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1、HPLC法測定20種中藥飲片中蘆丁的含量【摘要】目的測定20種中藥飲片中蘆丁的含量。方法采用反相高效液相色譜法，以HypersilGOLD柱（5μm250mm×4.60mm）為分析柱，乙腈∶水（加磷酸調(diào)pH至2.6）（8∶92～30∶70）為流動相，流速：0.8ml/min；檢測波長為254nm，柱溫30℃。結(jié)果蘆丁濃度在（0.0095～0.3800）μg范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論該方法簡易準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，在本色譜條件及樣品處理方法下，可以準(zhǔn)確測出該20種中藥飲片中蘆丁的含量?！娟P(guān)鍵詞】中藥；蘆?。桓咝б合嗌V法【Abstract
2、】ObjectiveToestablishHPLCmethodfordeterminationofthecontentofrutinin20kindsofChineseherbalmedicines.MethodsTheHPLCwasconductedonaHypersilGOLDcolumn(5μm，250mm×4.6mm)withacetonitrile-watersolution(8∶92～30∶70).ThesolutionwasadjustedtopH2.6withphosphoricacidandusedasmobilephasew
3、iththeflowrateof0.8ml/min.Thedetectivewavelengthwassetto254nmandcolumntemperatureat30℃.ResultsTheareaunderthepeakofchromatographyisverywellcorrelatedwiththeconcentrationofrutinintherangeof（0.0095～0.3800）μg.ConclusionThismethodissimpleandaccurate.Theexperimentalresultsarevery
4、reproducible.Undertheconditionsasstatedinthemethodsection，therutincanbeseparatedverywellfrom20kindsofChineseherbalmedicines.TheconcentrationoftheRutin，therefore，canbeaccuratelydetermined.【Keywords】Chineseherbalmedicines；rutin；HPLC蘆丁，即蕓香苷，是中藥飲片中較多見的一種黃酮類成分，有抗炎、降血脂、抗病毒及維生素P樣等作
5、用。有關(guān)蘆丁的HPLC測試方法已有很多報道［1～3］，筆者采用反相高效液相色譜法在50余種常用中藥飲片中分離、檢測蘆丁成分，經(jīng)在時間軸上（調(diào)節(jié)色譜條件以使出峰保留時間在10～35min范圍內(nèi)改變）反復(fù)與蘆丁對照品比較，最后確認(rèn)其中的20種中藥飲片中含有較高的黃酮類物質(zhì)蘆丁。文獻(xiàn)曾報道該20種藥材中的8種含有蘆丁［3，4］，但具體含量不詳，筆者查閱國內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)，未發(fā)現(xiàn)在另12種藥材中也含有蘆丁的最新報道。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可供有關(guān)科研和臨床工作者參考。1實(shí)驗(yàn)研究1.1儀器和試藥Waters高效液相色譜儀，包括510泵，484紫外檢測器，680梯度控制器。浙
6、江大學(xué)N2000色譜工作站。3蘆丁對照品（中國藥品生物制品檢定所），50種藥材樣品分3次每次50種分別購自浙江中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)藥廠、浙江省中醫(yī)院和浙江中醫(yī)學(xué)院門診部。經(jīng)浙江中醫(yī)學(xué)院中藥鑒定教研室陳錫林副教授和浙江中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)藥廠張?jiān)聘敝魅嗡帋熻b定并確認(rèn)。乙腈為色譜醇，磷酸為分析醇，水為純凈水。1.2色譜條件HypersilGOLD柱（5μm250mm×4.6mm）；流動相：乙腈∶水（8∶92～30∶70)，加磷酸調(diào)pH至2.6；流速：0.8ml/min；檢測波長為254nm，柱溫為30℃。1.3對照品溶液配制精密稱取蘆丁對照品1.9mg，置10ml
7、量瓶中，加甲醇至刻度，置超聲波中振蕩溶解，精密吸取該標(biāo)準(zhǔn)溶液0.01ml、0.05ml、0.1ml、0.2ml、0.4ml，置1ml定量管中，用淋洗液稀釋至刻度備用。1.4樣品處理取上述三批50種藥材的干燥樣品各50g，打成粗粉，對應(yīng)混合，各稱取3份，每份2g，置150只100ml大口瓶中，各加50ml甲醇，超聲波中振搖15min后浸泡過夜，吸取上清液，經(jīng)離心，0.45μm濾膜過濾，C18固相萃取器萃取后，用淋洗液稀釋5倍待測。1.5定性分析調(diào)整流動相中乙腈和水的比例，使蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品的出峰時間控制在10min左右，取上述各待測樣品，吸取5μl進(jìn)樣
8、，初步確定該條件下的樣品峰型后，加適量蘆丁對照品稀釋液于該待測樣品中（使樣品中的對應(yīng)蘆丁峰面積增大1～2倍），再逐次調(diào)整流動相比例，使蘆丁的出峰時間從
