副神經(jīng)移位膈神經(jīng)后膈肌運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位與病理學(xué)對(duì)照研究論文

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1、副神經(jīng)移位膈神經(jīng)后膈肌運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位與病理學(xué)對(duì)照研究論文周許輝，賈連順，袁文，嚴(yán)望軍，張?jiān)仭菊浚勰康模萏接懜鄙窠?jīng)移位膈神經(jīng)重建高位頸髓損傷大鼠呼吸功能后膈肌的病理學(xué)變化及膈肌運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位(motionevokedpotential，MEP)的特點(diǎn)。［方法］健康雄性SD大鼠60只。隨機(jī)分為1～6個(gè)月6個(gè)時(shí)間組。取下頸部正中切口，將雙側(cè)副神經(jīng)在鎖骨下水平發(fā)出內(nèi)、外側(cè)支之前切斷，移位縫接膈神經(jīng)干起始部。術(shù)后第1～6個(gè)月各組樣本取頸后正中切口.freelm寬肌條行HE染色。分析膈肌肌纖維截面積的變化。［結(jié)果］神經(jīng)移位后隨著時(shí)間延長，大鼠膈肌MEP潛伏期逐漸縮短，波幅逐漸

2、增大。6個(gè)月組MEP波幅為（6.35±0.51）mV，潛伏期為（3.41±0.36）ms。同時(shí)，膈肌逐漸飽滿，肌重逐漸恢復(fù)，6個(gè)月為正常對(duì)照組的(97.23±4.07)％。肌纖維截面積也逐漸增大，6個(gè)月組達(dá)（1741±439）μm2為正常對(duì)照組（1809±461）μm2的（98.28±3.65）％。6個(gè)月組的各數(shù)據(jù)與對(duì)照組比無顯著差異(P0.05)。［結(jié)論］從電生理及病理學(xué)來看副神經(jīng)可作為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)移位膈神經(jīng)重建高位頸髓損傷后呼吸功能?！娟P(guān)鍵詞】膈神經(jīng)；副神經(jīng)；膈??；運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位；病理學(xué)高位頸髓損傷后，自主呼吸功能喪失，靠呼吸機(jī)輔助呼吸以維持生命，長期靠機(jī)械通氣引發(fā)

3、的并發(fā)癥是高死亡率的主要原因［1］。因此提高高位頸髓損傷患者的生存質(zhì)量，降低死亡率，重建呼吸功能尤為重要。周許輝等［2］將副神經(jīng)作為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)移位膈神經(jīng)重建高位頸髓損傷后膈肌的運(yùn)動(dòng)功能獲得初步成功，但關(guān)于副神經(jīng)移位膈神經(jīng)后膈肌的MEP及病理變化未見報(bào)道。本文比較副神經(jīng)移位膈神經(jīng)后膈肌MEP、濕重、肌纖維截面積的變化，探討副神經(jīng)移位膈神經(jīng)對(duì)恢復(fù)高位頸髓損傷后呼吸功能的可行性。為臨床治療提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⒔】敌坌許D大鼠60只，體重250～270g。隨機(jī)分為1～6個(gè)月6個(gè)時(shí)間組。3％戊巴比妥鈉40mg／kg腹腔麻醉后，仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)。10

4、％硫化鈉脫毛，手術(shù)野消毒后鋪巾。手術(shù)操作在顯微鏡下完成。取兩側(cè)鎖骨下切口，鈍性分離胸大肌，暴露C7、C8及T1神經(jīng)根，剔除副膈神經(jīng)的大鼠。取下頸部正中切口，顯露一側(cè)胸骨舌骨肌及胸鎖乳突肌，牽開后者于前、中斜角肌之間暴露C5、6神經(jīng)根。以C5神經(jīng)根為定標(biāo)點(diǎn)確定并顯露膈神經(jīng)干。于C6水平游離膈神經(jīng)，銳性切斷。在鎖骨上方從胸鎖乳突肌外側(cè)緣向外做一橫切口長約5～6mm，在斜方肌的深面肌筋膜下，仔細(xì)尋找副神經(jīng)主干，并向遠(yuǎn)端游離至鎖骨下水平在其發(fā)出內(nèi)、外側(cè)支以前切斷。將副神經(jīng)近側(cè)斷端與膈神經(jīng)遠(yuǎn)側(cè)斷端用12-0醫(yī)用無損針線縫合外膜。同法進(jìn)行對(duì)側(cè)手術(shù)。所有手術(shù)切口均撒青霉素粉劑，

5、依次縫合手術(shù)切口。術(shù)后不作外固定，任其自由活動(dòng)。1.2MEP的檢測(cè)術(shù)后第1～6個(gè)月各組樣本取頸后正中切口，切除C３全椎板并于Ｃ３、４水平銳性橫斷脊髓。參照文獻(xiàn)［3］的方法進(jìn)行經(jīng)顱電刺激檢測(cè)膈肌MEP，將EEG陽極電極置于大鼠頭顱中線皮下用Reporter型肌電圖(Dantec公司，丹麥)給予單個(gè)方波脈沖刺激，刺激強(qiáng)度15mA，波寬0.2ms，刺激間隔200ms。陰極針插入硬腭黏膜下。將同心電極針插入脛前肌證實(shí)MEP完全消失。于兩側(cè)腋前線肋下緣作切口，顯露該處膈肌腹腔面。直視下于腋前線第9肋骨下緣垂直胸壁將同心圓針電極插入膈肌肋部。地線均置于胸骨處。各電極阻抗均5k

6、Ω。濾波帶通20～200Hz，分析時(shí)程50ms，平均20次，信號(hào)經(jīng)放大后打印記錄以備后續(xù)分析。每次將體重與各實(shí)驗(yàn)組相似的正常大鼠10只作為對(duì)照，在不損傷脊髓的情況下檢測(cè)膈肌MEP。1.3膈肌濕重的測(cè)定完成膈肌MEP檢測(cè)后，將膈肌從起點(diǎn)處完整取下，并修凈其周邊的結(jié)締組織，即刻稱濕重(德國產(chǎn)R2000電子天平，精確度為0.01%kg)。分別與各時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組膈肌濕重相除，得膈肌濕重恢復(fù)率。1.4膈肌肌細(xì)胞截面積測(cè)定于右腋前線順肌纖維方向切取約2mm寬膈肌條，置于10％甲醛固定48h，經(jīng)梯度酒精脫水，浸蠟，在肌腹中部垂直肌纖維方向作厚5μm切片，HE染色，甘油明膠封片。

7、通過VIDSⅢ圖像分析系統(tǒng)，在目鏡放大20倍，定標(biāo)值0.43microns／pixel下測(cè)量膈肌肌細(xì)胞截面積。隨機(jī)規(guī)定1根過中心的直線，測(cè)量經(jīng)此直線上所有肌細(xì)胞截面積，取平均值作為該斷面的肌細(xì)胞截面積。分別與對(duì)照組數(shù)值相除，得各時(shí)間點(diǎn)肌細(xì)胞截面積恢復(fù)率。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件將各組得到的數(shù)據(jù)與對(duì)照組進(jìn)行分析，P0.05則提示有顯著意義。2結(jié)果2.1膈肌MEP的變化副神經(jīng)移位膈神經(jīng)隨著時(shí)間延長，大鼠膈肌MEP潛伏期逐漸縮短，波幅逐步增大。6個(gè)月組MEP波幅為6.35±0.51mV，潛伏期為3.41±0.36ms，與正常對(duì)照組比較無顯著差異。各時(shí)間

8、組膈肌ME