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1、Survivin基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達作者：王俊艷，顏華，王世忠，李金茹，劉皓【關鍵詞】Survivin基因；,,增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變；,,增殖膜 摘要：目的：觀察Survivin基因在增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達。方法：取已確診為PVR并行玻璃體切除術患者的PVR增殖膜，標本于術后立即由貯液瓶取至無菌器皿冰溫運回，取出增殖膜放入多聚甲醛固定，并常規(guī)乙醇脫水，二甲苯透明、浸蠟、包埋、制備5μm連續(xù)切片，將切片行常規(guī)H-E染色，采用Survivin多克隆抗體（抗人及抗兔）行免疫組織化學實驗，
2、檢測Survivin基因在玻璃體和增殖膜中的表達。結果：Survivin基因在PVR增殖膜中呈陽性表達，且隨著PVR臨床分級的增高，免疫組織化學染色陽性細胞百分率逐漸升高。結論：認為PVR的形成是由于Survivin基因的異常表達促進了細胞增殖，闡明PVR的形成機制?！ ￡P鍵詞：Survivin基因；增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變；增殖膜 ExpressionofSurvivinGeneinPeriretinalMembranesofProliferativeVitreoretinopathy6 Abstract：Objec
3、tive:Tostudytheexpressionofsurvivingeneinperiretinalmembraneofprliferativevitreoretinopathy(PVR).Method:14periretinalmembranesobtainedfrom14casesofPVRwithretinaldetachmentundergoingvitretomywereusedtoexaminetheexpressionofsurvivinggenebySABCmethod.Result:Survivin
4、genewasexpressedin8ofthe14cases.Thereactionsofsurvivingwereobservedinthecytoplasmandextracellularmatrix.Conclusion:Theabnormalexpressionofsurvivinggeneinhibitsapoptosisanditmayparticipateintheprogressionofproliferativevitreoretinopathy. Keywords：Survivin；Prolife
5、rative；Vitreoretinopathy增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變（proliferativevitreoretinopathy,6PVR）是指在裂孔源性視網(wǎng)膜脫離或視網(wǎng)膜復位手術后，由于視網(wǎng)膜色素上皮細胞及神經(jīng)膠質細胞的增生和收縮，又造成牽拉性視網(wǎng)膜脫離的病變。如不及時治療，終將導致全視網(wǎng)膜脫離而失明。經(jīng)過大量的實驗和臨床研究，已認為PVR屬于眼內發(fā)生的過度損傷修復反應，這是一個以時相為特征的程序化過程，即經(jīng)過了炎癥期、增生期和瘢痕期，其形成的確切機制尚未完全明了。PVR的病理特征是細胞過度增生［1］。細胞增生與死
6、亡失衡可能是PVR形成的原因。Survivin是一個新發(fā)現(xiàn)的凋亡蛋白抑制劑家族成員，廣泛表達于人的胚胎組織和各種腫瘤組織，但僅在少數(shù)正常成人組織中表達［2,3］。Survivin具有抑制細胞凋亡和調節(jié)細胞有絲分裂的雙重功能，是聯(lián)系細胞周期和細胞凋亡界面的重要因子［4］。 1資料和方法 1.1一般資料：2004年7月至2005年6月確診為孔源性視網(wǎng)膜脫離合并PVR并行玻璃體手術的病人14例。排除外傷性、糖尿病等引起的繼發(fā)性視網(wǎng)膜脫離和系統(tǒng)性疾病。從玻璃體手術中取視網(wǎng)膜表面增殖膜，標本于術后立即由貯液瓶取至無菌器皿冰溫運
7、回，取出增殖膜放入多聚甲醛固定，并常規(guī)乙醇脫水，二甲苯透明、浸蠟、包埋、制備5μm連續(xù)切片，將切片行常規(guī)H-E染色，采用Survivin多克隆抗體，行免疫組織化學實驗，檢測Survivin基因在玻璃體和增殖膜中的表達?！ ?.2方法：石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，3%H2O237℃，30min，以阻斷內源性過氧化物酶活性，正常兔血清濕盒內37℃封閉20min；滴加羊抗人survivin多克隆抗體，濕盒內4℃過夜，漂洗；滴加生物素化兔抗山羊IgG，濕盒內37℃，20min，漂洗；滴加SABC復合物，濕盒內37℃6，20min，漂洗
8、；DAB顯色，顯微鏡下觀察，水洗中止反應；脫水，透明，封片。將已知的乳腺癌切片作為陽性對照，用磷酸緩沖液代替一抗作為隱性對照，以組織切片背景清晰、胞質或胞核染為淡黃至黃棕色者為陽性細胞標志。將陽性細胞按顯色強度分為3級：表達弱陽性，即顯色強度為淡黃色或僅個別細胞呈黃至棕黃色染色；表達強陽性，即多數(shù)細胞呈黃至棕黃色染色
