrheaViruses碩士研究生：學號：指導教師：指導小組：專業(yè)：預防獸醫(yī)學獲得學位名稱：農(nóng)學碩士李衡2009302110192何啟蓋教授陳煥春院士郭愛珍教授吳斌教授肖少波教授錢平教授研究方向：動物傳染病學獲得學位時間：2013年6月華中農(nóng)業(yè)大學動物科技學院動物醫(yī)學院二。一三年六月本論文受到如下項目資助
2、：國家生豬產(chǎn)業(yè)技術體系項目(CARS一36)國家自然科學基金面上項目(31272572)華中農(nóng)業(yè)大學學位論文獨創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學位論文是否保密奢如需保密，解密時間年月日獨創(chuàng)性聲明lIYMl2BIl3IIIU9ilIIIl4IILIIl9IIIIIl2IilII螋本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，指導教師對此進行了審
3、定。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中做了明確的說明，并表示了謝意．研究生簽名：巒衢時間：如l≥年廠月卻日學位論文使用授權(quán)書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學關于保存、使用學位論文的規(guī)定，即學生必須按照學校要求提交學位論文的印刷本和電子版本；學校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容，為存在館際合作關系的兄弟高校用戶提供文獻傳遞和交換服務，同時本人保留
4、在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)力．注：保密學位論文(印涉及技術秘密，商業(yè)秘密或申請專利等潛在霄要提交保密的論文)在解密后適用于本授權(quán)書．靴敝儲馘：楠翩搟：僻簽名日期：20I；#-r月習日簽名日期：榔年r月矽7注：請將本表直接裝訂在學位論文的扉頁和目錄之問豬流行性腹瀉病毒S、M、ORF3基因全長的擴增和序列分析目錄摘要????????????????????????????????．．iAbstract??????????????????????????????????????????iii縮略語表(Abbreviatio
5、n)????????????????????????v1豬流行性腹瀉研究進展????????????????????????．．11．1豬流行性腹瀉病毒????????????????????????11．2豬流行性腹瀉流行情況??????????????????????21．3豬流行性腹瀉病毒S基因的研究進展????????????????31．4豬流行性腹瀉病毒M基因的研究進展???????????????．．41．5豬流行性腹瀉病毒ORF3基因的研究進展??????????????51．6豬流行性腹瀉診斷方
6、法研究概況??????????????????62研究的目的及意義??????????????????????????一93材料與方法?????????????????????????????103．1實驗材料???????????????????????????．．103．1．1病料?????????????????????????????一103．1．2試劑????????????????????????????????????103．1．3所需主要實驗器材?????????????????????．113．
7、1．4主要溶液及緩沖液的配制??????????????????．113．2實驗方法????????????????????????????113．2．1引物的設計與合成?????????????????????．113．2．2樣品處理?????????????????????????123．2．3總RNA的提取??????????j????????????．．123．2．4反轉(zhuǎn)錄合成cDNA?????????????????????．133．2．5PCR擴增反應體系及反應條件????????????????14
8、3．2．6PCR產(chǎn)物的回收與純化???????????????????153．2．7PCR產(chǎn)物與pMDl8．T載體的連接??????????????．153．2．8感受態(tài)的制備(氯化鈣法)?????????????????163．2．9轉(zhuǎn)化????????????????????????????????????163．2．10質(zhì)粒的小量制備????????????????
