三聚氰胺的檢測(cè)方法.docx

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1、重量法、電位滴定法、高效液相色譜法、氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法、近紅外線吸收法、比色法、免疫學(xué)法1.1重量法：苦味酸法和升華法?？辔端岱ǖ脑硎菍⑷矍璋窐悠酚盟芙?，再向該溶液中加入苦味酸使其與三聚氰胺生成沉淀，根據(jù)生成沉淀的量計(jì)算出樣品中三聚氰胺的含量。升華法的原理是將樣品置于升華裝置中，使樣品中三聚氰胺受熱升華，準(zhǔn)確稱取剩余固體的質(zhì)量。這兩種方法用于工業(yè)上檢測(cè)三聚氰胺的含量準(zhǔn)確度相對(duì)較高，但分析時(shí)間都比較長(zhǎng)，操作繁瑣，不適合高效快速檢測(cè)。1.2電位滴定法電位滴定法在工業(yè)中檢測(cè)三聚氰胺較重量法簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)

2、時(shí)間較短，但準(zhǔn)確度不高。其實(shí)驗(yàn)原理：以硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定含有三聚氰胺的溶液，通過(guò)公式用等當(dāng)量點(diǎn)時(shí)消耗硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積計(jì)算出三聚氰胺的含量。不用于食品。1.3高效液相色譜法（HPLC）用HPLC檢測(cè)三聚氰胺含量，檢出限低，準(zhǔn)確度相對(duì)較高，可用于食品中三聚氰胺的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)的一般操作步驟是：用沉淀法先將奶粉中的蛋白質(zhì)沉淀，然后提取奶粉中的三聚氰胺，將提取液用陽(yáng)離子交換固相萃取柱凈化，最后用高效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法定量。1.4氣相色譜法和質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）與HPLC法比較，GC-MS具有準(zhǔn)確度高、檢出限低（0.05mg/kg），更適合

3、食品中三聚氰胺的微量檢測(cè)。該方法樣品經(jīng)蛋白沉淀離心后過(guò)MCX固相萃取柱凈化、氮?dú)獯蹈?、硅烷化衍?再由氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)。由于三聚氰胺為強(qiáng)極性化合物，難汽化，直接對(duì)其進(jìn)行GC-MS測(cè)定不但靈敏度低且峰拖尾嚴(yán)重，為此王征采用N，O-雙三甲基硅基三氟乙酰胺衍生化，極性的減弱使其容易進(jìn)行汽化，有利于待測(cè)物和基質(zhì)的分離,降低了背景化學(xué)噪音的影響。王立媛等用GC-MS方法檢測(cè)奶粉和鮮奶中三聚氰胺的加標(biāo)回收率在82.3%～110.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）＜10%，方法凈化效果好、準(zhǔn)確度高、靈敏度好。但是GC-MS法需要進(jìn)行衍生化,樣品

4、處理步驟復(fù)雜,不適用于多雜質(zhì)生物檢材中三聚氰胺的快速篩查和定量分析。1.8比色法由于牛奶中各種蛋白質(zhì)基質(zhì)可能干擾三聚氰胺的檢測(cè),FangWei等把基于酪蛋白的牛奶成分分離，然后向溶液中加入金的納米顆粒。金的納米顆粒與三聚氰胺的相互作用導(dǎo)致了顯著的顏色變化，顯示出三聚氰胺的存在。當(dāng)三聚氰胺存在的時(shí)候，溶液的顏色在幾秒鐘內(nèi)從紅色變成了藍(lán)色，而且可以通過(guò)視覺(jué)觀察和分光光度測(cè)定法檢測(cè)。該法提供了一種使用納米顆粒的高靈敏度探測(cè)手段，從而防止人們因?yàn)閿z入三聚氰胺而受到傷害的獨(dú)特機(jī)遇，對(duì)乳制品早期篩查提供了一種可行的方法。1.9免疫學(xué)法———試劑盒檢

5、測(cè)法（ELISA）免疫學(xué)法是一種快速檢測(cè)三聚氰胺的方法，其原理是利用萃取液通過(guò)均質(zhì)及震蕩的方式提取樣品中的三聚氰胺進(jìn)行免疫測(cè)定。樣品經(jīng)過(guò)甲醇離心處理，氮?dú)獯蹈稍俅渭状既芙夂蠓湃氲皆噭┖兄校尤肴矍璋稨RP酶標(biāo)記物，輕輕混合60s，孵育0.5h。將微空中的溶液倒入水槽中，用洗液洗板多次。在吸水紙上拍打，向個(gè)孔中加入底物溶液，孵育0.5h，最后加入終止液體，用酶標(biāo)記儀在450nm下測(cè)吸光度。然后以三聚氰胺濃度半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,確定被測(cè)樣品的濃度。該法操作簡(jiǎn)便，分析速度快，可大批量篩選，其檢出限達(dá)到10ug/k。但是在檢測(cè)過(guò)程有假陽(yáng)

6、性問(wèn)題，因此對(duì)陽(yáng)性樣品需確證方法進(jìn)行確證。l表面增強(qiáng)拉曼光譜法快速檢測(cè)牛奶中的三聚氰胺摘要：基于表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)的便攜式拉曼光譜儀運(yùn)用于牛奶收購(gòu)、運(yùn)輸過(guò)程中三聚氰胺的快速測(cè)定進(jìn)行了研究。利用三聚氰胺位于708cm-1~714cm-1的拉曼光譜特征峰及其強(qiáng)度，對(duì)三聚氰胺進(jìn)行定性及半定量的快速測(cè)定。檢測(cè)限為2.0mg/L，常見(jiàn)含氮化合物尿素、亞硝酸鈉等物質(zhì)對(duì)本快速測(cè)定方法無(wú)干擾。對(duì)每個(gè)樣品的檢測(cè)時(shí)間從樣品制備到結(jié)果顯示一般只需10min。(檢測(cè)三聚氰胺的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法為高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法三種方

7、法為三聚氰胺的檢測(cè)方法，檢測(cè)定量限分別為2mg/kg、0.05mg/kg和0.01mg/kg[4]。)l牛奶中三聚氰胺的高效液相色譜檢測(cè)法(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法)方法原理：用乙睛提取試料中的藥物殘留,經(jīng)正已烷去除脂肪,提取液經(jīng)蒸干后,用流動(dòng)相溶解殘?jiān)?所得樣液以高效液相色譜一紫外檢測(cè)法測(cè)定,外標(biāo)法定量。l液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法對(duì)多種食品基體中三聚氰胺的檢測(cè)（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法）1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備2.樣品的提取3.提取液的凈化4.液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定考察了4種不同型號(hào)和填料的色譜柱,在相應(yīng)的優(yōu)化流動(dòng)相條件下的檢測(cè)靈敏度、精密度與基體效應(yīng)。結(jié)

8、果表明,三聚氰胺在4種分析條件下均有響應(yīng),但由于色譜柱填料性質(zhì)的差異,在針對(duì)具體食品基體時(shí),靈敏度和精密度存在很大差別。導(dǎo)致上述4種分析方法的結(jié)果差異,可能主要為以下原因:Hilic色譜柱的保留與分離機(jī)理比