響應(yīng)面法優(yōu)化納豆菌糖肽超聲提取工藝-論文.pdf

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1、第14卷第7期中國食品學(xué)報(bào)Vo1.14No.72014年7月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJu1.2014響應(yīng)面法優(yōu)化納豆菌糖肽超聲提取工藝沈柱英黃占旺吳少??敌§巢芫肝?江西農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院江西省天然產(chǎn)物與功能食品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室南昌330045)摘要采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化超聲輔助提取納豆茵糖肽工藝。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上。研究液料比、NaC1濃度、超聲時(shí)間對(duì)納豆茵糖肽提取得率的影響。通過Box—Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法確定提取BNP的最佳

2、工藝務(wù)件。試驗(yàn)結(jié)果表明,超聲輔助提取納豆茵糖肽的最佳工藝條件是:液料比24:1mL/g,NaC1濃度0.15mol/L,提取時(shí)間41rain。在此條件下,BNP最高提取得率為1.89%。關(guān)鍵詞納豆;糖肽;超聲輔助提?。豁憫?yīng)面法分析文章編號(hào)1009—7848(2014)07—0110—08多糖又稱多聚糖(polysaccharide),是1類具以納豆凍干粉為研究對(duì)象,采用響應(yīng)面分析法對(duì)有生物活性的高分子化合物.大量藥理及I臨床研超聲提取BNP工藝進(jìn)行優(yōu)化,以期獲得較高的提究證實(shí)多糖具有抗氧化衰老【”,抑制腫瘤[21,免疫調(diào)取率

3、,為后續(xù)BNP活性研究提供試驗(yàn)基礎(chǔ)。節(jié)嘲,降血糖嗍,降血脂嘲等多種生理功能。隨著糖生物學(xué)研究的迅速發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)糖蛋白(糖肽)是體現(xiàn)糖類化合物最重要生物活性的生物分子之1材料與方法一在細(xì)胞一細(xì)胞識(shí)別,細(xì)胞的信號(hào)調(diào)節(jié),細(xì)胞分化,1.1材料與試劑及免疫應(yīng)答等重要生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要作黃豆經(jīng)清洗浸泡,高溫滅菌后,接納豆芽孢桿用。Wang等[91提取人參糖肽,發(fā)現(xiàn)其對(duì)正常小鼠及菌,34℃發(fā)酵24h,于4℃冰箱中后熟12h,研磨、由四氧嘧啶和鏈尿菌素引起的高血糖大鼠具有降凍干、粉碎過40目篩。采用石油醚(30~60℃),45低血糖和

4、肝糖原的作用:張俊堂【,ol發(fā)現(xiàn)薄芝糖肽℃冷凝回流8~12h后靜置,傾去石油醚層,剩余樣具有減少肺癌患者胸腔積液以及縮小腫瘤的作品溶劑揮干,得脫脂納豆凍干粉。用;任國艷等【“】研究表明海蜇糖肽可以提高小鼠石油醚(30~60oC)、濃硫酸、無水乙醇、考馬斯脾細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化能力以及碳廓清能力。亮藍(lán)、葡萄糖均為分析純;苯酚,重蒸。納豆是我國傳統(tǒng)發(fā)酵制品.由納豆芽孢桿菌1.2儀器與設(shè)備(Bacillusnatto)在一定溫度、濕度條件下發(fā)酵蒸煮SB一3200超聲波清洗機(jī)、Scientz系列真空冷大豆制備而成。近年來,大量研究表明納豆

5、具有溶凍干燥機(jī),寧波新芝生物科技股份有限公司;UV一血栓【12l,抗腫瘤【l31,抗氧化【M5】,預(yù)防骨質(zhì)疏松【61等5200pc紫外一可見分光光度計(jì),上海元析儀器有限多種保健功能,其活性成分如納豆激酶、染料木公司;TGL一20000一CR高速臺(tái)式冷凍離心機(jī),上海素、納豆多糖、維生素K和一高聚谷氨酸等相繼安亭科技儀器廠;QT一2漩渦混合器,上海琪特分被發(fā)現(xiàn)。納豆菌糖肽(BNP),即從納豆中提取得到析儀器有限公司。的l類蛋白結(jié)合多糖,目前關(guān)于該糖復(fù)合物的提1.3方法取及其功能的研究國內(nèi)外尚未見相關(guān)報(bào)道。本文1-3.1納豆菌糖肽

6、的提取【7l稱取脫脂納豆凍干粉,加入適量的提取液于漩渦混合器上充分混合,收稿日期:2013—07—21提取一定的時(shí)間后,離心(3000r/min,15min),收基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31160337)集提取液.加入無水乙醇,至乙醇的體積分?jǐn)?shù)為作者簡介:沈柱英,女,1988年出生,碩士生75%,離心(3900r/min,20min),收集沉淀,定容,通訊作者:黃占旺第14卷第7期響應(yīng)面法優(yōu)化納豆茵糖肽超聲提取工藝備用。定的理論BNP質(zhì)量。l-3.2苯酚一硫酸法葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制【8】準(zhǔn)(1)BNP粗品的制備:脫脂納

7、豆凍干粉經(jīng)水提確稱取烘干至恒質(zhì)量的葡萄糖0.0625g。定容至醇沉后,沉淀用少量的水溶解,冷凍干燥后得BNP500mL,即得到125}~g/mL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。分粗品。別取20,30,40,50,60,70,80L標(biāo)準(zhǔn)溶液于具塞(2)理論BNP質(zhì)量:稱取5mgBNP粗品定容試管中.用蒸餾水補(bǔ)齊至1mL。然后加入1mL至50mL,分別取1.0mL至3支具塞試管中.按1.6%的苯酚溶液和5mL濃硫酸.搖勻.靜置303.2節(jié)方法顯色。于490nm波長處測定吸光度.以min,以1mL蒸餾水作對(duì)照,按同樣方法顯色,于1.0mL蒸餾水

8、為空白。最后根據(jù)回歸方程計(jì)算理490nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo),論BNP含量。糖含量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回1-3.4單因素試驗(yàn)準(zhǔn)確稱取脫脂納豆凍干粉0.歸方程為:Y=I.1153X+0.0Cl94,R=0.9980。5g若干份,以一定濃度的NaC1溶液作為提取溶

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