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《大豆GmFLC基因的克隆與功能驗(yàn)證.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、摘要大豆(Glycinemax)是～年生豆科植物，是世界上最重要的豆類。開花是植物由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)型的最重要的一個(gè)過程，在合適的時(shí)間完成這個(gè)轉(zhuǎn)型是植物實(shí)現(xiàn)生殖發(fā)育所必需的。通過對(duì)開花時(shí)間的調(diào)控，植物才能實(shí)現(xiàn)種問同步雜交并產(chǎn)生盡可能多的種子，這是植物在長(zhǎng)期進(jìn)化過程中形成的對(duì)環(huán)境條件的一種適應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)利用分子生物學(xué)手段對(duì)大豆GIycinemaxFLC基因進(jìn)行了克隆并對(duì)其功能進(jìn)行了初步驗(yàn)證，對(duì)大豆開花過程中相關(guān)基因的調(diào)控機(jī)理有了初步的認(rèn)識(shí)。并對(duì)GmFLC基因在大豆開花過程的作用有了一定的了解。通過初步的實(shí)驗(yàn)，利用基因克隆技術(shù)從自貢冬豆和黑河27中克隆得到了一個(gè)MADS．box樣基因，該基因與
2、擬南芥FLC基因的N端具有很高的同源性，推測(cè)其可能為大豆GmFLC基因。通過對(duì)比自貢冬豆和黑河27中GmFLC的序列發(fā)現(xiàn)，其CDS序列存在一個(gè)同義突變，兩者所編碼的蛋白序列完全一致。進(jìn)一步的qRT-PCR結(jié)果表明，GmFLC主要在葉片中表達(dá)，當(dāng)短日處理時(shí)，隨著發(fā)育過程其在葉片中的表達(dá)逐漸降低，并且在花中有一定表達(dá)。光周期實(shí)驗(yàn)表明，GmFLC表達(dá)不受光節(jié)律調(diào)控，但是其表達(dá)會(huì)受到光周期長(zhǎng)短的影響：短日下受到抑制，長(zhǎng)日照下被促進(jìn)。綜上所述，使用常規(guī)克隆方法得到了～個(gè)MADS．box基因，該基因可能參與大豆生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)節(jié)，并可能參與大豆花的發(fā)育。這一基因與擬南芥FLC基因在表達(dá)模式和調(diào)節(jié)方式上可能不
3、同。通過生物信息學(xué)和分子生物學(xué)的方法，找出大豆的懈C基因，對(duì)其進(jìn)行研究，這對(duì)深入了解大豆的開花和春化作用的機(jī)理和過程有著重要的作用，對(duì)未來大豆的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)也有很大的指導(dǎo)意義。關(guān)鍵詞大豆，GmFLC，克隆ABSTRACTSoybean(Glycinemax)，theangiospermDicotyledon，beanmesh，Leguminosae，Papilionoideae，soybeanspecies．KnownasShUinancientChina，isaseedofplantsrichinprotein．Soybeanisallannualleguminousplant，itsseed
4、s，alsokalownassoybean．Soybeanisthemostimportantlegumesintheworld．SoybeanoriginatedinChina，iswidelyregardedastheodginalongtheYunnan—GuizhoUPlateau．SomebotanistsconsideredtobeofChineseoriginwusulisoybeanderived．Floweringisthemostimportamofaprocessplanttransitionfromvegetativegrowthtoreproductivegrowt
5、h．Throughtheregulationoffloweringtime，plantscanachievesynchronizationinterspecifichybridizationandproduceasmuchaspossibletheseedsofplantsinthelongprocessofevoltltionofanadaptationtoenvironmentalconditions．InthisstudY，bymeansofmolecularbiologyofsoybeanGmFLCgenewasclonedanditsfunctionwasperformedtoco
6、nfirmapreliminaryunderstandingofthegeneregulationmechanismintheprocessofsoybeanflowering．AndGmFLCgeneofsoybeanfloweringprocesshaveacertainunderstanding．Throughpreliminaryexperiments，clonedfromtheZigongwinterbeansandHeihe27，aMADS—box—likegene，thegenewiththeN—terminaloftheArabidopsisFLCgenewithhighho
7、mology，suggestingthatitmayforsoybeanGmFLCgene．BythecontrastZigongdongdoubeansandHeihe27GmFLCsequenceCDSsequenceofasynonymousnmtation，andtheencodedproteinsequenceisexactlythesame．FurtherqRT—PCRresultsshowtha
