食用菌菌種制備技術(shù).doc

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1、食用菌菌種制備技術(shù)菌種：原意是指砲子（相當(dāng)于植物的種子），但在實(shí)際生產(chǎn)中，常將經(jīng)過(guò)人T培養(yǎng)的純菌絲體連同培養(yǎng)基質(zhì)一同叫做菌種。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（二級(jí)種）三級(jí)。母種（一級(jí)）：將純菌絲體或砲了在試管培養(yǎng)基屮繁殖而成。可以繁殖原種，也適宜菌種保藏。原種（二級(jí)）：母種菌絲在固體培養(yǎng)基上繁殖而成。這一過(guò)程增強(qiáng)菌絲對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)性，又起到擴(kuò)繁的作用。原種可以真接出菇。栽培種（三級(jí)）：由原種擴(kuò)繁而成。主要是為了擴(kuò)繁，為生產(chǎn)提供足夠的菌種。菌種制備：也稱(chēng)種了?制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具

2、有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐屮進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物Z用。種了制備包括孑包子制備和菌絲體制備（見(jiàn)圖）。OAmual#M?itS1%土畫(huà)于2冷涼干3件丙倉(cāng)子4子56

3、?子7其屮（1）?（4）為抱了?制備過(guò)程。保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，無(wú)菌操作挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25°C（或較高溫度）下培養(yǎng)5?7天（或較長(zhǎng)時(shí)間）。所得砲了還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多胞了，對(duì)于孫菌類(lèi)胞了制備，多數(shù)采用大米、小米Z類(lèi)的天然培養(yǎng)基。將培養(yǎng)成熟的斜面抱了制成懸浮液，接種到扁瓶固體培

4、養(yǎng)基上，于25?28°C培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶抱了于真空屮抽干，使水分降至10%以下，并放入4C冰箱屮備用。一次制得的砲子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。放線菌砲了的培養(yǎng)基人多是采用隸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及無(wú)機(jī)鹽與瓊脂制成的。將斜曲砲了接入擴(kuò)大的扁瓶砲了培養(yǎng)基屮，于28?37°C培養(yǎng)5?14天。所獲得的大量砲子可肓接作為種了罐（6）的種了。如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)弛子，如赤每素產(chǎn)生菌或產(chǎn)砲子不多的,則可采用搖瓶（5）液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種了罐的日的是使接入冇限的砲了或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大最菌體。H

5、?中的培養(yǎng)基紐分M是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿等），及無(wú)機(jī)鹽（如磷酸鹽）等。作為發(fā)酵罐（7）的種了應(yīng)是生命力吐盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%?20%O一、母種的制備用試管制成斜面培養(yǎng)基，并接種原始試管種（保留種），并用于生產(chǎn)的母種即為生產(chǎn)母種，可用于擴(kuò)接原種。1.培養(yǎng)基配方配方一弓鈴薯培養(yǎng)基：馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、水1000毫升、PH值自然；配方二綜合馬鈴薯培養(yǎng)基：馬鈴薯200克、葡萄糖20克、磷酸氫二鉀2克、硫酸鎂0.5克、維生素BJ0毫克、瓊脂20

6、克、水1000亳升、PH值自然；配方三合成培養(yǎng)基：馬鈴薯20克、匍萄糖20克、磷酸二氫鉀2克、蛋白腺10克、牛肉膏5克、酵母膏5克、硫酸鎂0.8克、水1000亳升、PH值白然；2.培養(yǎng)基制作方法先將馬鈴暮洗凈去皮切成薄片,稱(chēng)取200克,加水1000毫升,煮沸15-20^鐘，用4層紗布過(guò)濾，取其濾液并補(bǔ)足水至1000毫升，加入瓊脂20克，再加熱，瓊脂溶化示，再加入其它配方屮的藥品。培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)在培養(yǎng)凝固前進(jìn)行（瓊脂培養(yǎng)基40°C凝固）一般用漏斗，或分裝瓶，下端連接一段軟橡皮管，橡皮管下面再連接一小段玻璃管，在橡皮管上安

7、裝一個(gè)止水彈簧夾,分裝時(shí)將玻璃管細(xì)口插入試管內(nèi)，應(yīng)注意不使培養(yǎng)基黏附在試管口上，以免雜菌感染，每支試管裝入最為試管長(zhǎng)度1/4。裝好麻塞上棉塞，每10支試管扎一捆，棉塞上用犁料紙封扎好，用線細(xì)捆扎起來(lái)。3.滅菌將分裝麻的試管扎捆好，放入高斥蒸氣滅菌鍋，在1.1kg/cm2壓力下（鍋入溫度達(dá)121°C）滅菌30分鐘，使微生物包括芽抱全部殺死。待壓力降到0度時(shí)，慢慢放出鍋內(nèi)氣體，試管取出后趁熱將試管口一端墊高，斜靠在桌上的小木棒上，使管內(nèi)培養(yǎng)液斜面上長(zhǎng)度達(dá)2/3—3/5,試管上面覆蓋毛巾，冷卻后即成斜面固體培養(yǎng)基。4.接種、培

8、養(yǎng)余購(gòu)冷卻示通過(guò)無(wú)菌操作方法將菌種接入，疊28°C、3天示將溫度降至24°C繼續(xù)培養(yǎng)，7?15天左右，菌絲長(zhǎng)滿幣個(gè)試管斜面，即成（生產(chǎn)）母種。為檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可在常溫下放置48小時(shí)，未發(fā)現(xiàn)有雜菌產(chǎn)生，即可接種、培養(yǎng)，長(zhǎng)滿菌絲后即可轉(zhuǎn)管或轉(zhuǎn)接原種。二、原種、制備母種接種到原種培養(yǎng)基上，進(jìn)行擴(kuò)大繁殖冇種即為原種，原種一般采用廣口瓶或袋裝。1?培養(yǎng)基配方配方一木屑裁皮培養(yǎng)基：闊樹(shù)木78%、聯(lián)皮20%.糖1%、石膏粉1%、水65%；配方二棉籽売木屑培養(yǎng)基：棉籽殼80%、木屑15%、糖1%、埶皮5%、過(guò)磷酸鈣3%、石膏粉

9、1%;2.拌料與裝袋選用新鮮無(wú)霉變?cè)?根據(jù)生產(chǎn)所需的數(shù)量，計(jì)算配料總量,將秋皮、石膏粉均勻的混合在培養(yǎng)料里，糖和過(guò)磷酸鈣溶于水后，按上述干料量加入水，比例為1：1.3拌勻，培養(yǎng)料含水量60%為宜，含水量以手緊握培養(yǎng)料指縫間有水欲滴為宜。堆悶30分鐘麻，裝瓶（袋）。用機(jī)械或人工裝袋稍加壓實(shí)，在袋口外套入頼料環(huán)，形成彖