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《去甲斑蝥素誘導人紅白血病K562細胞凋亡的實驗研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第8卷第1期中國組織化學與細胞化學雜志Vol.8No.11999年3月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYTOCHEMISTRYmar.1999去甲斑蝥素誘導人紅白血病K562*細胞凋亡的實驗研究*******孫震曉趙天德魏育林李家實(山東聊城師范學院,聊城252059;**中日友好臨床醫(yī)學研究所***北京中醫(yī)藥大學中藥學院,北京100029)-1摘要體外實驗證明10μg.ml去甲斑蝥素作用于人紅白血病K562細胞24h,可誘導K562細胞發(fā)生凋亡。提取加藥組細胞DNA進行瓊脂糖凝膠電泳呈現(xiàn)典型的DNA“梯子”,同時加藥組細胞出現(xiàn)核固縮
2、、碎裂及胞漿濃縮等形態(tài)學變化。流式細胞測試結(jié)合形態(tài)學觀察,特別是細胞超微結(jié)構(gòu)觀察,證明去甲斑蝥素誘導-1的K562細胞凋亡大部分發(fā)生在細胞周期的M期,也有部分發(fā)生在間期。免疫細胞化學結(jié)果表明,10μg.ml去甲斑蝥素作用于人紅白血病K562細胞24h,與對照組相比,加藥組細胞中bcl-2蛋白表達增強,而Bax蛋白表達減弱,兩組間有顯著性差異(P<0.001)。關(guān)鍵詞去甲斑蝥素細胞凋亡K562細胞Bcl-2BaxSTUDYONAPOPTOSISOFK562HUMANMYELOIDLEUKEMIACELLSINDUCEDBYNORCANTHARIDIN*******SunZ
3、henxiao,ZhaoTiande,WeiYulin,LiJiashi**(LiaochengTeacher'sCollege,Liaocheng252059;China-Japan***FriendshipInstituteofClinicalMedicalSciences;BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing100029China)-1It'sprovedthat10μg/mlNCTDcaninduceapoptosisinK562humanmyeloidleukemiacellsinvitro
4、after24h.AcharacteristicDNA"ladder"wasdetectedbyusingagarosegelelectrophoresis.SometreatedK562cellswerefoundcondensedwithnuclearchromatincom-pactionandbreakingup.ByFACSanalysisandmorphologialobservation,especiallybyul-trastructuralobservation,weprovedthatmostapoptosisofK562cellsoccurredi
5、nmitosisphaseandsomeothersinitiatedininterphaseofcellcycle.It'sfoundtheexpressionofbcl-2oncoproteinwasdecreasedwhileBaxincreasedinthetreatedK562cellsbyimmunocy-tochemicalstaining,whichwasinstrikingcontrastwiththecontrolgroup(P<0.001).KeyWordsNorcantharidin;Apoptosis;K562;bcl-2;Bax去甲斑蝥素(N
6、orcantharidine,NCTD)是在反復研究抗腫瘤活性成分斑蝥素(Canthari-dine,CA)構(gòu)效關(guān)系的基礎上,由呋喃及順丁烯二酸酐經(jīng)Diels-Alder反應人工全合成的一種化合物,與斑蝥素相比,缺少1、2位的兩個甲基,兩者立體構(gòu)型相同。臨床上用于治療多種[1-3]癌癥,以原發(fā)性肝癌為主,顯示了較好療效。藥理實驗及臨床實踐還表明,NCTD對正常[4,5]骨髓細胞沒有抑制作用,反而有很好的升白效果,是一種抗腫瘤機理頗為獨特的藥物。細胞凋亡是一種有別于細胞壞死的細胞主動參與并遵循一定程序的自我消亡過程,具有*高等學校博士學科點專項科研基金資助項目第1期孫震曉
7、等.去甲斑蝥素誘導人紅白血病K562細胞凋亡的實驗研究93特殊的形態(tài)和生化特征。越來越多的實驗表明,藥物等對腫瘤細胞的殺傷作用與誘導其產(chǎn)生[6]凋亡有關(guān)。既然抗腫瘤藥物可通過引起腫瘤細胞凋亡來發(fā)揮其治療作用,而細胞凋亡又是一個可被抑制或激活的可調(diào)節(jié)過程,那么對藥物引起細胞凋亡機制的深入研究,必有助于臨床上提出新的治療方案,使腫瘤治療走出低谷。本文以人紅白血病K562細胞為靶細胞,研究了NCTD對K562細胞的殺傷作用及其引發(fā)細胞死亡的方式,并運用細胞生物學的方法對NCTD誘導K562細胞凋亡的特點及可能機制進行了初步探討。材料和方法1.細
