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1、食品添加劑辣椒橙1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于以辣椒果皮及其制品為原料,經(jīng)萃取、過濾、濃縮、脫辣椒素等工藝制成的食品添加劑辣椒橙。食品添加劑辣椒橙為橙色或橙紅色油狀液體。2 分子式和相對分子質(zhì)量2.1 分子式辣椒紅素:C40H56O3辣椒玉紅素:C40H56O42.2 相對分子質(zhì)量辣椒紅素:584.85辣椒玉紅素:600.853 技術(shù)要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1 技術(shù)要求項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法類胡蘿卜素總量,w/%標(biāo)稱附錄A中A.3辣椒總堿/μg/mL符合聲稱附錄A中A.4辣椒紅素和辣椒玉紅素,w/%≥類胡蘿卜素總量的30%附錄A中A.5砷(以As計(jì))/(mg/kg)≤3.0
2、附錄A中A.6鉛(Pb)/(mg/kg)≤2.0附錄A中A.7總有機(jī)溶劑殘留量,w/%≤0.005附錄A中A.810附 錄 A檢驗(yàn)方法A.1 一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水,在沒有注明其他要求時(shí),均指分析純試劑和GB/T6682—2008規(guī)定的三級水。試驗(yàn)中所需標(biāo)準(zhǔn)溶液、雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品在沒有注明其他規(guī)定時(shí),均按GB/T601、GB/T602、GB/T603規(guī)定配制和標(biāo)定。A.2 鑒別試驗(yàn)A.2.1 顯色反應(yīng)在1滴試樣中加2滴~3滴三氯甲烷和1滴硫酸,溶液呈深藍(lán)色。A.2.2 最大吸收樣品溶解在丙酮中,在約462nm處有最大吸收峰。樣品溶解在正己烷中,約
3、在470nm處有最大吸收峰。A.2.3 高效液相色譜法通過測試,詳見“辣椒紅素和辣椒玉紅素含量測定”。A.3 類胡蘿卜素總量的測定A.3.1 方法提要采用分光光度計(jì)法測定辣椒橙中的類胡蘿卜素在最大吸收波長處(約462nm)吸光度值,計(jì)算其含量。A.3.2 試劑和材料丙酮。A.3.3 儀器和設(shè)備A.3.3.1 分光光度計(jì)。A.3.3.2 比色皿:10mm。A.3.4 試樣溶液的配制準(zhǔn)確稱取0.3g~0.5g(精確至0.0002g)辣椒橙加到100mL容量瓶中,加入丙酮搖動溶解,定容,靜置2min。吸取該溶液1mL加入另外一個(gè)100mL容量瓶中,丙酮定容到刻度,
4、充分搖動。A.3.5 分析步驟將辣椒橙試樣溶液置于10mm比色皿中,在最大吸收波長處(約462nm)讀取吸光度A。調(diào)整樣品濃度,使吸光度在0.3~0.7之間。10A.1.1 結(jié)果計(jì)算類胡蘿卜素總量以計(jì),數(shù)值以%表示,按式(A.1)計(jì)算:………………………(A.1)式中:A——辣椒橙試樣溶液的吸光度值;2100——辣椒紅素/辣椒玉紅素在丙酮中462nm波長處的吸光度;m——試樣質(zhì)量的數(shù)值,單位為克(g);計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后1位。A.2 辣椒總堿的測定A.2.1 方法提要采用高效液相色譜法測定辣椒總堿(降二氫辣椒堿、辣椒堿和二氫辣椒堿)的含量。A.2.2 試
5、劑和材料A.2.2.1 合成辣椒堿標(biāo)樣,純度大于99%。A.2.2.2 乙醇。A.2.2.3 丙酮。A.2.2.4 乙腈。A.2.3 儀器和設(shè)備A.2.3.1 高效液相色譜儀:帶有20μL定量環(huán)、熒光檢測器或紫外檢測器。A.2.3.2 檢測器:熒光檢測器-激發(fā)波長280nm,發(fā)射波長325nm。紫外檢測器-檢測波長280nm。A.2.3.3 色譜柱:長為150mm,內(nèi)徑為4.6mm的不銹鋼柱,固定相為C18、粒徑5μm。A.2.3.4 固相萃取小柱:C18SEP-PAK6mL。A.2.4 色譜分析條件A.2.4.1 流動相:乙腈:水溶液=40:60水溶液為1
6、%乙酸溶液(v/v)。A.2.4.2 流量:1.5mL/min。A.2.4.3 進(jìn)樣量:20μL。A.2.5 標(biāo)樣溶液的配制準(zhǔn)確稱取75mg合成辣椒堿,純度大于99%,(CASRN:102444-46-4)加入500mL容量瓶中,加乙醇溶解稀釋到刻度,搖勻,此溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液A,濃度為150μg/mL。吸取10mL標(biāo)準(zhǔn)溶液A加入到100mL容量瓶中,加乙醇溶解稀釋到刻度,搖勻,此溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液B,濃度為15μg/mL。吸取5mL標(biāo)準(zhǔn)溶液B加入到100mL容量瓶中,加乙醇溶解稀釋到刻度,搖勻,此溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液C,濃度為0.75μg/mL。A.1.1 樣品溶液的配制
7、準(zhǔn)確稱取5g辣椒橙加到50mL容量瓶中,避免樣品粘到容量瓶內(nèi)壁上。加入5mL丙酮,搖動直至樣品完全溶解。傾斜45°角觀察樣品是否粘附瓶底。緩慢加入乙醇(95%或無水乙醇)直到溶液渾濁,稀釋到刻度,混合均勻。用10mL注射器直接吸取5mL樣品溶液加入到規(guī)格為6mL固相萃取柱中,避免樣品粘附到注射器的內(nèi)壁上。樣品通過萃取柱并收集到25mL的容量瓶中。用5mL乙醇洗滌萃取柱,洗滌三次,洗滌液收集到容量瓶中。乙醇定容,經(jīng)0.45μm過濾器過濾,濾液裝入玻璃瓶中。A.1.2 分析步驟在A.4.4規(guī)定的色譜條件下,分別用微量注射器吸取試樣溶液和合適的標(biāo)準(zhǔn)溶液注入并充滿定
8、量環(huán),進(jìn)行色譜檢測,待最后一個(gè)組分流出完畢,用色譜工