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《survivin 基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達(dá)》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、Survivin基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達(dá)作者:王俊艷,顏華,王世忠,李金茹,劉皓【關(guān)鍵詞】Survivin基因;,,增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變;,,增殖膜 摘要:目的:觀察Survivin基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達(dá)。方法:取已確診為PVR并行玻璃體切除術(shù)患者的PVR增殖膜,標(biāo)本于術(shù)后立即由貯液瓶取至無菌器皿冰溫運回,取出增殖膜放入多聚甲醛固定,并常規(guī)乙醇脫水,二甲苯透明、浸蠟、包埋、制備5μm連續(xù)切片,將切片行常規(guī)H-E染色,采用Survivin多克隆抗體(抗人及抗兔)行免疫組織化學(xué)實驗,檢測Survivin基因在玻璃體和增殖膜中的表
2、達(dá)。結(jié)果:Survivin基因在PVR增殖膜中呈陽性表達(dá),且隨著PVR臨床分級的增高,免疫組織化學(xué)染色陽性細(xì)胞百分率逐漸升高。結(jié)論:認(rèn)為PVR的形成是由于Survivin基因的異常表達(dá)促進(jìn)了細(xì)胞增殖,闡明PVR的形成機(jī)制。 關(guān)鍵詞:Survivin基因;增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變;增殖膜 ExpressionofSurvivinGeneinPeriretinalMembranesofProliferativeVitreoretinopathy6 Abstract:Objective:Tostudytheexpressionofsurvivingeneinperir
3、etinalmembraneofprliferativevitreoretinopathy(PVR).Method:14periretinalmembranesobtainedfrom14casesofPVRwithretinaldetachmentundergoingvitretomywereusedtoexaminetheexpressionofsurvivinggenebySABCmethod.Result:Survivingenewasexpressedin8ofthe14cases.Thereactionsofsurvivingwereobservedin
4、thecytoplasmandextracellularmatrix.Conclusion:Theabnormalexpressionofsurvivinggeneinhibitsapoptosisanditmayparticipateintheprogressionofproliferativevitreoretinopathy. Keywords:Survivin;Proliferative;Vitreoretinopathy增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferativevitreoretinopathy,6PVR)是指在裂孔源性視網(wǎng)膜脫離或視網(wǎng)膜復(fù)位手術(shù)
5、后,由于視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增生和收縮,又造成牽拉性視網(wǎng)膜脫離的病變。如不及時治療,終將導(dǎo)致全視網(wǎng)膜脫離而失明。經(jīng)過大量的實驗和臨床研究,已認(rèn)為PVR屬于眼內(nèi)發(fā)生的過度損傷修復(fù)反應(yīng),這是一個以時相為特征的程序化過程,即經(jīng)過了炎癥期、增生期和瘢痕期,其形成的確切機(jī)制尚未完全明了。PVR的病理特征是細(xì)胞過度增生[1]。細(xì)胞增生與死亡失衡可能是PVR形成的原因。Survivin是一個新發(fā)現(xiàn)的凋亡蛋白抑制劑家族成員,廣泛表達(dá)于人的胚胎組織和各種腫瘤組織,但僅在少數(shù)正常成人組織中表達(dá)[2,3]。Survivin具有抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂的雙重功能,是聯(lián)系
6、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡界面的重要因子[4]。 1資料和方法 1.1一般資料:2004年7月至2005年6月確診為孔源性視網(wǎng)膜脫離合并PVR并行玻璃體手術(shù)的病人14例。排除外傷性、糖尿病等引起的繼發(fā)性視網(wǎng)膜脫離和系統(tǒng)性疾病。從玻璃體手術(shù)中取視網(wǎng)膜表面增殖膜,標(biāo)本于術(shù)后立即由貯液瓶取至無菌器皿冰溫運回,取出增殖膜放入多聚甲醛固定,并常規(guī)乙醇脫水,二甲苯透明、浸蠟、包埋、制備5μm連續(xù)切片,將切片行常規(guī)H-E染色,采用Survivin多克隆抗體,行免疫組織化學(xué)實驗,檢測Survivin基因在玻璃體和增殖膜中的表達(dá)?! ?.2方法:石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,3%H2O237℃,
7、30min,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性,正常兔血清濕盒內(nèi)37℃封閉20min;滴加羊抗人survivin多克隆抗體,濕盒內(nèi)4℃過夜,漂洗;滴加生物素化兔抗山羊IgG,濕盒內(nèi)37℃,20min,漂洗;滴加SABC復(fù)合物,濕盒內(nèi)37℃6,20min,漂洗;DAB顯色,顯微鏡下觀察,水洗中止反應(yīng);脫水,透明,封片。將已知的乳腺癌切片作為陽性對照,用磷酸緩沖液代替一抗作為隱性對照,以組織切片背景清晰、胞質(zhì)或胞核染為淡黃至黃棕色者為陽性細(xì)胞標(biāo)志。將陽性細(xì)胞按顯色強(qiáng)度分為3級:表達(dá)弱陽性,即顯色強(qiáng)度為淡黃色或僅個別細(xì)胞呈黃至棕黃色染色;表達(dá)強(qiáng)陽性,即多數(shù)細(xì)胞呈黃至棕黃色染色