資源描述:
《超聲法提取桑黃總黃酮的工藝研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、超聲法提取桑黃總黃酮的工藝研究作者:夏國(guó)華,戈延茹,傅海珍,戚雪勇【摘要】目的:研究超聲法提取桑黃中總黃酮的最佳工藝。方法:設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),采用超聲輔助提取,對(duì)桑黃中總黃酮的提取工藝進(jìn)行研究。結(jié)果:以總黃酮提取率為指標(biāo),得出超聲法提取桑黃總黃酮的最佳工藝為乙醇濃度70%,提取溫度45℃,料液比1∶30,提取時(shí)間45min。結(jié)論:該工藝提取桑黃中總黃酮,方法簡(jiǎn)單,耗時(shí)短,提取率高。【關(guān)鍵詞】桑黃;總黃酮;超聲提取;正交設(shè)計(jì) [Abstract]Objective:ThebestextractiontechniqueoftotalflavonoidsfromPhellinusVanin
2、iiwithultrasonicassistedtechniquewasexplored.Methods:Theorthogonaldesignwasusedintheresearchontheultrasonicassistedtechniqueextractiontechnique.Results:Theoptimumconditionsoftheextractionwereasfollows:ethanol70%;extractingtemp45℃;theratioofsolidtoliquid1∶30;extractingtime45min.Conclusion:Thi
3、sprocesswasfeaturedbyhigherextractionrateandshorterextractiontime.8 [Keywords]PhellinusVaninii;totalflavonoids;ultrasonic;orthogonaldesign 桑黃屬擔(dān)子菌亞門、多孔菌科,又稱桑臣、桑耳、胡孫眼、孔菌等,是一種珍貴的藥用真菌,在我國(guó)傳統(tǒng)中藥中用于治療痢疾、盜汗、血崩等[1]。目前主要應(yīng)用于肝炎及癌癥的治療,其特有的抗腫瘤活性及低毒性使其成為研究熱點(diǎn)[2,3]。桑黃主要化學(xué)成分為多糖和黃酮?,F(xiàn)有的關(guān)于桑黃的文獻(xiàn)報(bào)道中,提取桑黃總黃酮多采用乙醇浸提或
4、回流提取,試驗(yàn)耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng),且提取率不理想[4]?! ”狙芯坎捎贸曒o助提取,并對(duì)提取條件進(jìn)行優(yōu)化?! ?儀器與試劑 1.1儀器 KQ250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);RotavaporR200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(德國(guó)Buchi公司);FD1C50冷凍干燥機(jī)(北京博醫(yī)康技術(shù)公司);UV2401型紫外分光光度儀(日本島津公司)。 1.2試劑8 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(南京澤朗,經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)純度大于99%);桑黃子實(shí)體(PhellinusVaninii,長(zhǎng)白山區(qū)楊樹野生桑黃,購(gòu)自延吉長(zhǎng)白山特產(chǎn)經(jīng)營(yíng)部,本院張朝輝教授鑒定);水為實(shí)驗(yàn)室自制去離子水,提取乙醇(廣源醫(yī)藥,藥
5、用規(guī)格),其余試劑為分析純?! ?提取工藝 2.1提取方案 準(zhǔn)確稱取60目桑黃子實(shí)體粉末15g,加入一定體積的乙醇,室溫下浸泡12h后超聲提取,殘?jiān)孟嗤瑵舛群腕w積的乙醇再超聲提取一次,合并兩次提取液,回收乙醇,濃縮液冷凍干燥,得到桑黃提取物?! ?.2黃酮的定性反應(yīng) 2.2.1鹽酸-鎂粉反應(yīng)少量提取物用乙醇溶解,加少許鎂粉,濃鹽酸3~4滴。加入鎂粉前溶液呈暗黃色,滴加濃鹽酸后有泡沫產(chǎn)生,且升騰的泡沫呈橙紅色?! ?.2.2濃氨水反應(yīng)8提取物乙醇溶液點(diǎn)在濾紙上,置于濃氨水上方30s,紫外燈下觀察,顯黃色熒光斑點(diǎn)?! ?.2.3薄板層析提取物乙醇溶液點(diǎn)于硅膠板上,展開劑(正丁醇
6、∶醋酸∶水=4∶1∶5)中展開,置于紫外燈下觀察,顯黃色熒光斑點(diǎn)?! ?.3UV法測(cè)定桑黃總黃酮的含量[5] 2.3.1溶液的配制準(zhǔn)確稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品23.2mg,用70%乙醇溶解并定容至50ml,作為標(biāo)準(zhǔn)液備用。稱取0.8g硼酸和1.0g乙酸鈉,用70%乙醇溶解并定容至100ml,作為絡(luò)合試劑?! ?.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)蘆丁溶液0.5,1.5,2.0,2.5,3.0ml,加70%乙醇定容至25ml。分別精密吸取上述溶液5ml,加5ml絡(luò)合試劑混勻后,384nm處測(cè)光密度?! ∫怨饷芏菵為縱坐標(biāo),蘆丁濃度C(μg·ml-1)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得蘆丁濃度(C)與光密度(
7、D)關(guān)系曲線的回歸方程式:D=0.03C-0.0182,R2=0.9992。 2.4正交試驗(yàn) 2.4.1正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)8選取乙醇濃度、提取溫度、料液比和提取時(shí)間作為4個(gè)影響提取的因素,設(shè)計(jì)L9(34)的4因素3水平正交試驗(yàn)。如表1所示。表1正交試驗(yàn)因素與水平表 2.4.2總黃酮提取率分別準(zhǔn)確稱取各提取條件下的提取物約17.3mg,加70%乙醇定容至25ml。精密吸取各樣品液1.5ml,加70%乙醇定容至25ml。分別精密吸取5ml與5ml絡(luò)合試劑充分混合,384n