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《?；撬釋Υ笫笠暰W(wǎng)膜光化學(xué)損傷c的論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、?；撬釋Υ笫笠暰W(wǎng)膜光化學(xué)損傷c的論文關(guān)鍵詞:牛磺酸；視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷；凋亡細(xì)胞；c 摘要：目的觀察飼料中添加?；撬釋饣瘜W(xué)損傷后大鼠光感受器細(xì)胞凋亡的影響，并進(jìn)一步從氧化應(yīng)激基因cfos表達(dá)變化角度探討其防護(hù)機(jī)制。方法70只sd大鼠隨機(jī)分為對照組、牛磺酸組。分別喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料或添加4％?；撬犸暳衔癸?5d后接受(3000±200)lx持續(xù)0，1，3，6，9，12,24h光照，凋亡細(xì)胞原位末端標(biāo)記法(tunel)檢測光感受器細(xì)胞凋亡情況并計(jì)算凋亡指數(shù)(ai)；rtpcr法及免疫印跡法檢測視網(wǎng)膜內(nèi)cfosmrna以及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果感光細(xì)胞凋亡指數(shù)隨光照時間延長逐漸增
2、加，?；撬峤Mai顯著低于對照組(p<005)，其中光照12h牛磺酸組與對照組ai分別為(123±47)％和(324±62)％；視網(wǎng)膜cfosmrna光照1h后一過性表達(dá)增高，牛磺酸組較對照組低(p<005)；光照后視網(wǎng)膜cfos蛋白表達(dá)逐漸升高，于3h達(dá)峰值，牛磺酸組顯著低于對照組(p<005)。結(jié)論在視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷條件下，牛磺酸可能通過抑制視網(wǎng)膜cfos的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)，阻斷光感受器細(xì)胞凋亡轉(zhuǎn)導(dǎo)從而保護(hù)視網(wǎng)膜。 關(guān)鍵詞：?；撬幔灰暰W(wǎng)膜光化學(xué)損傷；凋亡細(xì)胞；cfos effectsoftaurineoncfosexpressionofratret
3、inaafterphotochemicaldamage chenka,mimantian,yuxiaoping,etal. departmentofpreventivemedicine,thethirdmilitarymedicaluniversity(chongqing400038,china) abstract：objectivetoobservetheeffectofdietarysupplementationicaldamage.methodsseventyratslydividedintocontrolgroup(control)and4%tauri
4、nesupplementationgroup(taurine).thesubjectsittedbysixcoldethod;totalrnaandproteinofretinarnalevelsinedusingrt-pcrandcfosproteinlevelseprolonged,apoptosisindex(ai)ofphotoreceptorcellsongrnaofratretinaphotochemicaldamage. keyicaldamage;apoptoticcell;cfos 視網(wǎng)膜是視覺形成的重要組織結(jié)構(gòu)，若光照時間或光照強(qiáng)度等超過視網(wǎng)
5、膜承受力，則會導(dǎo)致光化學(xué)損傷〔1〕，損傷早期視功能減退，光感受器細(xì)胞丟失，后期內(nèi)層神經(jīng)元變性壞死，最終導(dǎo)致失明〔12〕。.cOm近年研究認(rèn)為，凋亡是視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷中光感受器細(xì)胞丟失的主要機(jī)制〔1,3〕，持續(xù)高強(qiáng)度光照使視網(wǎng)膜內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物激增，同時氧化應(yīng)激基因ap1表達(dá)上調(diào)促進(jìn)凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，且證實(shí)其亞單位cfos是必需調(diào)控因子。?；撬崤c視網(wǎng)膜生長發(fā)育和功能維持關(guān)系密切，前期實(shí)驗(yàn)已證實(shí)，4％?；撬崮苡行ПＷo(hù)光化學(xué)損傷條件下的大鼠視網(wǎng)膜〔4〕。本研究擬進(jìn)一步觀察其對光感受器細(xì)胞凋亡的影響，并從cfos表達(dá)變化角度探討防護(hù)機(jī)制。 1材料與方法 11實(shí)驗(yàn)動物
6、及分組清潔級sd大鼠(第三軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院動物中心)70只，體重150g左右，雌雄各半。隨機(jī)分為對照組、?；撬峤M，分別喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料或添加4％?；撬?北京世紀(jì)維他生物技術(shù)有限公司，純品)飼料15d后，各組5只大鼠分別接受(3000±200)lx持續(xù)0，1，3，6，9，12，24h光照?！ ?2凋亡細(xì)胞的原位末端標(biāo)記法(tunel)檢測光感受器細(xì)胞凋亡情況大鼠光照后立即取出眼球，4％多聚甲醛固定過夜，常規(guī)石蠟切片，tunel試劑盒(德國roche公司)檢測視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞凋亡情況參照試劑說明書，計(jì)數(shù)10個油鏡視野下每張切片tunel陽性細(xì)胞數(shù)，其與光感受器細(xì)胞總數(shù)
7、比值為光感受器細(xì)胞凋亡指數(shù)(ai)?！ ?3視網(wǎng)膜總rna提取及rtpcr大鼠光照后立即取出眼球，解剖顯微鏡下小心剝離視網(wǎng)膜，參考trizol試劑說明書常規(guī)提取總rna，核酸蛋白檢測儀測定其含量與純度。-20℃保存?zhèn)溆?。rtpcr按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書進(jìn)行，以大鼠βactin為內(nèi)參，上游引物序列為5′gacccagatcatgtttgagacc-3′，下游引物序列為5′gccaggatagagccaccaat-3′，退火溫度為554℃，產(chǎn)物長度為684bp；cfos上游引物序列為5′gcctttcctactaccattcc-3′，下游引物序列為5′atcttat
