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《survivin 基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、Survivin基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達作者：王俊艷，顏華，王世忠，李金茹，劉皓【關(guān)鍵詞】Survivin基因；,,增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變；,,增殖膜 摘要：目的：觀察Survivin基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達。方法：取已確診為PVR并行玻璃體切除術(shù)患者的PVR增殖膜，標(biāo)本于術(shù)后立即由貯液瓶取至無菌器皿冰溫運回，取出增殖膜放入多聚甲醛固定，并常規(guī)乙醇脫水，二甲苯透明、浸蠟、包埋、制備5μm連續(xù)切片，將切片行常規(guī)H-E染色，采用Survivin多克隆抗體（抗人及抗兔）行免疫組織化學(xué)實驗，檢測Survivin基因在玻璃
2、體和增殖膜中的表達。結(jié)果：Survivin基因在PVR增殖膜中呈陽性表達，且隨著PVR臨床分級的增高，免疫組織化學(xué)染色陽性細胞百分率逐漸升高。結(jié)論：認為PVR的形成是由于Survivin基因的異常表達促進了細胞增殖，闡明PVR的形成機制?！ ￡P(guān)鍵詞：Survivin基因；增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變；增殖膜 ExpressionofSurvivinGeneinPeriretinalMembranesofProliferativeVitreoretinopathy Abstract：Objective:Tostudytheexpressionofsurv
3、ivingeneinperiretinalmembraneofprliferativevitreoretinopathy(PVR).Method:14periretinalmembranesobtainedfrom14casesofPVRentundergoingvitretomyinetheexpressionofsurvivinggenebySABCmethod.Result:Survivingeneandextracellularmatrix.Conclusion:Theabnormalexpressionofsurvivinggeneinhi
4、bitsapoptosisanditmayparticipateintheprogressionofproliferativevitreoretinopathy. Key連續(xù)切片，將切片行常規(guī)H-E染色，采用Survivin多克隆抗體，行免疫組織化學(xué)實驗，檢測Survivin基因在玻璃體和增殖膜中的表達?！ ?.2方法：石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，3%H2O237℃，30min，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，正常兔血清濕盒內(nèi)37℃封閉20min；滴加羊抗人survivin多克隆抗體，濕盒內(nèi)4℃過夜，漂洗；滴加生物素化兔抗山羊IgG，濕盒內(nèi)37℃，20min
5、，漂洗；滴加SABC復(fù)合物，濕盒內(nèi)37℃，20min，漂洗；DAB顯色，顯微鏡下觀察，水洗中止反應(yīng)；脫水，透明，封片。將已知的乳腺癌切片作為陽性對照，用磷酸緩沖液代替一抗作為隱性對照，以組織切片背景清晰、胞質(zhì)或胞核染為淡黃至黃棕色者為陽性細胞標(biāo)志。將陽性細胞按顯色強度分為3級：表達弱陽性，即顯色強度為淡黃色或僅個別細胞呈黃至棕黃色染色；表達強陽性，即多數(shù)細胞呈黃至棕黃色染色；表達中度陽性，即顯色強度介于弱陽性與強陽性之間。凡顯色強度與背景無明顯差別者為陰性?！ ?結(jié)果 14例PVR增殖膜標(biāo)本中，8例陽性，其中2例強陽性，4例中等陽性，2例弱陽性
6、。在PVR增殖膜的細胞中，視網(wǎng)膜色素上皮細胞（retinalpigmentepithelium,RPE）占較大部分，胞體變得長園，形態(tài)不規(guī)則。另外在增生膜中還見一些上皮細胞樣和成纖維細胞樣細胞。陽性染色位于膜上大部分細胞的胞質(zhì)內(nèi)，為棕黃色。陰性對照組中未見陽性染色?！ ?討論 PVR是一種細胞增生過度而凋亡過低的疾病。細胞凋亡是多細胞有機體為控制機體發(fā)育，維護內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞主動死亡。Survivin是一個近年來發(fā)現(xiàn)的凋亡蛋白抑制劑（inhibitorofapoptoticprotEin，IAP）家族成員，廣泛表達于人的胚胎組織和各
7、種腫瘤組織，具有抑制細胞凋亡和調(diào)節(jié)細胞有絲分裂的雙重功能，是聯(lián)系細胞周期和細胞凋亡界面的重要因子，幾乎在所有被研究的腫瘤中均呈陽性表達。我們認為PVR雖然不同于腫瘤，但它在眼內(nèi)局部發(fā)病情況與腫瘤的發(fā)病機理十分相似，均表現(xiàn)為細胞的過度增生。細胞的過度增生意味著細胞凋亡的減少，基于此，本實驗從抑制細胞凋亡的Survivin基因著手，采用免疫組化技術(shù)，檢測Survivin基因在PVR患者增殖膜中的表達，探討其在PVR發(fā)病機制中的作用。為進一步通過反義核酸技術(shù)封閉Survivin基因，抑制玻璃體和視網(wǎng)膜細胞增生，在基因水平治療PVR提供理論依據(jù)。 參考
