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《丙泊酚血藥濃度測定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、分子式：C12H18O。分子量：178.274血漿丙泊酚濃度高效液相色譜法（HPLC）測定方法色譜條件色譜柱為KromasilC18(5μm,4.6mm×250mm,柱號：KR-002545)；柱壓：90～100kg·cm-1；柱溫：40℃，流動相：乙腈-水（70:30）；流速：1ml·min-1；熒光激發(fā)波長為276nm；發(fā)射波長310nm；內(nèi)標物：麝香草酚；定量方法：峰面積法。高效液相色譜法測定中血漿內(nèi)源性物質(zhì)對測定無干擾，內(nèi)標麝香草酚與丙泊酚完全分離,內(nèi)標麝香草酚的保留時間約為7.1min，丙泊酚保留時間約為11.1min。樣品分離
2、色譜圖見圖1。2BA2DC211圖1丙泊酚和麝香草酚的高效液相色譜圖A空白血漿B丙泊酚的標準溶液C丙泊酚和麝香草酚的標準溶液D樣品血漿1麝香草酚2丙泊酚丙泊酚標準溶液配制精密稱取丙泊酚對照品10mg,并加入100ml的量瓶中,-6-用乙腈溶解并稀釋至刻度,搖勻后即可得濃度為100mg·L-1的丙泊酚標準儲備液。精密量取丙泊酚對照品儲備液1ml，加至10ml量瓶中用乙腈稀釋至刻度,搖勻,配成濃度為10mg·L-1的丙泊酚對照品標準工作液。麝香草酚標準工作液配制精密稱取麝香草酚10mg,加入100ml的量瓶中,用乙腈溶解并稀釋至刻度,搖勻后即
3、可得濃度為100mg·L-1的麝香草酚標準工作液。血藥濃度測定量取待測的肝素抗凝血漿1ml加入試管中，并準確加入內(nèi)標物即100mg·L-1麝香草酚標準儲備液100μl,再加入PH6.0、濃度為0.1mol.l-1的磷酸二氫鉀緩沖溶液100μl，搖勻混合后,加入5ml環(huán)己烷有機溶劑,立即漩渦混和3min。再在低溫離心機中3000r.min-1離心20min,靜置分層，取4ml上層液移至另一尖底試管中，在50℃下用N2吹干，用100μl流動相溶解,取20μl進樣分析。？乙腈-水（70:30）麝香草酚磷酸二氫鉀緩沖液PH6.0、濃度為0.1mo
4、l.l-1環(huán)己烷標準曲線制備取6支10ml具塞試管，并分別加入1ml空白血漿，再精密量取適量的丙泊酚標準溶液，使其血藥濃度分別相當于0.04μg.ml-1，0.1μg.ml-1，0.25μg.ml-1，1μg.ml-1，5μg.ml-1，25μg.ml-1的6種濃度的含藥血漿（10mg·L-1：4μl、10.1μl、25.64μl、111.1μl、1000μl，100mg·L-1：333.3μl），取上述含藥血漿各1ml，按上述的血藥濃度測定方法進行操作，以丙泊酚對內(nèi)表物的峰面積比（X）與丙泊酚的質(zhì)量濃度(μg.ml-1)的進行線性回歸。
5、得丙泊酚在0.04～25μg.ml-1濃度范圍內(nèi)線性回歸方程為Y=1.1679X-0.0025，相關系數(shù)r=0.9979，見圖2圖2標準曲線和線性方程-6-回收率與精密度實驗提取回收率在1ml空白人血漿中準確加入適量的丙泊酚標準溶液，分別配制成0.1μg.ml-1，1μg.ml-1和25μg.ml-1低、中、高3種質(zhì)量濃度的丙泊酚標準血樣（10mg·L-1：10.1μl、111.1μl，100mg·L-1：333.3μl），經(jīng)萃取后再加內(nèi)標，測定其峰高比R1，同法測定不經(jīng)萃取的標準丙泊酚溶液加內(nèi)標的峰高R2，按R1/R2×100%計算提取
6、回收率，結(jié)果見表1.表1血漿中丙泊酚提取回收率（，n=5）質(zhì)量濃度（μg.mL-1）回收率/%RSD/%0.199.15±2.382.401106.88±3.283.072598.28±4.494.58方法回收率同上述方法分別配制濃度也為0.1μg.mL-1，1μg.mL-1，25μg.mL-1三種濃度的丙泊酚標準血樣各5份（10mg·L-1：10.1μl、111.1μl，100mg·L-1：333.3μl），按上述血藥濃度測定方法進行操作，將測定的丙泊酚峰高與內(nèi)標峰高比帶入標準曲線，求出測定藥物濃度，用測定濃度/實際濃度×100%公式求
7、得方法回收率，見表2。表2測定方法回收率（，n=5）質(zhì)量濃度（μg.mL-1）回收率/%RSD/%0.1101.85±1.361.341101.16±1.642.1425100.01±1.741.74精密度實驗同上述方法分別配制濃度為0.1，1，25μg.mL-1三種濃度的丙泊酚標準血樣各5份（10mg·L-1：10.1μl、111.1μl，100mg·L-1：333.3μl），按上述血藥濃度測定方法進行操作。以上3種濃度的血漿樣品分別于同一日內(nèi)不同時間內(nèi)測定，共計5次，根據(jù)同一濃度的不同時間點測得的數(shù)值，計算各質(zhì)量濃度的日內(nèi)變異系數(shù)，即
8、為日內(nèi)精密度；另在連續(xù)5日每日測定一次丙泊酚-6-的質(zhì)量濃度，根據(jù)所測得濃度計算日間變異系數(shù)，即為日間精密度，低、中、高三種濃度日內(nèi)、日間變異均小于10%，表明該方法的精密度符合生物樣品的分析
