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1、血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用及形態(tài)學(xué)復(fù)檢ProgramofUrbanandRuralCounterpartSupportonClinicalLaboratory TechnologyStandardDevelopmentandTraining2021/7/10城鄉(xiāng)對口支援臨床檢驗(yàn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)制定及培訓(xùn)主要內(nèi)容一、血細(xì)胞分析儀發(fā)展簡史二、血細(xì)胞分析儀檢測原理三、血細(xì)胞檢驗(yàn)圖形及臨床應(yīng)用四、如何保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性血細(xì)胞形態(tài)學(xué)復(fù)檢血細(xì)胞分析儀性能評價及全面質(zhì)量管理血液分析產(chǎn)品的發(fā)展歷程17世紀(jì)列文虎克原始的顯微鏡1674年列文虎克《倫敦皇家學(xué)會哲學(xué)學(xué)報》------第一篇對紅細(xì)胞的
2、正式記載1855年發(fā)明了用于計(jì)數(shù)血細(xì)胞的計(jì)數(shù)板改良Neubauer計(jì)數(shù)板1879年埃爾利希(德國)發(fā)明活體染色法2021/7/10一、血細(xì)胞分析儀發(fā)展簡史庫爾特原理血細(xì)胞是相對不良導(dǎo)體，當(dāng)其懸浮于電解質(zhì)溶液中通過檢測微孔時，會改變微孔內(nèi)外原來恒定的電阻，結(jié)果產(chǎn)生電脈沖。脈沖的大小代表了通過微孔血細(xì)胞的體積大小，脈沖的數(shù)量代表了通過微孔血細(xì)胞的數(shù)量。WallanceH.Coulter20世紀(jì)40年代后期，美國人庫爾特發(fā)明并申請了粒子計(jì)數(shù)的設(shè)計(jì)專利。2021/7/10基于Coulter原理的血細(xì)胞計(jì)數(shù)在1953年獲得美國發(fā)明專利同年和他的兄弟約瑟夫（Joseph）開創(chuàng)
3、了自己的公司，并成功的設(shè)計(jì)和制造出了可以計(jì)數(shù)血細(xì)胞的專用儀器，然后開始了在這一領(lǐng)域的商業(yè)運(yùn)作華萊士.庫爾特約瑟夫.庫爾特2021/7/10血細(xì)胞分析儀的發(fā)展歷史70年代血小板與紅細(xì)胞同時計(jì)數(shù)80年代，在8項(xiàng)檢測基礎(chǔ)上加上紅細(xì)胞指數(shù)、三個直方圖的報告，不僅提供是否貧血，且可對貧血的類型和原因進(jìn)行分析；90年代，將激光、射頻、化學(xué)染色計(jì)數(shù)應(yīng)用于對細(xì)胞特性的分析，五分類血液分析儀出現(xiàn)并得到廣泛的應(yīng)用VCS原理激光法原理熒光染色法化學(xué)染色法血細(xì)胞分析儀的現(xiàn)狀血常規(guī)檢驗(yàn)多參數(shù)化有的儀器可以提供40~50種測量或計(jì)算參數(shù)，有的甚至還整合了免疫化學(xué)參數(shù)，如CD3,CD4等以及C
4、反應(yīng)蛋白水平。多功能合成擴(kuò)展已經(jīng)不僅僅局限在進(jìn)行常規(guī)血細(xì)胞分析，近年來它增加了許多擴(kuò)展的功能。例如將網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)的計(jì)數(shù)和分析功能加入其中。檢測速度的提高增加了自動進(jìn)樣系統(tǒng)，測定速度加快，一般可以達(dá)到每小時80~100個樣品。血細(xì)胞分析儀產(chǎn)品的系列化和流水線化2021/7/10數(shù)字化圖像分析或儀器視覺技術(shù)進(jìn)入血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)利用單克隆抗體標(biāo)記技術(shù)提高儀器識別細(xì)胞能力同機(jī)檢測血細(xì)胞和血漿內(nèi)化學(xué)或免疫學(xué)指標(biāo)機(jī)內(nèi)“專家診斷系統(tǒng)”的臨床應(yīng)用實(shí)現(xiàn)血細(xì)胞分析儀與標(biāo)本前處理儀器、生化分析儀、免疫分析儀更便捷的全自動流水線血細(xì)胞分析儀技術(shù)展望2021/7/10二、血細(xì)胞分析
5、儀的檢測原理紅細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)原理白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理血紅蛋白檢測原理2021/7/10platelets（一）紅細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)原理電阻抗法（庫爾特原理）2021/7/10紅細(xì)胞與血小板的檢測在同一通道，小紅細(xì)胞，細(xì)胞碎片及血小板自身的聚集等對血小板計(jì)數(shù)及平均血小板體積的影響較大，血小板直方圖能反映這些變化，出現(xiàn)異常血小板直方圖，根據(jù)圖形的變化可了解血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。（大于右側(cè)閾值考慮為紅細(xì)胞）（二）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理白細(xì)胞三分群計(jì)數(shù)原理白細(xì)胞五分類計(jì)數(shù)原理2021/7/10根據(jù)白細(xì)胞體積大小，可初步確認(rèn)細(xì)胞分群第一群（30-90fl）：小細(xì)胞群，主要分布的是淋
6、巴細(xì)胞第二群（90-160fl）：中間細(xì)胞群，主要包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞，核左移的各階斷幼稚細(xì)胞或白血病時白血病細(xì)胞第三群（160fl以上）：大細(xì)胞群，主要是中性粒細(xì)胞白細(xì)胞三分群計(jì)數(shù)原理小細(xì)胞群中間細(xì)胞群大細(xì)胞群2021/7/10儀器測定的細(xì)胞大小指加入溶血素后的白細(xì)胞大小血濃縮圖片：可見中性粒細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞溶血劑處理后的白細(xì)胞：白細(xì)胞膜縮于細(xì)胞核上，只能見大，中，小三群細(xì)胞核，淋巴細(xì)胞最小，單核細(xì)胞次之，分葉核粒細(xì)胞最大2021/7/10白細(xì)胞三分群計(jì)數(shù)原理白細(xì)胞經(jīng)特殊溶血素處理后，細(xì)胞失水，各群細(xì)胞體積
7、分布差異增加。分布范圍：35-450fl(256個通道)白細(xì)胞可以根據(jù)體積大小區(qū)分為三個群三分群血細(xì)胞分析儀的缺陷2021/7/10方法學(xué)單一，非特異性檢測（1）僅分大小，不辨其他特性，相同大小的顆粒易誤計(jì)數(shù)（2）中間細(xì)胞包含了多種細(xì)胞，和成熟WBC分類有很大差異干擾大，異常標(biāo)本的處理能力差（1）MID增多:可能是MONO、EOS、BASO、BLAST增多（2）LYM干擾：PLT、NRBC、FWBC（3）PLT干擾：RBC、PLT本身、FWBC等（4）異常顆?；蛐盘柕母蓴_三分類結(jié)果僅為初步結(jié)果，要求我們進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)白細(xì)胞五分類計(jì)數(shù)原理激光與細(xì)胞化學(xué)法容量、電導(dǎo)、
8、光散射法電
