加味當歸補血湯對荷瘤小鼠血液流變學(xué)及免疫功能的影響論文

《加味當歸補血湯對荷瘤小鼠血液流變學(xué)及免疫功能的影響論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、加味當歸補血湯對荷瘤小鼠血液流變學(xué)及免疫功能的影響論文張奉梅，龔繼勇，龔繼梅，王興武【摘要】目的通過加味當歸補血湯（簡稱中藥）對荷瘤小鼠血液流變學(xué)及免疫功能的影響，探討中藥在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用及其機制。方法昆明種小鼠隨機分為空白組、模型組和中藥組，空白組為健康小鼠，給予生理鹽水灌胃；模型組和中藥組為H22荷瘤小鼠動物模型，分別給予中藥（中藥組）和生理鹽水（模型組）灌胃.freell，由山東省腫瘤醫(yī)院制劑中心生產(chǎn)，批號：070318。大鼠抗小鼠T細胞表面標記單克隆抗體（抗CD3、抗CD4）購于steroetc公司。1.2儀器LBY-NJ

2、6型旋轉(zhuǎn)式血液粘度計，LBY-NJ2型血小板聚集儀，F(xiàn)-820血液分析儀，BECKMAN流式細胞分析儀。1.3瘤細胞株小鼠肝癌H22細胞株，由山東省腫瘤醫(yī)院基礎(chǔ)研究中心提供。2方法2.1荷瘤小鼠模型建立取小鼠肝癌H22細胞株制成細胞懸液，計數(shù)活細胞數(shù)后培養(yǎng)傳代兩次，將培養(yǎng)液離心得到腫瘤細胞。將腫瘤細胞稀釋成2×107/ml濃度后接種到小鼠腹腔內(nèi)，0.2ml/只，瘤株在動物體內(nèi)傳代2次后，選擇接種8d腹部明顯膨大的小鼠，抽取腹水，鏡下進行細胞分類計數(shù)，瘤細胞數(shù)95%，腹水用無菌PBS液稀釋至2×107/ml，接種于小鼠背部近中線處，共

3、40只，0.2ml/只。2.2分組及給藥腫瘤接種24h后隨機分為兩組，荷瘤H22小鼠20只（模型組），加味當歸補血湯組20只（中藥組）；另外未造模的20只健康小鼠為空白對照組（空白組）。給予空白組和模型組小鼠每日灌胃生理鹽水0.5ml/只，中藥組給予加味當歸補血湯灌胃0.5ml/只。給藥后分別于10d，20d每組各取10只小鼠，末次給藥前禁食16h，自由飲水，稱重。2.3觀察指標眶后靜脈叢取血，肝素抗凝，腹腔注射麻醉，剝?nèi)∧[瘤稱重。測定各組小鼠全血黏度，包括低切變率和高切變率，測定血小板最大聚集率；按說明書操作應(yīng)用流式細胞分析儀測定

4、T細胞亞群（CD3+，CD4+）。取脾臟和胸腺稱重，計算脾臟指數(shù)及胸腺指數(shù)。臟器指數(shù)和抑瘤率計數(shù)公式：臟器指數(shù)(mg/g)=臟器重量(mg)/體質(zhì)量(g)；抑瘤率=(模型組平均瘤重-中藥組平均瘤重)/模型組平均瘤重×100%。2.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS11.5軟件進行分析，計量資料用±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，以P0.05為差異有顯著性意義。3結(jié)果3.1中藥對荷瘤小鼠血液流變學(xué)的影響結(jié)果見表1。表1顯示分組給藥10d和20d后，中藥組全血黏度（高切、低切）和血小板最大聚集率均較模型組降低（P＜0.05），20d時血小板

5、最大聚集率變化更明顯（P＜0.01）；而模型組較空白組全血黏度和血小板最大聚集率升高（P＜0.05）；中藥組和空白組各項指標比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。表1各組小鼠血液流變學(xué)的變化(略)3.2中藥對荷瘤小鼠免疫功能的影響結(jié)果見表2。結(jié)果顯示灌胃20d后，中藥組T細胞亞群（CD3+、CD4+）較模型組升高，差異有顯著性（P＜0.05）；胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)中藥組較模型組也升高（P＜0.05）；而中藥組和空白組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。灌胃10d各項指標變化不明顯（P＞0.05）。表2各組小鼠免疫功能的變化（略）4討論全血黏度增高往

6、往導(dǎo)致全身和局部微循環(huán)障礙，組織缺氧誘發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移。在惡性腫瘤發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移過程中，脫落于血液循環(huán)中的腫瘤細胞能引起血小板聚集，血小板的聚集可促進腫瘤細胞向血管內(nèi)皮接近，并為穿過血管壁進入周圍組織形成轉(zhuǎn)移灶提供條件。全血黏度的高切變率主要反映紅細胞的變形性，而低切變率則主要反映紅細胞的聚集性。本研究顯示模型組較空白組全血粘度（高切、低切）及紅細胞最大聚集率均升高，說明惡性腫瘤普遍存在血液高凝狀態(tài)。研究顯示血管內(nèi)凝血是腫瘤形成的前奏，對血栓形成通路任何形式的干預(yù)，都可有效地抑制腫瘤發(fā)展［4］。本結(jié)果顯示中藥的抑瘤率達32.6%，中藥組小

7、鼠的全血粘度、血小板最大聚集率均較模型組降低（P＜0.05），說明加味當歸補血湯能降低腫瘤小鼠升高的血黏度，具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移及改善血液流變學(xué)作用。機體的免疫應(yīng)答能力與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的聯(lián)系，免疫系統(tǒng)具有限制腫瘤細胞生長能力。腫瘤細胞進入血液循環(huán)后，只有極少數(shù)能夠逃脫宿主免疫細胞如NK細胞、巨噬細胞的殺傷，到達遠處組織形成新的轉(zhuǎn)移灶。參與抗腫瘤的免疫細胞包括T細胞、NK細胞、巨噬細胞等。T淋巴細胞不僅是細胞免疫的主要效應(yīng)細胞，而且是主要的免疫調(diào)節(jié)細胞，其免疫調(diào)節(jié)作用是通過其亞群細胞實現(xiàn)的。T細胞亞群可以反映整個機體免疫功能的狀態(tài)，

8、CD3+T細胞代表成熟淋巴細胞總數(shù)，CD4+T細胞具有增強和擴大免疫細胞的功能。CD4+T細胞往往協(xié)助B細胞進行分化和產(chǎn)生抗體，參與促進細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答［5］。胸腺和胰腺為機體免疫器官，是免疫細胞產(chǎn)生的場所，因此其指數(shù)也可反映機體免