脂肪間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞誘導(dǎo)分化的實驗研究

《脂肪間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞誘導(dǎo)分化的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、佳木斯大學(xué)碩士學(xué)位論文Y93301．‘論文題目：脂肪間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞誘導(dǎo)分化的實驗研究研究生：宋仁剛專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：劉樹發(fā)協(xié)助指導(dǎo)教師：曹誼林：崔磊甲．位：佳木斯大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院學(xué)位：上海第二醫(yī)科大學(xué)九院單位：上海組織工程研究開發(fā)中心學(xué)習(xí)期限：2002年9月至2005年7月學(xué)位授了單位：伴木斯大學(xué)學(xué)術(shù)誠信承諾本人鄭重聲明：所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，也不包含為獲得佳木斯大學(xué)

2、或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。六／1，f簽名乏釜壘型!日期：z!!蘭：篁：!蘭關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解佳水斯大學(xué)訂關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被臺閱和借閱；學(xué)?？梢怨颊摿x的全部或部分內(nèi)容，可以采刖影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。(保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定)簽名：贏乙印1導(dǎo)師簽名：率塹妖H期：2：!=[芏：2／佳本強大學(xué)2002級碩士學(xué)位論文⑧脂肪間充質(zhì)干細胞向

3、軟骨細胞誘導(dǎo)分化的實驗研究中文摘要【目的】：研究人脂肪干細胞(humanAdipose—derivedStemCells，ADSCs)在體外單層培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)為軟骨細胞可行性；研究脂肪于細胞與脫鈣骨復(fù)合物在三維誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下，回植到裸鼠皮下環(huán)境中組織形成情況，為軟骨組織工程臨床應(yīng)用提供初步實驗和理論依據(jù)。【材料與方法】對脂肪抽吸物中分離的問質(zhì)細胞進行體外培養(yǎng)誘導(dǎo)。實驗在兩種條件F進行，單層誘導(dǎo)培養(yǎng)和三維誘導(dǎo)培養(yǎng)(支架為脫鈣骨)，每種實驗條件各設(shè)誘導(dǎo)組和未誘導(dǎo)組，誘導(dǎo)組用含有T(；F一01、地塞米松等特定誘導(dǎo)培養(yǎng)

4、液進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，對照組的培養(yǎng)液為含10％FBS的DMEM。每天光鏡下觀察單層誘導(dǎo)和未誘導(dǎo)的脂肪下細胞形態(tài)學(xué)的改變，培養(yǎng)二天后免疫組化、原位雜交和RT—PCR等方法檢測膠原和蛋白多糖的體外表達情況；脂肪干細胞一脫鈣骨復(fù)合物誘導(dǎo)實驗組和未誘導(dǎo)對照組體外培養(yǎng)6天，叫植到裸鼠皮下，分別J‘2、4、6、8、10刪耿材。f硼j切片免疫組化、MasSon’s、AljCiail’s染色進}J二f1"2蛆和蚩自多糖表達、分伯鑒定?！窘Y(jié)果】未誘導(dǎo)的脂肪卜細胞s≯克隆性牛長，細胞形態(tài)呈民梭形；誘導(dǎo)后身ll胞逐漸呈i角形、多角形等軟骨

5、細胞樣形態(tài)。免疫組化、圬if_雜交娃求誘導(dǎo)后ADscS表達11·弘J1,2原，皿Ⅲ叫也觀察到I、III型膠原發(fā)達；阱PcR訌E實誘導(dǎo)ADSCs農(nóng)達aggrecan、11，皚膠原mRNA，同時表達I、Ill、X、Xl型膠原ml{XA，術(shù)見lX型膠原ml{XA表達；未誘導(dǎo)ADSCs不表達aggrecan、1I，弘膠原mRNA。：維誘導(dǎo)后州植皮卜J2、4、6、8、10刪取材、切』J，實驗紺免疫組化顯小表達I、lI、IIl型膠躲；Masson’S、Alician’S染也町蛇利料內(nèi)的JJ爻』糸分泌?：』盞，仃酸佳本斯大學(xué)

6、2002級碗士學(xué)位論文性粘多糖沉積，但組織學(xué)觀察特征性的軟骨組織結(jié)構(gòu)形成不明顯：對照組未見II型膠原及酸性粘多糖沉積?！窘Y(jié)論】脂肪干細胞單層誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下，能分泌軟骨細胞特征性細胞外基質(zhì)一lI型膠原、aggrecan等，脂肪干細胞可作為軟骨組織工程種子細胞的重要來源：誘導(dǎo)后回植的細胞一脫鈣骨復(fù)合物可表達特異的軟骨基質(zhì)～II型膠原和蛋白多糖，但軟骨組織特征性結(jié)構(gòu)形成不明顯?！娟P(guān)鍵詞】：組織工程脂肪干細胞誘導(dǎo)分化軟骨細胞脫鈣骨佳本顴大學(xué)2002級碩士學(xué)位論文⑧Abstract【Objective]：Tostudyt

7、hefeasibilityofhumanAdipose-derivedStemCellsADSCsinmonolayercultureinducedintochondmcytesasseedingcellsincartilagetissueengineering；Tostudythetissueformationaftertheinducedcell-DBMcomplexesimplantedintonudemicesubcutaneously．[Methodsl：ADSCswereMoatedbycollag

8、enasedigestionfromliposuctionaspirates．a(chǎn)ndculturedforexpansioninvitro．TGF--Bl(10ng／m11anddexamethasone(1X107Hml／L)wereappliedintheculturemediumtoinducetheADSCsjofpassageonetobechondrogenicdiffer