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《豬流行性腹瀉病毒s、m、orf3基因的克隆和序列分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文密級(jí)豬流行性腹瀉病毒S、M、ORF3基因的克隆和序列分析CloningandSequenceAnalysisofS，MandORF3GenesofPorcineEpidemicDiarrheaViruses碩士研究生：學(xué)號(hào)：指導(dǎo)教師：指導(dǎo)小組：專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)獲得學(xué)位名稱：農(nóng)學(xué)碩士李衡2009302110192何啟蓋教授陳煥春院士郭愛(ài)珍教授吳斌教授肖少波教授錢平教授研究方向：動(dòng)物傳染病學(xué)獲得學(xué)位時(shí)間：2013年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)院二。一三年六月本論文受到如下項(xiàng)目資助
2、：國(guó)家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(CARS一36)國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31272572)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學(xué)位論文是否保密奢如需保密，解密時(shí)間年月日獨(dú)創(chuàng)性聲明lIYMl2BIl3IIIU9ilIIIl4IILIIl9IIIIIl2IilII螋本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審
3、定。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中做了明確的說(shuō)明，并表示了謝意．研究生簽名：巒衢時(shí)間：如l≥年廠月卻日學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務(wù)，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，為存在館際合作關(guān)系的兄弟高校用戶提供文獻(xiàn)傳遞和交換服務(wù)，同時(shí)本人保留
4、在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)力．注：保密學(xué)位論文(印涉及技術(shù)秘密，商業(yè)秘密或申請(qǐng)專利等潛在霄要提交保密的論文)在解密后適用于本授權(quán)書．靴敝儲(chǔ)馘：楠翩搟：僻簽名日期：20I；#-r月習(xí)日簽名日期：榔年r月矽7注：請(qǐng)將本表直接裝訂在學(xué)位論文的扉頁(yè)和目錄之問(wèn)豬流行性腹瀉病毒S、M、ORF3基因全長(zhǎng)的擴(kuò)增和序列分析目錄摘要????????????????????????????????．．iAbstract??????????????????????????????????????????iii縮略語(yǔ)表(Abbreviatio
5、n)????????????????????????v1豬流行性腹瀉研究進(jìn)展????????????????????????．．11．1豬流行性腹瀉病毒????????????????????????11．2豬流行性腹瀉流行情況??????????????????????21．3豬流行性腹瀉病毒S基因的研究進(jìn)展????????????????31．4豬流行性腹瀉病毒M基因的研究進(jìn)展???????????????．．41．5豬流行性腹瀉病毒ORF3基因的研究進(jìn)展??????????????51．6豬流行性腹瀉診斷方
6、法研究概況??????????????????62研究的目的及意義??????????????????????????一93材料與方法?????????????????????????????103．1實(shí)驗(yàn)材料???????????????????????????．．103．1．1病料?????????????????????????????一103．1．2試劑????????????????????????????????????103．1．3所需主要實(shí)驗(yàn)器材?????????????????????．113．
7、1．4主要溶液及緩沖液的配制??????????????????．113．2實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????????113．2．1引物的設(shè)計(jì)與合成?????????????????????．113．2．2樣品處理?????????????????????????123．2．3總RNA的提取??????????j????????????．．123．2．4反轉(zhuǎn)錄合成cDNA?????????????????????．133．2．5PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系及反應(yīng)條件????????????????14
8、3．2．6PCR產(chǎn)物的回收與純化???????????????????153．2．7PCR產(chǎn)物與pMDl8．T載體的連接??????????????．153．2．8感受態(tài)的制備(氯化鈣法)?????????????????163．2．9轉(zhuǎn)化????????????????????????????????????163．2．10質(zhì)粒的小量制備????????????????
