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1、食用菌固體菌種液化技術(shù) 食用菌的不同品種,采用液體培養(yǎng)液擴(kuò)制菌種,只需4-7d;用固體培養(yǎng)基擴(kuò)制固體菌種,少則20d左右,多則40d以上。而在菌種提純、復(fù)壯、馴化、出菇實(shí)驗(yàn)菌種保藏與運(yùn)輸?shù)确矫?,固體菌種亦有不可替代的優(yōu)勢(shì)。利用固體菌種直接擴(kuò)制液體菌種,不僅具有菌絲純、發(fā)菌快、周期短等效果;而且具有操作簡(jiǎn)便、安全可靠、易于推廣等作用。 本文介紹的固體菌種液化方法,不僅可以用于液體栽培種的快速擴(kuò)制,而且可以用少量固體菌種的快速繁育,現(xiàn)介紹如下,供讀者參考?! ?消毒與備種 把選用的固體菌種、酒精、棉球、酒精燈、鑷子、接種勾、備用菌種空瓶或茶缸等用品,放入預(yù)先消毒的接種箱中。操作
2、者進(jìn)人接種狀態(tài),然后接種箱進(jìn)行氣霧消毒30min。備用空瓶用酒精內(nèi)外擦一遍,接種勾和備用瓶口均在酒精燈上“過火”備用。固體菌種瓶(或袋)口用酒精浸透消毒,開口后再用酒精棉球從內(nèi)到外擦一遍。用接種勾扒去老菌種和表面菌皮。消除菌種表面雜物后,再用酒精棉球由內(nèi)到外擦一遍。用接種勾輕輕扒碎菌種塊,撥人備用瓶中(扒出的菌種數(shù)量多少以覆蓋液體培養(yǎng)基表面為適宜),棉塞過火,蓋住備用菌種瓶口?! ?培養(yǎng)菌絲 備好的固體菌種瓶,放人25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2一3d,促使備用菌種萌發(fā)新菌絲?! ∪绻∪萘颗囵B(yǎng),可以采用電熱毯、自動(dòng)恒溫控制器、10A接觸器、養(yǎng)魚用的增氧機(jī)和玻璃瓶或5掩容量的食用油塑料
3、瓶,在接種箱中培養(yǎng)菌絲。其中,供給的氧氣仍然需要嚴(yán)格過濾后再輸人到液體培養(yǎng)液內(nèi)?! ?液體培養(yǎng) 以平菇、香菇、白靈菇、雞腿菇的通用液體培養(yǎng)為例:按培養(yǎng)容器可以裝人的液體總量,配人2.5%玉米面,1%面粉,05%脫脂大豆粉,1%白糖。0.5%多維葡萄糖,0.1%磷酸二氫鉀,0.1%色拉油或0.03%泡敵(聚氧丙烯甘油),合成液體培養(yǎng)液,pH6.5一7。蒸汽滅菌,降溫26℃左右,無菌操作加人備用菌種,恒溫25℃增氧液化?! ⌒∪萘恳壕鷶U(kuò)制,可以先將液體培養(yǎng)液煮沸02而n,盛人鋁壺中(不加蓋),與玻璃瓶或5掩容量的食用油塑料瓶(不加蓋),同時(shí)放人接種箱中,趁熱點(diǎn)燃?xì)忪F消毒劑,封閉降溫
4、后加人瓶中,接入菌種,蓋嚴(yán)增氧瓶塞,通氣液體?! 《我后w菌種擴(kuò)制,可以采用20噸容量的大油桶等容器,配液后直接用蒸汽加溫滅菌,封閉降溫,無菌接種8一10kg液體菌種(或1一Zkg固體菌種),均勻排人4一6根增氧管,外包電熱毯和保溫材料,恒溫25℃培養(yǎng)4一7d。其中,固體菌種培養(yǎng)菌絲后,加人液體培養(yǎng)液,培養(yǎng)24h產(chǎn)生菌球。把固體菌種直接加人液體培養(yǎng)液,培養(yǎng)2一3d產(chǎn)生菌球?! ?注意事項(xiàng) 4.1上述方法,適用于栽培種擴(kuò)制,或液體菌種拌料壓塊或直播出菇。如果用于栽培袋注射點(diǎn)種,應(yīng)在固體菌種加人時(shí)或在液化菌種使用前加人過濾條件,隔離固體菌渣?! ?.2固體菌種要選用適齡、不含雜菌
5、的優(yōu)良菌種,以瓶或培養(yǎng)料表面點(diǎn)種的菌種為最佳,不宜使用袋裝固體菌種。尤其是培養(yǎng)料中心打孔點(diǎn)種培養(yǎng)的固體菌種,由于菌種是從內(nèi)向外生長(zhǎng),不利于菌種提純,不宜用作液體菌種?! ?.3固體菌種液化全程,必須做到“無菌操作”和“無菌運(yùn)行”,才能生產(chǎn)出優(yōu)良的液體菌種?!∈秤镁后w深層發(fā)酵技術(shù)最直接的應(yīng)用就是生產(chǎn)食用菌的液體菌種。 1.食用菌液體菌種的優(yōu)缺點(diǎn); (1)優(yōu)點(diǎn): 1)生產(chǎn)周期短:可以從下面對(duì)比中進(jìn)行比較。?????????????? ????????斜面菌種(1支)?? ???????????????↓8??? ? ???????????↙????↘?????斜面母
6、種(30支)?????搖床液體菌種(2千克) ?????????↓6~7天????????????↓6~10天????原種(80瓶)?????????種子罐種子(60千克)? ????????↓40~60天????????↓6~7天??????栽培種(3000瓶)???發(fā)酵罐液體菌種(300千克)??? ??????↓45~60天????????↓3~4天??????挖瓶壓塊上床?????????拌料壓塊上床 ?????????27.8米2??? ? 17.8米2 ??????(91~112天)????????????(15~2l天) 如果再增加一個(gè)5噸發(fā)酵罐,時(shí)間再延長(zhǎng)3~
7、4天,則產(chǎn)量又可增加10倍。即使按上邊流程算也可知在同樣時(shí)間內(nèi),同樣從1支菌種出發(fā)液體種的壓塊面積是固體法的3.8倍?! ?)菌種成本低:1噸罐發(fā)酵生產(chǎn)的液體菌種,用于拌料生產(chǎn)香菇,可制菌磚28米2左右,相當(dāng)于3000瓶固體栽培種制成的菌磚。楊慶堯(1980)報(bào)道,采用液體菌種,制作約0.1米2的香菇菌磚,其菌種成本約0.46元;而采用固體菌種,其菌種成本為1.04元。 3)節(jié)省勞力、電耗:由于生產(chǎn)周期短,不使用菌種瓶,既可省去裝瓶、挑棄污染瓶和接種、搖瓶等繁雜工藝,又可節(jié)省勞力、電耗和接