剝奪異相睡眠對大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸可塑性的影響

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1、蘭州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文剝奪異相睡眠對大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸可塑性的影響姓名:王德貴申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師:侯一平;宋焱峰2003.4.1蘭苧l墮蘭墮竺主堂垡堡苧——剝奪異相睡眠對大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸可塑性的影響摘要目的:探討剝奪異相睡Ilk(ParadoxicalSleepDeprivation,PSD)是否引起大鼠空間辨別性學(xué)習(xí)記憶能力的改變,PSD對海馬結(jié)構(gòu)中神經(jīng)元的突觸可塑性的影響。方法:38只雄性Wistar大鼠,在Morris水迷宮中篩選出能力相近的大鼠,篩選方法為在迷宮水池

2、邊隨機(jī)選取四個入水點(diǎn),分別依次將大鼠從各選取點(diǎn)釋放讓其尋找水中隱蔽平臺,找到平臺為成功,淘汰在迷宮中多次找不到平臺的無能力大鼠(n=4),余34只大鼠隨機(jī)分為4組:①剝奪異相睡眠組(paradoxicalsleepdeprivation,PSD,n=9),采用“小平臺水環(huán)境法”(FlowerPot蘭州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文TechniqHe)剝奪大氯募穗睡眠,方法為將大鼠赦入睡眠剿奪箱中直徑為6.5cin的小平臺上,當(dāng)大鼠進(jìn)入異栩睡眠時,就會由于肌張力的減低而掉入水中驚醒,從而建立剝奪舜相睡眠的大鼠模型。②大

3、平臺對照緝(Tankcontrol,TC{n=8)也置于“平臺永環(huán)境”,平臺直徑為20cm,大鼠所處環(huán)境與PSD組相似,③普通鼠籠對照綴,(NormalCageControl,CC,n=9),普通鼠籠飼養(yǎng),不放入“平臺承環(huán)境”。④釋游泳對照組,(NoSwimmingControl,NC,n=8)普通鼠籠飼養(yǎng),不放入“平臺水環(huán)境”。除NC組外,其余三組大藏凌Morris東逡蜜孛送行訓(xùn)練對跑,連續(xù)調(diào)練4天,每翳訓(xùn)練蓑從Morris水迷窿的水池邊隨機(jī)選取6個入水點(diǎn),將各組大鼠分別依次從各入水點(diǎn)放入,面向池壁,如

4、果大鼠在2分鐘內(nèi)找到平臺,翊在平臺上縑掩15秒。翔巢2分鎊內(nèi)我不到,系統(tǒng)會停止記錄著提示操作者引導(dǎo)大鼠到平臺上,同樣保持15秒。水迷宮記錄分析系統(tǒng)自動記錄游泳速度、距離、游泳潛伏期、游泳軌跡總點(diǎn)數(shù)、記憶得分等稻關(guān)參數(shù)。每只動物在迷富中測試完成后,立即放入各自鼠籠(箱),PSD組大鼠放入睡眠剝奪箱繼續(xù)剝奪異相睡眠。簸蜃一天游泳纓束后,將各綴大鼠灌注取藏,取海馬縫撬送毒亍夏蠟包埋切片,通過免疫組化方法檢測各組大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸囊泡蘭州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文膜蛋白(synaptophysin,SYN)的表達(dá),SYN是

5、突觸終末突觸囊泡膜上的特異性蛋白,可作為突觸的特異性標(biāo)記物,可反映突觸的數(shù)量和密度。利用MO?AC病理圖像分析儀測量各組大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸囊泡膜蛋白的免疫組化陽性產(chǎn)物光密度值。結(jié)果:①游泳速度游泳第一天,各組大鼠游泳速度相比較無差異,第二天TC組游泳速度較cc組快(p(o.05)。第三天和第四天PSD組和Tc組大鼠游泳速度較cC組快,差異有顯著性(第三天po.05),從第二天開始到第四天,P

6、SD組大鼠游泳距離大于CC組和TC組,差異有顯著性(p<0.01)。游泳潛伏期結(jié)果顯示,第一天各組間比較差異無顯著性(臚o.05),第二天到第四天,PSD組大鼠游泳潛伏期比CC組和TC組長(p

7、淺,顆粒狀產(chǎn)物較少,表現(xiàn)為彌漫棕色分布。用MOTAC病理圖像分析儀測得各組大鼠海馬結(jié)構(gòu)切片突觸囊泡膜蛋白免疫反應(yīng)陽性產(chǎn)物光密度值并進(jìn)行方差分析,PSD組和NC組大鼠海馬結(jié)構(gòu)突觸囊泡膜蛋白陽性產(chǎn)物光密度值較cc組和Tc組低(p

8、馬結(jié)構(gòu),Morris水迷宮,突觸可塑性,突觸囊泡膜蛋白,小平臺水環(huán)境法,大鼠蘭州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文EFFECTSOFPARADOXlCALSLEEPDEPRIVATIoNoNSYNAPTlCpLAS曩ClTVoFlllPPoCA觚PALFol姓鐮ATloNINRATSA囂STRAC蕈objective:ThisstudyexaminedtheeffectsofParadoxicalsleepdeprivation(PSD)on

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