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《紅參水提物人參總皂苷的大孔吸附樹脂純化研究論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、紅參水提物人參總皂苷的大孔吸附樹脂純化研究論文謝麗玲，任理，趙闖營，莫全毅，陳蔚文【摘要】目的研究D101大孔吸附樹脂純化人參總皂苷的工藝條件，為人參總皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。方法以人參總皂苷的吸附率、純化率為指標(biāo)，考察D101大孔吸附樹脂對(duì)人參總皂苷的吸附和洗脫條件。結(jié)果濃度為0.8g生藥/ml的紅參供試品溶液最大上樣體積12.5ml，上樣流速1ml/min;用6倍柱體積的蒸餾水進(jìn)行平衡、3倍柱體積70%乙醇洗脫樹脂柱.freell/min，純化效果較好。結(jié)論D101大孔吸附樹脂能有效富集并純化人參總皂苷
2、?！娟P(guān)鍵詞】大孔吸附樹脂;人參總皂苷;純化大孔吸附樹脂是不含交換基團(tuán)、具有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑，在水溶液中對(duì)有機(jī)物吸附力強(qiáng)，吸附容量大1。近十余年來，大孔吸附樹脂逐漸被應(yīng)用于中草藥化學(xué)成分的提取分離和中藥新藥的研制開發(fā)中，既可除去大量雜質(zhì)，又可使有效成分富集，尤其對(duì)皂苷類成分的富集純化有較好的效果2。紅參是五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的栽培品經(jīng)蒸制后的干燥根及根莖，人參皂苷是其主要有效成分。紅參性味甘溫，補(bǔ)氣補(bǔ)血，是復(fù)方胃乃安中的主藥之一。本文用D101大孔吸附樹脂富集純化人參總皂
3、苷，對(duì)其整個(gè)工藝過程進(jìn)行優(yōu)化，為中成藥“胃乃安膠囊”的二次開發(fā)研究提供科學(xué)依據(jù)。1儀器與材料1.1儀器BS224S電子天平(北京賽多得斯儀器系統(tǒng)有限公司)，HH-2型恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)，UV-2102C型紫外-可見分光光度計(jì)尤尼柯(上海)儀器有限公司。1.2材料紅參藥材由廣州中一藥業(yè)有限公司鑒定并提供(批號(hào)080501(03)，檢字號(hào)08101741)。人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為110754-200421)，D101型大孔吸附樹脂(上海摩速科學(xué)器材有限公司)。1.3試劑
4、香草醛、高氯酸、冰醋酸、乙醇、α-萘酚、濃硫酸，均為分析純。2方法2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別取人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品溶液(質(zhì)量濃度為0.5mg·ml-1)100，200，250μl和300μl，加入香草醛-冰醋酸、高氯酸進(jìn)行顯色反應(yīng)，以空白溶液做參比3，將顯色體系在450～650nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)。精密吸取體積為40，80，120，160，200和240μl的人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品溶液，顯色后在選定波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值，制作人參總皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.2供試品溶液的制備稱取一定量的紅參置于圓底燒瓶中，加入6倍
5、水冷凝回流提取2次，1.5h/次，5000r/min離心5min，取上清液水浴濃縮至一定濃度，作為供試品溶液。2.3大孔吸附樹脂的預(yù)處理D101大孔吸附樹脂用無水乙醇浸泡12h，水洗至無醇味，濕法裝柱(1.6cm×30cm)。樹脂柱體積32ml，樹脂濕重32.57g，備用。2.4純化工藝的優(yōu)化2～62.4.1泄漏曲線的考察取濃度為0.2g生藥/ml的紅參供試品溶液100ml上柱，上樣流速1ml/min，流出液10ml/份，共收集10份，測(cè)定上柱液和流出液人參總皂苷含量，考察泄漏曲線，確定樣品液的最大上樣體積。
6、2.4.2吸附速度的考察根據(jù)泄漏曲線，取0.2g生藥/ml藥液的最大上樣體積上柱，吸附流速分別為1，2，4ml/min，收集流出液，測(cè)定人參總皂苷的含量，計(jì)算吸附率，確定吸附流速。2.4.3上樣濃度的考察取藥液上柱，濃度分別為0.2，0.4，0.6，0.8g生藥/ml，均為最大上樣體積，收集流出液，測(cè)定人參總皂苷的含量，確定上樣濃度。2.4.4水平衡倍量考察取0.2g生藥/ml藥液上柱，流速1ml/min，用蒸餾水平衡，流出液每1個(gè)柱體積收集1管，取樣進(jìn)行Molish反應(yīng)，觀察液體顏色。2.4.5洗脫溶劑濃度
7、的考察取0.2g生藥/ml藥液上柱，蒸餾水平衡樹脂，依次用30%，50%，70%和90%乙醇洗脫，分別收集洗脫液，測(cè)定人參總皂苷含量，確定洗脫劑濃度。2.4.6洗脫溶劑用量的考察取0.8g生藥/ml藥液上柱，先蒸餾水平衡至流出液近無色，再用6倍柱體積的70%乙醇洗脫，每半個(gè)柱體積收集1管。測(cè)定各管中人參總皂苷含量，確定洗脫劑的用量。2.4.7乙醇洗脫流速考察取0.8g生藥/ml藥液上柱，乙醇洗脫流速分別為1,.freell/min，收集醇洗脫液，測(cè)定人參總皂苷純化率，確定洗脫流速。3結(jié)果3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備顯
8、色后掃描結(jié)果表明，不同含量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液在563nm處均顯示最大吸收，且空白無干擾，選563nm為測(cè)定波長(zhǎng)?；貧w方程為Y=6.0057X-0.0234，R2=0.9996，表明人參皂苷Re在20～120μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。3.2泄漏曲線的考察從測(cè)定結(jié)果和泄漏曲線(圖1)可知，上樣藥液為50ml時(shí)，泄漏曲線進(jìn)入平臺(tái)期，說明D101型大孔吸附樹脂對(duì)人參總皂苷的吸附量逐漸趨向飽和，此時(shí)人參總皂苷開始明
