rhGCSF對小鼠骨髓間充質干細胞的動員作用.doc

《rhGCSF對小鼠骨髓間充質干細胞的動員作用.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、rhGCSF對小鼠骨髓間充質干細胞的動員作用作者：劉岐煥，程范軍，陳龍，唐俊明，王家寧，高清平【摘要】為了研究rhGCSF體內應用對小鼠骨髓間充質干細胞（MSC）的動員作用，將30只小鼠隨機分為2組：rhGCSF組和對照組，分別給予皮下注射rhGCSF80μg/（kg·d）和等量生理鹽水,連續(xù)5天，在最后1次注射后分別于6，12和168小時取小鼠骨髓和外周血，以1×106單個核細胞（MNC）接種于12孔培養(yǎng)板14天，對形成的成纖維細胞集落（CFUF）進行計數(shù)，用胰蛋白酶消化后應用流式細胞術測定表面抗原并進行成脂，成骨誘導。結果表明：rhGCSF組骨髓形成的CFUF數(shù)

2、均較對照組明顯增加(p<0.01)。6小時取材較12小時,168小時取材形成的CFUF數(shù)目多(p<0.01)，12小時與168小時CFUF差異無統(tǒng)計學意義。流式細胞術檢測骨髓CFUF顯示CD34－、CD133－、CD90＋、CD105＋，骨髓CFUF具有成脂、成骨分化的能力。rhGCSF組6小時取材外周血具有類似骨髓的CFUF，出現(xiàn)的頻率為（0.50±0.11）×10-6，與對照組比較差異有顯著性（p<0.05）。結論：rhGCSF可使小鼠骨髓間充質干細胞增殖加速，但時間短暫，其高峰在rhGCSF應用5天后的6小時內。rhGCSF對小鼠間充質干

3、細胞也有動員能力，但作用較弱?！娟P鍵詞】骨髓間充質干細胞EffectsofrhGCSFonMobilizationofMouseMesenchymalStemCellsAbstractToevaluatetheeffectsofrhGCSFonmobilizationofmesenchymalstemcells(MSCs)ofmousebonemarrowatdifferenttimepoint,thirtymicewererandomlydividedintorhGCSFtreatmentgroupandcontrolgroup.Themiceweresubcutaneo

4、uslyinjectedwithrhGCSFinadoseof80μg/kgorsalinefor5days.Thebonemarrowandperipheralbloodwereobtainedattimepointsof6,12,168hoursafterfinalinjectionofrhGCSForsaline.Bonemarrowmononuclearcells(BMMNCs)wereseededatdensityof1×106MNCsonto12wellplateforcultureexpansioninDMEMsupplementedwith10%FBS,an

5、dthenumberofcolonyformingunitfibroblast(CFUF)wascountedafter14days.ThecellswerecollectedbytrypsinizationandthesurfaceantigensCD34,CD133,CD90andCD105wereanalyzedbyflowcytometry.ThemultidifferentiationofMSCsweredoneinthecultureconditionofinducedadipocyteandosteocyte.PeripheralbloodMNCsexami

6、nationwassameasthebonemarrow.TheresultsindicatedthatthenumberofCFUFofbonemarrowinrhGCSFgroupwasmorethanthatincontrolgroup(p<0.01)，thenumberofCFUFinrhGCSFgroupat6hourswasmorethanthatat12hoursand168hours,7respectively(p<0.01).TherewasnoobviousdifferencebetweenCFUFat12hoursandat168hou

7、rs(p>0.05).MSCswerepositiveforCD90,CD105andnegativeforCD34andCD133.MSCswerefoundtodifferentiateintoadipocyteandosteocyteinvitro.TheCFUFofPBMNCsobtainedandculturedinvitrointhesamecultureconditionscouldbeobservedaftertherhGCSFinjectionat6h