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1、SOOCHOWUNIVERSITY學(xué)位論文論文題目腎移植受者HCMV感染與BAFF信號(hào)活化_________________的相關(guān)性研究研究生姓名董盼盼指導(dǎo)教師姓名徐海燕專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)免疫學(xué)研究方向________________移植免疫論文提交日期2015年4月蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研宄工作所取得的成果。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不含其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研宄作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均己在文中以明確
2、方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名:日蘇州大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國(guó)家圖書(shū)館、中國(guó)社科院文獻(xiàn)信息情報(bào)中心、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研宄所(含萬(wàn)方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊(光盤(pán)版)電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文,可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在_____年__月解密后
3、適用本規(guī)定。非涉密論文B論文作者簽名:期:請(qǐng)一今-7腎移植受者HCMV感染與BAFF信號(hào)活化的相關(guān)性研究中文摘要腎移植受者HCMV感染與BAFF信號(hào)活化的相關(guān)性研究中文摘要第一部分目的:研究腎移植受者人巨細(xì)胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染與B細(xì)胞活化因子(BcellactivatingfactorbelongtotheTNFfamily,BAFF)信號(hào)的相關(guān)性。方法:①以來(lái)院隨訪的腎移植受者為研究對(duì)象,共采集113例患者抗凝外周血(EDTA-Na2抗凝)和尿液樣本。采用real-timePCR法檢測(cè)尿液中HCMVDNA水平
4、。②應(yīng)用real-timePCR法檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞中BAFF、BAFF-R、TLR9、NLRC5、TACI等HCMV-TLR信號(hào)和BAFF信號(hào)通路中相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄本水平;PCR芯片技術(shù)對(duì)TLR信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路,以及細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體通路中共88個(gè)基因進(jìn)行研究,以篩選腎移植受者HCMVDNA陽(yáng)性組和陰性組的差異表達(dá)基因。健康志愿者為對(duì)照。③ELISA法檢測(cè)血清sBAFF和總IgG水平;間接熒光免疫試驗(yàn)(IFA)檢測(cè)血清中抗HCMVpp65IgG、IgM抗體水平,流式熒光法(Luminex)檢測(cè)血清抗人類(lèi)白細(xì)胞抗原HLA抗體和抗MICA抗
5、體水平(抗HLA-Ⅰ&Ⅱ&MICA抗體)。④采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析。兩個(gè)獨(dú)立樣本均數(shù)間的比較采用雙側(cè)t檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Spearman法及Pearson法;P<0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:①113例來(lái)院隨訪腎移植病人中,尿HCMVDNA>10,000拷貝/ml為12例,歸為陽(yáng)性組;HCMVDNA<10,000拷貝/ml的為83例,以及未出現(xiàn)擴(kuò)增的18例,歸為陰性組。②ELISA結(jié)果顯示,陽(yáng)性組患者血清sBAFF、總IgG水平顯著高于陰性組(928±360pg/mlvs511±298pg/ml,P<0.05;26,260±15,
6、960μg/mlvs9,944±7,365μg/ml,P<0.05);IFA結(jié)果顯示,陽(yáng)性組患者血清抗HCMVpp65IgG水平顯著高于陰性組(P<0.05);陽(yáng)性組中尿HCMVDNA拷貝數(shù)與sBAFF呈正相關(guān)(r=0.988,P<0.05),sBAFF與血清中總IgG呈正相關(guān)(r=0.625,P<0.05)。③Luminex檢測(cè)結(jié)果顯示,陽(yáng)性組中抗HLA-Ⅰ&Ⅱ&MICA抗體的陽(yáng)性率為46.2%,陰性組為12.5%,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④real-timePCR發(fā)現(xiàn),與尿HCMVDNA陰性組比較,陽(yáng)性組I中文摘要腎移植受者HCMV感染與BAFF信號(hào)活化的
7、相關(guān)性研究BAFFmRNA水平顯著增高(P<0.05),其余分子(BAFF-R、TLR-9、NLRC5、TACI等)的表達(dá)未出現(xiàn)顯著差異;基因芯片檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),表達(dá)差異基因共有46個(gè),其中陽(yáng)性組與陰性組相比較表達(dá)上調(diào)的基因有2個(gè)(BAFF-R、ICAM1),表達(dá)下調(diào)的基因22個(gè)(TLR-9、NLRC5、LIGHT等);陽(yáng)性組與健康對(duì)照組相比較,表達(dá)上調(diào)的基因有2個(gè)(IFN-γ、ICAM1),表達(dá)下調(diào)的基因8個(gè)(CCL3L1、IL12B、ILIR1等);陰性組與健康對(duì)照組相比較表達(dá)上調(diào)的基因有11個(gè)(IFN-γ、IRAK4、NF-κB2等),表達(dá)下調(diào)的基因
8、1個(gè)(BAFF-R)。結(jié)論:腎移植受者HCMV感染后,HCMV-TLR信號(hào)活化可