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《響應(yīng)面分析法優(yōu)化小魚(yú)仙草總黃酮的提取工藝研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、JournalofMathematicalMedicineVol.23No.22010文章編號(hào):10044337(2010)02019404中圖分類(lèi)號(hào):R9446文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A藥學(xué)研究響應(yīng)面分析法優(yōu)化小魚(yú)仙草總黃酮的提取工藝研究嚴(yán)云良呂佩惠余陳歡(浙江中醫(yī)藥大學(xué)杭州310053)摘要:目的:確定小魚(yú)仙草總黃酮的最佳提取工藝條件。方法:以乙醇回流提取法提取小魚(yú)仙草總黃酮,采用分光光度法測(cè)定總黃酮的含量,以總黃酮提取得率為考察指標(biāo),考察溶媒倍數(shù)、提取時(shí)間和提取次數(shù)等因素對(duì)小魚(yú)仙草總黃酮提取得率的影響,利
2、用響應(yīng)面分析法優(yōu)化提取工藝,確定總黃酮的最佳提取工藝。結(jié)果:小魚(yú)仙草總黃酮的最佳提取工藝為:加藥材20倍量濃度為70%乙醇,于90!水浴回流提取3次,每次1.9h。此工藝下小魚(yú)仙草總黃酮的提取得率達(dá)8.50%。結(jié)論:該工藝提取得率高、操作簡(jiǎn)便,易于工業(yè)化大生產(chǎn)。關(guān)鍵詞:小魚(yú)仙草;黃酮;響應(yīng)面分析法doi:10.3969/j.issn.10044337.2010.02.030小魚(yú)仙草為唇形科石薺苧屬一年生草本植物Mosladian精密稱(chēng)取105!干燥恒重的蘆丁對(duì)照品10.6mg,加50thera的全草,別名疏花薺苧、野香薷等。具有祛
3、風(fēng)發(fā)表、利濕%乙醇溶解定容于50mL容量瓶,得濃度為2.12mgomL-1標(biāo)止癢之功效,主治感冒發(fā)熱、扁桃體炎、中暑頭痛、潰瘍病準(zhǔn)品溶液。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0等[1]。有關(guān)小魚(yú)仙草揮發(fā)油的研究報(bào)道較多,其揮發(fā)油主要ml,分別置25ml容量瓶中,加5%NaNO21.0mL,搖勻,放含有香荊芥酚、百里香酚、芳香醇和丁香烯等成分,具有較好置6min后加10%Al(NO3)31.0mL,搖勻,放置6min后[2]的抑菌作用;而對(duì)小魚(yú)仙草非揮發(fā)性部位的研究報(bào)道較少。再加10%NaOH10mL,加50%乙醇稀釋至
4、25ml,混勻,靜現(xiàn)代研究表明,其非揮發(fā)性部位主要含有黃酮、酚酸等成分,置15min,同行試劑作空白,于510nm處測(cè)定吸光度[10],以吸具有抗菌、抗氧化、抗變態(tài)反應(yīng)等作用[3,4]。目前關(guān)于小魚(yú)仙光度值為縱坐標(biāo),以蘆丁濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回草總黃酮提取工藝優(yōu)化方面的研究少見(jiàn)報(bào)道。僅劉小芬等[5]歸方程:A=0.5464C+0.0056,r=0.9997,結(jié)果表明蘆丁對(duì)小魚(yú)仙草總黃酮的提取工藝作了單因素考察,缺乏多因素在0.212~1.272mg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。間的交互作用分析,具有一定的局限性。而響應(yīng)面分析法22提取工藝研
5、究(Responsesurfaceanalysismethodology,RSM)是目前比較通根據(jù)BoxBenhnken的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,綜合單因用的設(shè)計(jì)分析方法,它通過(guò)多元二次回歸方程擬合多因子實(shí)素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在選定乙醇濃度為70%、提取溫度為90!的前驗(yàn)中多個(gè)因子與響應(yīng)值間的關(guān)系,通過(guò)對(duì)方程求極值的方法提下,選擇溶媒倍數(shù)、提取時(shí)間和提取次數(shù)3個(gè)因素作為自變[6~9]達(dá)到參數(shù)優(yōu)化的目的。本研究在前期單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)量設(shè)計(jì)響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn),分別以X1、X2、X3表示,每個(gè)自變量上,采用響應(yīng)面分析法,根據(jù)BoxBehnken組合設(shè)計(jì)原理,考
6、的低、中、高水平分別以-1、0、1進(jìn)行編碼,以小魚(yú)仙草總黃酮察了影響小魚(yú)仙草總黃酮回流提取效果的主要因素,確定了提取得率作為響應(yīng)值Y。實(shí)驗(yàn)因素及水平安排見(jiàn)表1。其最佳提取工藝條件,為更好地開(kāi)發(fā)以小魚(yú)仙草總黃酮為主的藥物及其制劑提供了實(shí)驗(yàn)參考。表1實(shí)驗(yàn)因素及水平安排表1儀器與試藥因素/水平-101X1/溶媒倍數(shù)203040WND200A型高速中藥粉碎機(jī)(上海微型電機(jī)廠)、X2/提取時(shí)間11.52S22PC可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海棱光技術(shù)有限公司)。小魚(yú)仙草X3/提取次數(shù)123藥材于2008年10月采自浙江永康,經(jīng)俞冰副教授鑒定為小分別精確稱(chēng)
7、取小魚(yú)仙草干燥藥材粉末5.0g,根據(jù)表1選魚(yú)仙草MosladiantheraMaxim.的地上部分,陰干,粉碎,備擇的因素和水平,70%乙醇回流提取,過(guò)濾,加同濃度的乙醇用。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào):10008020030),所用試劑均為分析純。溶液定容至250mL,搖勻,作為供試品溶液。精密移取0.3mL供試品溶液,測(cè)定總黃酮含量,計(jì)算總黃酮提取得率,結(jié)果2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果見(jiàn)表2。21總黃酮的含量測(cè)定收稿日期:20091117基金項(xiàng)目:浙江省自然科學(xué)基金(NO.Y2080313)194數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志2010年
8、第23卷第2期果,確定最佳回流提取工藝為:加藥材20倍量濃度為70%乙表2響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)安排及結(jié)果(n=3)醇,于90!水浴回流提取3次,每次1.9h。
