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1、外陰HPV感染患者中宮頸HPV分型檢測(cè)作者:施錚錚,楊孝軍,許張曄,陳云琴,鄭飛云【摘要】目的:研究外陰尖銳濕疣(Condylomaacuminata,CA)和外陰鮑溫樣丘疹病(Bowenoidpapulosis,BP)患者宮頸細(xì)胞人乳頭瘤病毒(HPV)的檢出情況,嘗試為此類患者群的宮頸病變篩查或?qū)m頸癌的防治提供流行病學(xué)依據(jù)。方法:選取自2007年1月至6月間在我院婦科門診首次就診的44例外陰CA和7例外陰BP患者,采集宮頸細(xì)胞應(yīng)用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)(凱普HPV分型)行21種HPV-DNA亞型檢測(cè);同期檢測(cè)54例慢性宮頸炎患者作對(duì)照。結(jié)果:外陰CA組和BP組的宮
2、頸高危型HPV檢出率分別為56.82%和85.71%,均顯著大于對(duì)照組(20.37%),P<0.01;外陰HPV感染組較對(duì)照組更易發(fā)生高危型HPV的多重感染(P<0.05),其中以二重和三重感染為主;外陰CA患者的宮頸HPV感染以低危型11、6亞型為主,高危型HPV感染中以58、16、52亞型位居前三位,其中檢出CINII級(jí)1例;外陰BP組中宮頸HPV感染以16亞型為主,檢出CINI級(jí)、II級(jí)共2例。結(jié)論:外陰CA和BP患者臨床體征明顯,易于診斷,但可能會(huì)伴發(fā)宮頸高危型HPV感染,從而導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)甚至宮頸癌的發(fā)生?!娟P(guān)鍵詞】外陰;尖銳濕
3、疣;鮑溫樣丘疹??;宮頸;HPV感染8隨著對(duì)人乳頭瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)與女性生殖器相關(guān)疾病研究的深入以及HPV檢測(cè)技術(shù)的不斷升級(jí),臨床中女性生殖道HPV感染的檢出率亦隨之增加。外陰HPV感染可致外陰的尖銳濕疣(Condylomaacuminata,CA)和鮑溫樣丘疹病(Bowenoidpapulosis,BP)等疾病。但HPV多灶性感染的特征,可能會(huì)同時(shí)導(dǎo)致宮頸細(xì)胞的HPV感染[1],其早期多表現(xiàn)為潛伏性感染和亞臨床感染(subclinicalhumanpapillomavirusinfection,SPI),肉眼難以識(shí)別,易被忽
4、視。現(xiàn)已明確高危型HPV持續(xù)性感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)和宮頸癌的主要致病因素。我們應(yīng)用凱普導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù),采集外陰CA、BP患者的宮頸細(xì)胞行HPV-DNA的分型檢測(cè),以研究此類患者中宮頸感染HPV的型別及伴發(fā)相關(guān)宮頸疾病的狀況。1資料和方法1.1一般資料選擇自2007年1月至6月間在本院婦科門診首次就診的患者,均主訴外陰贅生物,經(jīng)活檢病理確診為外陰CA患者44例,外陰BP患者7例。年齡18~63歲,平均(36.2±11.1)歲。外陰CA患者中宮頸檢查發(fā)現(xiàn)疣狀贅生物者9例,不同程度宮頸糜爛者36例;外陰BP患者中宮頸檢查未發(fā)現(xiàn)贅生物,宮頸糜爛4例。選取同
5、期就診的54例外陰正常而患慢性宮頸炎者作為對(duì)照組,其中臨床檢查宮頸糜爛者44例,年齡21~54歲,平均(37.3±7.4)歲,兩組年齡相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)。81.2方法 1.2.1按照凱普導(dǎo)流雜交HPV-DNA檢測(cè)法要求,兩組研究對(duì)象均用無(wú)菌棉簽拭凈宮頸口分泌物,專用HPV采樣刷緊貼宮頸口及宮頸管旋轉(zhuǎn)取得脫落細(xì)胞,再將宮頸刷放入盛有細(xì)胞保存液和識(shí)別編號(hào)的取樣管中待檢。采用凱普醫(yī)用核酸分子快速雜交基因分型試劑盒作HPV-DNA檢測(cè)及分型。實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果判斷按試劑盒要求進(jìn)行:①宮頸細(xì)胞HPV-DNA提取、PCR擴(kuò)增;②核酸分子快速導(dǎo)流雜交;③顯色HPV基因
6、分型。該試劑盒可檢測(cè)13種高危型HPV-DNA:16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68亞型;5種低危型HPV-DNA:6、11、42、43、44亞型;另可檢測(cè)出3種中國(guó)人群特有的高危亞型HPV53、66亞型及CP8304;共計(jì)21種HPV亞型。本研究中,將缺乏細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,僅HPV-DNA檢測(cè)呈陽(yáng)性者稱為HPV的潛伏性感染[2];芯片上HPV亞型分布顯色后出現(xiàn)二點(diǎn)或二點(diǎn)以上陽(yáng)性即為多重感染[3]。1.2.2外陰CA和BP組中,肉眼可識(shí)別的宮頸疣樣贅生物直接取組織活檢。其余患者及對(duì)照組患者均接受陰道鏡下宮頸多點(diǎn)活檢,行病理檢查
7、以明確是否存在SPI或CIN,病理閱片時(shí)出現(xiàn)挖空細(xì)胞即判斷為SPI[2]。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法8采用SPSS13.0軟件包,計(jì)量資料行t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料行列聯(lián)表x2檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1宮頸HPV-DNA亞型的感染情況44例外陰CA患者中僅5例宮頸細(xì)胞HPV-DNA檢測(cè)呈陰性(占11.36%),病理檢查為慢性宮頸炎,而有39例檢測(cè)均呈陽(yáng)性(占88.64%),其中肉眼可識(shí)別的宮頸HPV病變有9例,組織活檢為宮頸尖銳濕疣,余30例經(jīng)病理學(xué)證實(shí)分別為宮頸HPV潛伏性感染27例,SPI2例,CINⅡ級(jí)1例。外陰CA中25例宮頸細(xì)胞檢出高危型別HPV。7例外陰BP患者中1例宮頸細(xì)
8、胞HPV-