當(dāng)歸補血湯對小鼠免疫功能的影響

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1、中國食物與營養(yǎng)2010年第08期FoodandNutritioninChinaNO．08，2010當(dāng)歸補血湯對小鼠免疫功能的影響水易有金，鐘英麗，劉華金，陳雪，王鑫，溫柔’(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，長沙410128；湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長沙410128)摘要：當(dāng)歸補血湯是中藥驗方。按照我國《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的增強免疫力功能實驗方法進行試驗，研究該方對小鼠免疫功能的影響。得出當(dāng)歸補血湯能增加小鼠抗體生成細胞數(shù)、血清半數(shù)溶血值，淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力、小鼠單核一巨噬細胞碳廓清能力、巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力、NK細胞活性、脾臟／體重比值、胸腺／體

2、重比值，而對小鼠體重增長無明顯影響。提示該方對小鼠機體的非特異及特異性免疫功能均有明顯增強作用。關(guān)鍵詞：當(dāng)歸補血湯；免疫功能；特異性免疫；非特異性免疫當(dāng)歸補血湯，出自李東垣內(nèi)外傷辨惑論‘暑傷胃體重為18～22g，由長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技氣論，是補益氣血的經(jīng)典方劑。該方由黃芪和當(dāng)歸服務(wù)部提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(湘)2006—以5：1比例組成，兩藥相伍，共同發(fā)揮補氣生血的作0001。每40只分為1組，共五組。免疫I組(雌)，進用。該方臨床應(yīng)用廣泛，近年來，國內(nèi)很多學(xué)者對其行碳廓清實驗；免疫Ⅱ組(雌)，進行小鼠腹腔巨噬活性組分，配方比例，及其在免疫藥

3、理方面的作用進細胞吞噬雞紅細胞實驗；免疫Ⅲ組(雌)，進行遲發(fā)行了實驗研究”-31。當(dāng)歸補血湯組方簡單，配伍配比型變態(tài)反應(yīng)實驗；免疫Ⅳ組(雌)，進行臟體比值、精當(dāng)，顯示了古方的科學(xué)內(nèi)涵和重要參考價值’。半數(shù)溶血值(HC。)和抗體生成細胞數(shù)的測定；免疫V為較全面研究當(dāng)歸補血湯對小鼠的非特異及特異組(雌)，進行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗、性免疫功能的影響，本實驗按照保健食品檢驗與評NK細胞的活性測定。價技術(shù)規(guī)范規(guī)定的增強免疫力功能實驗方法，研究1．1．3實驗環(huán)境條件實驗環(huán)境為屏障系統(tǒng)，溫度了當(dāng)歸補血湯對小鼠抗體生成細胞數(shù)、血清半數(shù)溶血22～24℃，濕度52％～

4、58％，實驗動物使用許可證號值，淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力、小鼠單核一巨噬細胞碳廓清為SYXK(湘)2005—0001號。能力、巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力及NK細胞活性，1．1．4劑量選擇及樣品處理據(jù)人體口服推薦量，當(dāng)小鼠體重增長、脾臟／體重比值、胸腺／體重比值的影歸補血湯口服液低、中、高劑量分別為2．5ml／kg·bw、響。5．0mL／kg·bw、15．0mL／kg·bw(分別相當(dāng)于人體推薦劑量的5、l0、30倍)。取當(dāng)歸補血湯口服液25．0ml、1材料和方法50．0ml、150．0ml~U蒸餾水至200ml，配成低、中、高1．1材料劑量所需濃度。每天灌胃1次，灌胃體積為

5、0．2ml／10g·1．1．1樣品當(dāng)歸補血湯以5：1比例組成，藥物組bw，對照組予以等體積的溶劑，連續(xù)30d。成(均系干品)為黃芪30g，當(dāng)歸6g，浸泡2h，先后加1．1．5主要儀器與試劑二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、400ml和200ml自來水煮沸1h和30min，合并兩次藥722分光光度計、恒溫水浴箱、酶標(biāo)儀、顯微鏡等。液，紗布過濾，蒸發(fā)濃縮至30ml得50％當(dāng)歸補血湯微量注射器、細胞計數(shù)器、24孑L和96孔平底細胞培養(yǎng)水煎劑。人體口服推薦量為30ml／d，成人體重按60kg板，96~Lu型細胞培養(yǎng)板等。計算，折合劑量0．5ml／kg·bw。綿羊紅細胞(SRBC)

6、、Hank’s液(pH7．2—7．4)、1．1．2實驗動物與分組清潔級昆明種小鼠200只，RPMI1640培養(yǎng)液、小牛血清、ConA、MTT、PBS緩基金項目：湖南省教育廳一般項目(08C434)，湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)秀青年基金項目(09QN12)。作者簡介：易有金(1968～)，女，湖南漣源人，博士，湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院教授。通訊作者：鐘英麗62中國食物與營養(yǎng)沖液(pH7．2～7．4)、補體(豚鼠血清)、Giemsa染液等。1．3實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計1．2實驗方法用SPSS軟件進行統(tǒng)計分析。臟器／體重比值測定、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)(足2結(jié)果跖增厚法)、ConA誘導(dǎo)的

7、小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗(MTT法)、抗體生成細胞檢~lJ(Jerne改良玻片法)、半數(shù)溶血2．1當(dāng)歸補血湯口服液對小鼠體重的影響值(HC。)的測定、小鼠碳廓清實驗、小鼠腹腔巨噬細由表1可見，各劑量組實驗初、實驗中期、實驗?zāi)┌淌呻u紅細胞實驗(半體內(nèi)法)、NK細胞活性的測定小鼠體重及實驗期間小鼠體重增長對照組比較，差異(乳酸脫氫酶測定法)參照參考文獻進行。無顯著性(P>0．05)。表1當(dāng)歸補血湯口服液增強免疫力功能實驗(V)組小鼠體重2．2當(dāng)歸補血湯口服液對小鼠免疫器官臟器／體重比巴細胞轉(zhuǎn)化能力的影響由表4可見，經(jīng)口給予不同劑值的影響量的當(dāng)歸補血湯口服液30d，各劑

8、量組對小鼠淋巴細由表2可