實(shí)驗(yàn)6線粒體和液泡系的超活染色與觀察.ppt

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1、實(shí)驗(yàn)六線粒體和液泡系的超活染色與觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、觀察動(dòng)植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡系的形態(tài)數(shù)量與分布；２、學(xué)習(xí)一些細(xì)胞器的超活染色技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞的各項(xiàng)活動(dòng)所需要的能量，主要通過線粒體呼吸作用來提供?；铙w染色是應(yīng)用無毒或毒性較小的染色劑真實(shí)地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動(dòng)的一種染色方法。詹納斯綠B是線粒體的專一性活體染色劑，線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)（即有色狀態(tài)）呈藍(lán)綠色，而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原，成為無色狀態(tài)。中性紅為弱堿性染料，3-氨基-6甲氨基-2-甲

2、基吩嗪鹽酸鹽。對液泡系（即高爾基體）的染色有專一性，只將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)完全不著色，這可能是與液泡中某些蛋白質(zhì)有關(guān)。三、實(shí)驗(yàn)用品1、器材顯微鏡、恒溫水浴鍋、剪刀、鑷子、刀片、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙.2、試劑（1）Ringer溶液（2）10%，1/3000中性紅溶液（3）1%，1/5000詹納斯綠B溶液四、實(shí)驗(yàn)材料人口腔上皮細(xì)胞洋蔥鱗莖內(nèi)表皮綠豆幼根根尖五、實(shí)驗(yàn)步驟1、人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金屬板上↓滴2滴1

3、/5000詹納斯綠B染液↓用牙簽口腔頰粘膜處稍用力刮取上皮細(xì)胞↓刮下的粘液狀物放到載玻片的染液滴中↓染色10~l5min（注意不可使染液干燥，必要時(shí)可再加滴染液）↓蓋上蓋玻片，顯微鏡下觀察２、洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞線粒體的超活染色與觀察載玻片于37℃恒溫水浴：1/5000詹納斯綠Ｂ溶液　?。钡窝笫[鱗莖內(nèi)表皮　　鑷子撕取染色10－15min，吸去染液，加Ringer溶液１滴，蓋上蓋玻片，顯微鏡下觀察。染過色但沒有染上的細(xì)胞染色的細(xì)胞未染色細(xì)胞線粒體洋蔥鱗莖細(xì)胞線粒體死亡的染色細(xì)胞3、植

4、物細(xì)胞液泡系的超活染色與觀察取豆芽的根尖↓用刀片縱切根尖放入中性紅染液滴中，染色5~10min↓吸去染液，滴一滴Ringer液↓蓋上蓋玻片進(jìn)行鏡檢（鑷子輕輕地下壓蓋玻片，使根尖壓扁利于觀察）結(jié)果：在高倍鏡下，先觀察根尖部分的生長點(diǎn)的細(xì)胞，可見細(xì)胞質(zhì)中散在很多大小不等的染成玫瑰紅色的圓形小泡，這是初生的幼小液泡；然后，由生長點(diǎn)向延長區(qū)觀察，在一些已分化長大的細(xì)胞內(nèi),液泡的染色較淺，體積增大,數(shù)目變少；在成熟區(qū)細(xì)胞中，一般只有一個(gè)淡紅色的巨大液泡，占據(jù)細(xì)胞的絕大部分，將細(xì)胞核擠到細(xì)胞一側(cè)貼近細(xì)胞壁

5、處。作業(yè)1.繪口腔上皮細(xì)胞示線粒體的形態(tài)與分布，并簡要分析2.繪示綠豆根尖液泡系的形態(tài)與分布