響應(yīng)面法優(yōu)化葉黃素的提取工藝-論文.pdf

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1、科學(xué)試驗與研究響應(yīng)面法優(yōu)化葉黃素的提取工藝周銘懿尚宏麗郭雪松遼寧醫(yī)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院,錦州121001摘要以玉米蛋白粉為原料,采用超聲波輔助提取葉黃素。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,選擇超聲功率、超聲時間及液料比為自變量,以葉黃素的得率為響應(yīng)值,運用響應(yīng)面法研究各自變量及其交互作用對葉黃素得率的影響。結(jié)果表明:超聲輔助提取玉米蛋白粉中葉黃素的最佳工藝條件:超聲功率295W、超聲時間32min和液料比27:1(mL/g)。色譜條件:447nm、柱溫25℃、進樣量10L、流速0.5mL/min及流動相為甲醇與乙腈(50:50)。在

2、此條件下,高效液相色譜(HPLC)法測定并計算出葉黃素的平均得率為6.9827%,與預(yù)測值的相對誤差小,回歸模型擬合情況較好,預(yù)測能力良好。關(guān)鍵詞玉米蛋白粉;超聲輔助提??;響應(yīng)面法;高效液相色譜中圖分類號:S816.32文獻標志碼:A文章編號:1002—2813(2014)17—0007—05葉黃素,即植物黃體素,是一種常見于自然界影響其生理活性,減少溶劑使用量,可以降低成天然的類胡蘿卜素。其在抗氧化、眼盲病、預(yù)防癌本。玉米蛋白粉中色素提取目前主要采用有機溶癥、心血管疾病、冠心病及增強免疫力等方面有著劑,采用正交設(shè)計或超聲

3、輔助手段對提取工藝進行廣泛的生物活性。此外它還作為著色能力極強的天優(yōu)化。但綜合采用有機溶劑、超聲輔助和響應(yīng)面法然色素,是飼料中的營養(yǎng)性著色劑,已有大量研究優(yōu)化提取葉黃素的研究尚未見報道。在雞飼料中應(yīng)用葉黃素給“三黃雞”或雞蛋黃著試驗以玉米蛋白粉為原料,采用響應(yīng)面法優(yōu)化色。在動物和禽飼料中添加葉黃素,已證實對動物超聲輔助有機溶劑法提取葉黃素,通過用Design及禽類的中樞神經(jīng)系統(tǒng)健康有積極作用。Expert8.0.6軟件設(shè)計,根據(jù)Box—Behnken設(shè)計原對葉黃素的研究是國內(nèi)及國際的一個熱點問理對各主要影響因子超聲功率、超

4、聲時間及液料比題,但是以玉米蛋白粉為原料的研究并不多見。玉間的單一和交互作用等展開研究,得出在超聲作用米蛋白粉是濕法生產(chǎn)玉米淀粉中的主要副產(chǎn)品,不下,制備葉黃素的最佳工藝參數(shù)。僅蛋白質(zhì)含量豐富,葉黃素含量也比較豐富。若將1材料與方法它提取蛋白質(zhì)后再用來提取葉黃素單體,不僅可以1.1材料與試劑提高玉米蛋白粉的附加值,滿足市場對葉黃素的需玉米蛋白粉(80目,由錦州元成集團提供);要,還可以有力的解決環(huán)境污染等問題。葉黃素標準品(上海遠幕生物科技有限公司);乙葉黃素傳統(tǒng)的提取方法是有機溶劑提取法,但腈和甲醇為色譜純(天津化學(xué)試劑

5、有限公司);水該法難以保留其原有成分,不易純化,難以剔除雜為雙蒸水;其他試劑均為國產(chǎn)分析純。質(zhì),提取時間長,效率低,且溶劑消耗量大,成本1.2儀器與設(shè)備高,污染環(huán)境。溶劑易殘留而導(dǎo)致在一定程度上降低產(chǎn)品安全性,因此常常與其他方法聯(lián)合使用。利Waters高效液相色譜儀;Water515型泵;Breez工作站;C—R3A數(shù)據(jù)處理器;AR2130電子分析天用超聲技術(shù)可以改善上述缺陷,有助于縮短提取時間,降低雜質(zhì)含量,無需加熱,提取率高且基本不平;RE一5298A真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;HH一型數(shù)顯恒溫水浴鍋;pH計;BILON92一II

6、超聲波細胞粉碎機;TDL一5一A臺式離心機;14一A型電熱鼓風(fēng)干收稿日期:2014—04—17燥箱;C】8柱(250mm×4.6mm,5m)等。第~作者:周銘懿,E—mail:zhoumingyi0801@163.oom通信作者:郭雪松,E—mail:356365279@qq.tom飼料研究。)昶les缸:A辣(:《17,211147科學(xué)試驗與研究1.3試驗方法2結(jié)果與分析1.3.1葉黃素含量的測定2.1葉黃素提取及高效液相色譜(HPLC)圖1.3.1.1色譜條件根據(jù)1.3.1.3條件提取葉黃素,在1.3.1.1色C18柱

7、(250mm×4.6mm,5m);甲醇與乙譜條件下,通過HPLC進行檢測,葉黃素在質(zhì)量濃腈(50:50)作為流動相,流速0.5mL/min,檢測度范圍1.0—14txg/mL,質(zhì)量濃度與峰面積呈良好波長447Ilm,柱溫25cC,進樣量:10txL。的線性關(guān)系,標準曲線方程為Y=10390X一1100,1.3.1.2葉黃素標準曲線的繪制R=0.9996。葉黃素標準品及提取液中葉黃素精確稱取2.0mg葉黃素標準品,用甲醇定容HPLC圖見圖1和2,在選定的測定條件下葉黃素峰至50mL,混勻,其質(zhì)量濃度為40Ixg/mL,備用。

8、跟其他峰分離很好,保留值為19.765min。再分別取上述標準液0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mL置于10mL容量瓶中,甲醇定容并搖勻,制成質(zhì)量濃度分別為2、4、6、8和l0g/mL的標準液。將上述標準液先后注入液相色譜儀內(nèi),以質(zhì)量濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,建立回歸方程。l\刪l\出面1.3

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