絞股藍(lán)總皂苷提取工藝研究

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1、絞股藍(lán)總皂苷提取工藝研究【摘要】目的研究絞股藍(lán)總皂苷的提取工藝。方法采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法,以絞股藍(lán)總皂苷提取量為考察指標(biāo),對(duì)影響絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的因素進(jìn)行了優(yōu)選。結(jié)果提取時(shí)間、提取次數(shù)對(duì)提取效果有顯著影響,乙醇用量的影響不顯著。結(jié)論絞股藍(lán)總皂苷的最佳提取工藝為：藥材加8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2h。【關(guān)鍵詞】絞股藍(lán)總皂苷；提取工藝；正交設(shè)計(jì)Abstract：ObjectiveTostudytheextractiontechniquesoftotalsaponininGynostemma.Meth

2、odAccordingtothetotalsaponinextractingrate,theextractingtechniquesizedbyorthogonaldesign.ResultsThefactorsthatextractingtimeandextractingtimeshavesignificanteffectontotalsaponinextraction,andtheamountofalcoholsolutionhasinsignificanteffectonit.ConclusionThe

3、optimalextractingtechniquesese.　　Keymatotalsaponin；extractingtechniques；orthogonaldesign　　絞股藍(lán)(Gynostemma)為葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生蔓生草本植物,主要含有皂苷、黃酮、多糖,還含有人體必須的多種氨基酸、維生素和微量元素等成分?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,絞股藍(lán)具有抑制腫瘤、抗衰老、降低血脂、增強(qiáng)免疫力和保護(hù)心臟的作用[1]。絞股藍(lán)總皂苷片作為藥品已經(jīng)上市多年,用于高脂血癥,見有心悸氣短、胸悶肢麻、眩暈頭痛、健忘耳鳴、自汗

4、乏力或脘腹脹滿等心脾氣虛、痰阻血瘀者。為了最大限度提取并保持絞股藍(lán)的有效成分,保證絞股藍(lán)藥材資源的充分利用,提高經(jīng)濟(jì)效益,本研究用正交試驗(yàn)優(yōu)選絞股藍(lán)提取工藝?！　?儀器與試藥　　UV-2601型紫外分光光度計(jì)(島津)；人參皂苷Rb1對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所)。冰醋酸、高氯酸、甲醇、香草醛、正丁醇、石油醚等均為分析純。樣品：七葉絞股藍(lán)莖葉混合物,產(chǎn)于四川臥龍地區(qū)?！　?方法　　2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備[2]精密稱取人參皂苷Rb1對(duì)照品10mg置5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為2.0mg

5、/mL的儲(chǔ)備液。精密量取儲(chǔ)備液50、100、150、200、250μL分別置15mL具塞試管中,揮干甲醇,分別加入新配置的5%香草醛冰醋酸溶液0.4mL、高氯酸1.6mL,搖勻,密塞,置60℃水浴中加熱15min后取出,立即用冷水冷卻至室溫,分別精密加入冰醋酸10mL,搖勻,作為供試品溶液。另精密量取甲醇溶液250μL置15mL具塞試管中,按照上述操作,到加入冰醋酸10mL搖勻?yàn)橹?作為空白溶液。取供試品溶液和空白溶液,照分光光度法[《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅦA]試驗(yàn),在560nm的波長處分別測(cè)定吸

6、收度。以人參皂苷Rb1的量X(mg)對(duì)吸收度A進(jìn)行回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：A=1.2757X+0.0019,r=0.9989。結(jié)果表明,當(dāng)取樣量在0.102～0.510mg范圍內(nèi)時(shí),人參皂苷Rb1的含量與吸收度呈良好的線性關(guān)系?！　?.2絞股藍(lán)總皂苷含量測(cè)定方法　　精密稱取絞股藍(lán)總皂苷粉末20mg置5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。精密量取200μL置15mL具塞試管中,揮干甲醇后按“2.1”項(xiàng)下操作,測(cè)定吸收度,用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出絞股藍(lán)總皂苷的含量?！　?.3絞股藍(lán)總皂苷的提取工藝將干燥的絞股藍(lán)藥

7、材粉碎成粗粉,準(zhǔn)確稱量100g置圓底燒瓶中,用70%乙醇多次回流提取,合并提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后減壓干燥,干燥物用1000mL的熱水充分溶解,加入同體積的石油醚萃取3次,將水層溶液用同體積的水飽和的正丁醇反復(fù)萃取,至正丁醇層無色為止,合并正丁醇提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后減壓干燥,即得?！　?.4絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的正交設(shè)計(jì)　　根據(jù)初步試驗(yàn)結(jié)果,選用L9(34)正交試驗(yàn)表,以乙醇用量(A)、提取時(shí)間(B)、提取次數(shù)(C)為試驗(yàn)因素,每個(gè)因素取3個(gè)水平(見表1)。取樣品,按照正交設(shè)計(jì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以絞股藍(lán)總皂苷

8、的提取量為考察指標(biāo),進(jìn)行提取工藝的優(yōu)選。表1正交試驗(yàn)因素水平表（略）　　2.5絞股藍(lán)總皂苷提取工藝的穩(wěn)定性試驗(yàn)按照正交試驗(yàn)選擇的工藝條件,重復(fù)進(jìn)行絞股藍(lán)總皂苷的提取,并依法測(cè)定絞股藍(lán)總皂苷的含量,評(píng)價(jià)正交試驗(yàn)選擇的工藝條件是否穩(wěn)定?！　?結(jié)果　　3.1正交試驗(yàn)結(jié)果按表1的因素水平設(shè)計(jì),正交試驗(yàn)結(jié)果見表2,方差分析見表3。由表2中極差的直觀分析法R值可以看出,因素B的極差0.56為最大,說明它是A、B