腎移植受者hcmv感染與baff信號活化的相關(guān)性研究

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1、SOOCHOWUNIVERSITY學(xué)位論文論文題目腎移植受者HCMV感染與BAFF信號活化_________________的相關(guān)性研究研究生姓名董盼盼指導(dǎo)教師姓名徐海燕專業(yè)名稱免疫學(xué)研究方向________________移植免疫論文提交日期2015年4月蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研宄工作所取得的成果。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研宄作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確

2、方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：日蘇州大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國家圖書館、中國社科院文獻信息情報中心、中國科學(xué)技術(shù)信息研宄所（含萬方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在_____年__月解密后

3、適用本規(guī)定。非涉密論文B論文作者簽名:期：請一今-7腎移植受者HCMV感染與BAFF信號活化的相關(guān)性研究中文摘要腎移植受者HCMV感染與BAFF信號活化的相關(guān)性研究中文摘要第一部分目的：研究腎移植受者人巨細胞病毒（humancytomegalovirus,HCMV）感染與B細胞活化因子（BcellactivatingfactorbelongtotheTNFfamily,BAFF）信號的相關(guān)性。方法：①以來院隨訪的腎移植受者為研究對象，共采集113例患者抗凝外周血（EDTA-Na2抗凝）和尿液樣本。采用real-timePCR法檢測尿液中HCMVDNA水平

4、。②應(yīng)用real-timePCR法檢測外周血單個核細胞中BAFF、BAFF-R、TLR9、NLRC5、TACI等HCMV-TLR信號和BAFF信號通路中相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄本水平；PCR芯片技術(shù)對TLR信號通路、NF-κB信號通路，以及細胞因子-細胞因子受體通路中共88個基因進行研究，以篩選腎移植受者HCMVDNA陽性組和陰性組的差異表達基因。健康志愿者為對照。③ELISA法檢測血清sBAFF和總IgG水平；間接熒光免疫試驗（IFA）檢測血清中抗HCMVpp65IgG、IgM抗體水平，流式熒光法（Luminex）檢測血清抗人類白細胞抗原HLA抗體和抗MICA抗

5、體水平（抗HLA-Ⅰ&Ⅱ&MICA抗體）。④采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進行分析。兩個獨立樣本均數(shù)間的比較采用雙側(cè)t檢驗；相關(guān)性分析采用Spearman法及Pearson法；P<0.05被認為具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：①113例來院隨訪腎移植病人中，尿HCMVDNA>10,000拷貝/ml為12例，歸為陽性組；HCMVDNA<10,000拷貝/ml的為83例，以及未出現(xiàn)擴增的18例，歸為陰性組。②ELISA結(jié)果顯示，陽性組患者血清sBAFF、總IgG水平顯著高于陰性組（928±360pg/mlvs511±298pg/ml,P<0.05;26,260±15,

6、960μg/mlvs9,944±7,365μg/ml,P<0.05）；IFA結(jié)果顯示，陽性組患者血清抗HCMVpp65IgG水平顯著高于陰性組（P<0.05）；陽性組中尿HCMVDNA拷貝數(shù)與sBAFF呈正相關(guān)（r=0.988,P<0.05），sBAFF與血清中總IgG呈正相關(guān)（r=0.625,P<0.05）。③Luminex檢測結(jié)果顯示，陽性組中抗HLA-Ⅰ&Ⅱ&MICA抗體的陽性率為46.2%，陰性組為12.5%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。④real-timePCR發(fā)現(xiàn)，與尿HCMVDNA陰性組比較，陽性組I中文摘要腎移植受者HCMV感染與BAFF信號活化的

7、相關(guān)性研究BAFFmRNA水平顯著增高（P<0.05），其余分子（BAFF-R、TLR-9、NLRC5、TACI等）的表達未出現(xiàn)顯著差異；基因芯片檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，表達差異基因共有46個，其中陽性組與陰性組相比較表達上調(diào)的基因有2個（BAFF-R、ICAM1），表達下調(diào)的基因22個（TLR-9、NLRC5、LIGHT等）；陽性組與健康對照組相比較，表達上調(diào)的基因有2個（IFN-γ、ICAM1），表達下調(diào)的基因8個（CCL3L1、IL12B、ILIR1等）；陰性組與健康對照組相比較表達上調(diào)的基因有11個（IFN-γ、IRAK4、NF-κB2等），表達下調(diào)的基因

8、1個（BAFF-R）。結(jié)論：腎移植受者HCMV感染后，HCMV-TLR信號活化可