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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)第32卷第2期2006年3月吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)JournalofJilinUniversity(MedicineEdition)V01．32No．2Mar．2006353[文章編號(hào)]t671—587X(2006)02—0353—04RP-HPLC法測(cè)定西洋參莖葉皂苷酸、堿降解物中20(S)一原人參二醇的含量Determinationof20(S)-protopanaxadiolinacidandalkalinedegradationproductsforsaponinsfromleavesofPanaxqinquefoliumL
2、．byRP—HPLC李緒文1，林燕飛2，鄭(1．吉林大學(xué)化學(xué)學(xué)院分析化學(xué)系，吉林長(zhǎng)春130021；瑩1，金永日卜，張寒琦12．海南亞洲制藥有限公司藥物研究所，海南?？?70102)[摘要]目的：利用反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測(cè)定西洋參莖葉皂苷酸、堿降解物中20(s)原人參二醇含量。方法：RP-HPLC法具體條件為：ZORBAXextendCl8柱(250mm×4．6m122，5p趣)，流動(dòng)相為甲醇一木[90：10]，流速1．2mL·rain，檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，柱溫25℃。采用以上方法分別測(cè)定西洋參莖葉皂苷鹽酸、醋酸和氫氧化鈉降解
3、物中20(S)一原人參二醇含量。結(jié)果：20(S)一原人參二醇對(duì)照品溶液的進(jìn)樣量在0．2～23“g范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，回歸系數(shù)r為0．9999(n一7)；測(cè)定西洋參莖葉皂苷的鹽酸、醋酸和氫氧化鈉降解物中20(s)一原人參二醇舍量的準(zhǔn)確度，以平均加樣回收率表示分別為98．4％、96．7％和100．2％，RSD分別為1．24％、1．08“和0．91％；測(cè)定西洋參莖葉皂苷的鹽酸、醋酸和氫氧化鈉降解物中20(s)一原人參二醇含量的精密度，以重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)考察，其RSD分別為0．65蹦、0．79蹦和0．27蹦；經(jīng)測(cè)定．醋酸、鹽酸和氫氧化鈉降解物中20(
4、s)一原人參二醇的含量分別為0．93％、0．88％和25．40％。結(jié)論：RP-HPLC法測(cè)定西洋參莖葉皂苷降解物中20(s)一原人參二醇的含量，方法簡(jiǎn)便快捷，精密度高、準(zhǔn)確度高，可為20(s)一原人參二醇的制備及質(zhì)量控翩提供可靠的檢測(cè)方法；利用堿降解方法制備20(s)一原人參二醇的效率高于酸降解方法。[關(guān)鍵詞]西洋參；莖葉皂苷；降解物}20(s)一原人參二醇；色譜法，高壓液相[中圈分類號(hào)]TQ460．7z；Q657．7[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A人參皂苷作為人參屬植物中的主要成分具有多方面的藥理活性，而一些人參二醇組皂苷的皂苷元20(S)一原人參二醇(
5、protopanaxadi01)，具有更強(qiáng)的藥理活性，尤其在抑制腫瘤方面“。30。研究表明，20(s)原人參二醇抑制腫瘤生長(zhǎng)作用比20(R)一原人參二醇強(qiáng)，在0．01g·L_1的濃度下，20(s)一原人參二醇和20(R)一原人參二醇對(duì)Morris肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率分別為94％及90％、對(duì)Lewis肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率分別為86％及79％、對(duì)Hel．a(chǎn)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率分別為63％及56％、對(duì)黑色素瘤K16的生長(zhǎng)抑制率分別為58％及52％?？梢?jiàn)20(s)型的活性大于20(R)型”]。由于西洋參莖葉皂苷中人參二醇組皂苷的含量高于人參三醇組皂苷o
6、]，因此可以利用西洋參莖葉皂苷為原料，采用酸、堿降解法制備具有天然構(gòu)型而且活性高的20(s)一原人參二醇。目前所報(bào)道的人參皂苷降解方法有酸降解、高溫高壓堿降解、酶降解““，這些方法均可用來(lái)制備皂苷元，但產(chǎn)率低，副產(chǎn)物多是存在的主要問(wèn)題。為考察酸、堿降解西洋參莖葉皂苷制備20(s)一原人參二醇的產(chǎn)率，本研究利用RP-HPLC法對(duì)西洋參莖葉皂苷酸、堿降解物中20(s)一原人參二醇的含量進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)此測(cè)定方法進(jìn)行了系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)和方法學(xué)考察，最終確立了RP—HPLC法用測(cè)定20(s)一原人參二醇含量的方法。此外，通過(guò)西洋參莖葉皂苷在不同強(qiáng)度酸和
7、堿條件下降解物中[收稿日期]200506—23[基金項(xiàng)目]95國(guó)家重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(96901一Ol一83)[作者簡(jiǎn)介]孝緒文(1966一)，男，吉林省長(zhǎng)春市人。副教授，在讀博士t主要從事藥物化學(xué)研究及新藥研制。*通訊作者(Tel：0431—5628012；E-mail；jinry@jhedu．on)萬(wàn)方數(shù)據(jù)吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)第32卷第2期2006年3月20(s)原人參二醇含量的對(duì)比，可為制備20(s)一原人參二醇含量提供一定的理論依據(jù)。1材料與方法1．1儀器與試劑Agilent1100Series高效液相色譜儀。甲醇為色譜純(天津四友
8、生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司)，水為雙蒸餾水，其他試劑均為分析純(北京化工廠)。1．2供試品1．2．1原料本實(shí)驗(yàn)所用的原料為西洋參莖葉總皂苷，購(gòu)自吉林省靖宇縣西洋參集團(tuán)華洋制藥廠，產(chǎn)品中
