農(nóng)殘檢測步驟.doc

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1、農(nóng)殘速測步驟一、試劑配制緩沖液：將一包緩沖劑倒入510ml蒸餾水中攪拌溶解。酶：倒入10ml緩沖液至瓶中，搖勻溶解。顯色劑：倒入10ml緩沖液至瓶中，搖勻溶解。底物：加入10ml蒸餾水至瓶中，搖勻溶解。試劑配制好后放入冰箱冷藏，保質(zhì)期為3個月。二、儀器預(yù)熱及空白對照。提前將儀器開機(jī)預(yù)熱，此過程一般10分鐘。登陸賬號和密碼均為000000。預(yù)熱結(jié)束后點(diǎn)空白對照，觀察每個通道顯示的光強(qiáng)度，在10000-40000則光源正常。三、樣品制備、提取1、將樣品剪至1cm左右大小，稱取2g樣品至樣品瓶中。塊莖類稱4g。2、加入10ml緩沖液振蕩1-2分鐘，放置10-15分鐘備用。若液體渾濁或

2、雜質(zhì)較多，則過濾后備用。三、加試劑1、每個樣品提取液分別吸取2.5ml至刻度試管中，另取一只試管加入2.5ml緩沖液代替樣品作為空白對照。2、加入100ul酶、100ul顯色劑到各試管中，混勻反應(yīng)15分鐘。若室溫低于25℃，需37℃水浴下反應(yīng)。3、加入100ul底物至各試管中，搖勻。四、上機(jī)比色1、將試管中液體倒入比色皿，放入速測儀檢測通道。第一通道放入空白對照，其余通道放入樣品溶液。（毛玻璃面對準(zhǔn)自己。）2、關(guān)上蓋子，點(diǎn)擊“試劑對照”--開始，等待3分鐘即可。五、結(jié)果1、通過數(shù)據(jù)管理可查看和打印結(jié)果。2、若抑制率大于50%，則結(jié)果判定為陽性。出現(xiàn)陽性時需復(fù)測1-2次，若仍為陽

3、性，方可下結(jié)論。六、注意1、蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬菜浸提或采用表面測定法。2、對一些含葉綠素較高的蔬菜（緩沖液浸提后，明顯顏色較深的樣品），也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾。