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1、本科畢業(yè)論文匯報YourtextinhereYourtextinher蒲公英對小鼠腸道微生態(tài)及免疫功能的影響指導(dǎo)老師:鄺棗園、黃萍(教授)學(xué)生:黃鳳琴專業(yè):2006級中藥學(xué)學(xué)號:2006031033匯報提綱實驗研究意義1實驗材料與方法2實驗結(jié)果3實驗討論與展望4蒲公英,為菊科多年生草本蒲公英、堿地蒲公英或同屬數(shù)種植物的干燥帶根全草,歸肝、胃經(jīng)。功能清熱解毒利濕。臨床應(yīng)用:治胃脘疼痛清熱緩瀉解便秘利膽退黃涼血排膿治痢疾治療闌尾炎國外:系列保健食品蔬菜食用:“天然野味”藥物介紹:蒲公英實驗研究意義腸道微生態(tài)對動物的營養(yǎng)、生理、免疫等方面起重
2、要作用,其組成、結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性與生理功能的關(guān)系已成為探討藥物如何通過腸道微生物影響人體健康的關(guān)鍵。傳統(tǒng)上中草藥的使用,絕大多數(shù)以水煎劑的形式通過口服吸收而發(fā)揮作用,藥物中的有效成分在進(jìn)入腸道之后不可避免地與腸道菌群發(fā)生關(guān)聯(lián)。實驗研究方向文獻(xiàn)研究:中藥蒲公英對腸道微生態(tài)的研究欠缺。本研究根據(jù)蒲公英的功效特點,觀察蒲公英水煎劑對KM小鼠腸道菌群、血中淋巴細(xì)胞、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的變化,探討蒲公英對腸道微生態(tài)以及免疫功能的影響情況。實驗材料與方法實驗材料動物:昆明種小鼠,廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。藥物:蒲公英由中藥鑒定學(xué)教研室黃海波老師鑒定
3、。試劑:Anacropack厭氧產(chǎn)氣袋,厭氧指示劑,日本三菱MGC出品;血細(xì)胞分析儀溶血劑-ⅡDH-680,血細(xì)胞分析儀清洗液DH-520,血細(xì)胞分析儀稀釋液DH-640。培養(yǎng)基:MRS瓊脂、雙歧桿菌BS培養(yǎng)基(BSMedium)、伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)、腸球菌瓊脂培養(yǎng)基(EC)。主要儀器:超凈工作臺、YSQ-LS-50S立式壓力蒸汽滅菌器、FA2004N電子天平、PV-1漩渦混勻器、PYX-DHS-50×65-BS隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱、日本三菱厭氧培養(yǎng)袋;KX-21型全自動血液分析儀(日本東亞)。實驗動物及藥物KM小鼠廣州中醫(yī)藥大學(xué)實
4、驗動物中心提供蒲公英:中藥鑒定教研室黃海波老師鑒定常規(guī)煎制培養(yǎng)基MRS瓊脂BSMediumEMB瓊脂EC瓊脂腸球菌乳酸桿菌雙歧桿菌大腸桿菌研究方法組織器官采集腸道菌群檢測動物形態(tài)觀察血樣分析spss13.0統(tǒng)計軟件處理動物分組及給藥方法動物分組及給藥方法昆明種小鼠50只正常對照組等量生理鹽水林可霉素組鹽酸林可霉素注射液蒲公英低濃度組0.125g/mL生藥量蒲公英中濃度組0.25g/mL生藥量蒲公英高濃度組0.5g/mL生藥量給藥10天后,處死小鼠,采集標(biāo)本,進(jìn)行各種指標(biāo)檢測。實驗流程小鼠分組蒲公英組中濃度組低濃度組高濃度組各組小鼠取盲腸
5、糞便稀釋度10-4稀釋度10-5稀釋度10-6大腸桿菌林可霉素組正常對照組平板接種大腸桿菌乳酸桿菌雙歧桿菌腸球菌計算菌量,分析數(shù)據(jù),得出結(jié)論實驗結(jié)果實驗研究結(jié)果脾指數(shù)胸腺指數(shù)腸道菌群分析血樣分析小鼠體重實驗結(jié)果(一)蒲公英對小鼠體重情況的影響(g)組別第1天第5天第10天正常對照組23.20±1.7524.50±2.7125.40±2.12林可霉素組23.70±1.5725.30±1.7026.40±1.71高濃度組23.90±1.9127.40±1.43*26.80±1.93中濃度組24.10±1.7926.80±2.66*26.20
6、±2.44低濃度組24.20±1.8125.60±2.7925.90±2.18各組小鼠給藥第1、5、10天結(jié)果比較(?x±s),n=9注:與正常組比較,*P<0.05。提示:蒲公英中、高濃度組體重增加,在給藥第5天與正常對照組比較具統(tǒng)計學(xué)意義。實驗結(jié)果(二)蒲公英對小鼠血常規(guī)的影響組別N淋巴細(xì)胞(109/L)白細(xì)胞(109/L)中值細(xì)胞(109/L)紅細(xì)胞(109/L)血紅蛋白(g/L)血小板(109/L)正常對照組103.47±0.934.71±0.870.744±0.228.84±0.49154.78±6.36991.00±217.
7、16林可霉素組102.37±0.77**3.16±0.97**0.460±0.22**8.39±0.64147.30±6.601064.2±159.39高濃度組102.47±0.75**3.67±1.02*0.556±0.19*8.26±0.63157.90±6.051035.0±143.29中濃度組103.06±0.764.73±1.320.655±0.20*8.69±0.92159.56±14.141039.0±238.31低濃度組102.35±1.39**3.38±1.56**0.458±0.20**7.54±1.25**139.
8、11±13.82**756.00±205.85*提示:蒲公英高、低濃度組淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù)低于正常對照組。各組小鼠給藥10天后淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù)等結(jié)果比較(?x±s),n=9注:與正常對照組比較,*P<0.