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1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞接種小鼠肝癌組織對(duì)小鼠生存期的影響作者：呂昕蕾，張南征，陳復(fù)興，劉軍權(quán)，孫蕾清【摘要】目的研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）接種于原發(fā)性肝癌Heps荷瘤小鼠對(duì)其生存期的影響。方法體外貼壁培養(yǎng)法制備昆明小鼠骨髓MSC，分離培養(yǎng)傳代擴(kuò)增，流式細(xì)胞儀鑒定MSC表型。4′，6-二脒基-2-苯基吲哚(4′，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI)對(duì)MSC進(jìn)行標(biāo)記備用。隨機(jī)取54只8周齡昆明小鼠，建立Heps肝癌移植瘤模型。移植瘤長(zhǎng)徑達(dá)0.5～0.8cm時(shí)，隨機(jī)分為MSC組、DAPI標(biāo)記MSC組（DAPI組）、生理鹽水(NS)對(duì)照組（NS
2、對(duì)照組），每組18只。MSC組及DAPI組分別在小鼠Heps肝癌移植瘤內(nèi)注射2×106MSC及DAPI標(biāo)記的MSC，NS對(duì)照組注射同體積的NS。每組各有6只荷瘤小鼠用于觀察生存期。①自注射日起，隔日測(cè)量各組小鼠腫瘤長(zhǎng)、短徑，計(jì)算注射后3、7、14及28天的腫瘤體積；②記錄注射當(dāng)天開始至小鼠死亡的時(shí)間，計(jì)算各組小鼠平均生存時(shí)間；③于注射后3、7、14及28天，各組分批處死3只小鼠。取腫瘤組織，石蠟包埋并切片，蘇木精-伊紅染色后光學(xué)顯微鏡觀察。結(jié)果①體外貼壁法成功制備MSC，流式細(xì)胞儀對(duì)第3代MSC進(jìn)行鑒定，高表達(dá)CD29（97.84%），低表達(dá)CD34(5.56%
3、)、CD45（7.66%）。②小鼠Heps肝癌腹水瘤細(xì)胞成功制備小鼠Heps肝癌移植瘤模型，成瘤率100%。③注射MSC后1周，MSC組及DAPI組腫瘤體積增大明顯，與NS對(duì)照組差異有顯著性（P<0.05）。④MSC組平均生存期為45天（95%可信區(qū)間：33～56天），DAPI組平均生存期為34天（95%可信區(qū)間：31～37天），NS對(duì)照組平均生存期為33天（95%可信區(qū)間：28～37天）；MSC組與NS對(duì)照組差異有顯著性（P<0.05），其余組間生存期差異無(wú)顯著性（P>0.05）。⑤各組小鼠腫瘤蘇木精-伊紅染色：28天時(shí)，MSC組及DAPI組
4、腫瘤組織壞死明顯，范圍較NS對(duì)照組更大。結(jié)論MSC可在原發(fā)性肝癌Heps荷瘤小鼠腫瘤組織內(nèi)定植，MSC接種后1周內(nèi)腫瘤增長(zhǎng)迅速，小鼠生存期延長(zhǎng)?！娟P(guān)鍵詞】肝腫瘤，實(shí)驗(yàn)性；間充質(zhì)干細(xì)胞；Heps肝癌；小鼠Abstract:ObjectiveToinvestigatetheimpactofmesenchymalstemcells(MSC)inoculatedintotheestablishedmodelofHeps-bearingmiceonsurvivaltime.MethodsMSCethod.PhenotypesofMSCetry.MSCiceas.SCgro
5、up，MSClabeledalsaline(NS)controlgroup（NScontrolgroup）.MSCandMSCmarkedbyDAPIinistratedintothemouserightrearbacktumortissueof2×106.TheNScontrolgroupinistratedevolumeofNS.6miceineachgroupe.①Thesizeoftheimplantedtumorseasuredevery2daysandthetumorvolumeeofthetumor-bearingmiceeansurvivalti
6、meicefromeachgrouportissuesamplescollectedatabove4timepointsbeddedinparaffinforroutinepathologicalsection,hematoxylin-eosinstainingandlightmicroscopyobservation.Results①PurifiedMSCethod.Passage3cellsetry.TheresultsshoodelofHeps-bearingmiceorformationis100%.③Atthefirstinistrated,thevo
7、lumeofthetumorsarkedlyincreasedintheMSCgroupandtheDAPIgroupparedeansurvivaltimeeansurvivaltimeeansurvivaltimeinistrated,thereortransplantationofHeps-bearingmice.InthefirsteoftumorintheMSCgroupisincreasedquickly.ThesurvivaltimeofHeps-bearingmiceisprolonged.Keys,experimental;mesenchyma
8、lstemcells;H
