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《欖香烯聯(lián)合三苯氧胺對乳腺癌mcf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、欖香烯聯(lián)合三苯氧胺對乳腺癌MCF作者:周小娟,鄭棋,趙小麗,馬海琳【關(guān)鍵詞】乳腺癌;三苯氧胺;欖香烯;協(xié)同作用 摘要:目的觀察欖香烯和三苯氧胺對乳腺癌細(xì)胞的抑制效應(yīng),尤其是兩者聯(lián)合應(yīng)用有無協(xié)同增效作用。方法將MCF7細(xì)胞培養(yǎng)于RPMI1640培養(yǎng)基中,置入37℃,100%濕度,5%(體積分?jǐn)?shù))的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。接種細(xì)胞并加入實驗藥物,用CCK8法檢測三苯氧胺聯(lián)合欖香烯對細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng),用酶標(biāo)儀在450nm測量每孔吸光度值,計算每組細(xì)胞抑制率。結(jié)果無毒劑量的欖香烯與治療劑量的三苯氧胺聯(lián)合應(yīng)用,吸光度均值較單
2、用三苯氧胺明顯下降,并且相應(yīng)的細(xì)胞抑制效應(yīng)較單用組明顯上升。結(jié)論無毒劑量的欖香烯能夠使三苯氧胺對乳腺癌細(xì)胞的抑制效應(yīng)顯著增強,提示欖香烯與三苯氧胺聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用?! £P(guān)鍵詞:乳腺癌;三苯氧胺;欖香烯;協(xié)同作用 Theinhibitoryeffectofelemenebinedoxifen onthebreastcancerMCF7cellline ABSTRACT:ObjectiveToexploreifelemenecansynergizetamoxifenthroughusingnoncytoto
3、xicdoseofelemeneandtamoxifeninbinationonMCF7celllineofbreastcancer.MethodsFirst,MCF7celllineeneonMCF7celllineeneandcurativedoseoftamoxifenintothetentalgroups,theabsorptivityinthetoxifenalone;accordingly,theinhibitionrateintixinggroupsincreasedobviouslyparede
4、neofinnocuousdosecanremarkablyenhancetheinhibitoryeffectoftamoxifen,enemaysynergizetheeffectoftamoxifenonbreastcancer. KEY)作為內(nèi)分泌治療一線藥物已經(jīng)廣泛應(yīng)用于乳腺癌高危婦女的預(yù)防性治療[3]以及乳腺癌雌激素受體陽性(ER+)患者的輔助內(nèi)分泌治療[4]。然而同類抗雌激素藥物對于TAM治療失敗者卻效果甚微;第3代芳香化酶抑制劑作為絕經(jīng)后TAM治療失敗后的二線藥物,雖具有高效、選擇性、毒副作用
5、少等特點,但僅對絕經(jīng)后患者有效,且價格較TAM高。TAM作為乳腺癌患者內(nèi)分泌治療的首選藥物,長期應(yīng)用有可能增加子宮內(nèi)膜癌的危險性[56]。還會產(chǎn)生繼發(fā)耐藥或腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,均影響其臨床療效。本研究采用中藥莪術(shù)提取物欖香烯(elemene,ELE)和TAM聯(lián)合應(yīng)用于乳腺癌MCF7細(xì)胞系,探索ELE對TAM有無協(xié)同增效作用,從而為ELE參與乳腺癌的輔助治療,提高內(nèi)分泌藥物的療效開辟新的思路?! ?材料與方法 1.1主要試劑乳腺癌MCF7細(xì)胞株,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系提供;RPMI1640培養(yǎng)基和胰蛋白酶,
6、購自美國Gibco公司;胎牛血清(FBS)購自(中國)鼎國公司;胰島素、EDTA和三苯氧胺(TAM)系美國Sigma公司產(chǎn)品;CCK8試劑由同仁化學(xué)研究所中國(上海)代辦處提供;欖香烯(ELE)4℃冰箱保存,系中國大連金港制藥有限公司產(chǎn)品?! ?.2常用工作液的配制①磷酸緩沖液(PBS)的配制:稱取KCl0.2g,KH2PO40.2g,NaCl8.0g,Na2HPO4・12H2O2.89g,混合溶解于1000mL的雙蒸水中,并調(diào)定pH7.2-7.4。②消化液的配制:胰蛋白酶粉末0.25g,EDTA
7、0.04g,加入PBS液100mL并用磁力攪拌器使其完全溶解,0.22μm微孔濾膜過濾除菌,分裝,于-20℃保存。 1.3細(xì)胞培養(yǎng)將MCF7細(xì)胞培養(yǎng)于含100mL/L胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中,37℃,100%濕度,5%(體積分?jǐn)?shù))的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。 1.4CCK8法檢測三苯氧胺聯(lián)合欖香烯對細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)將細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h。以8孔為一組分別加入4個不同濃度的TAM(T2-T5,即1.50×10-5、1.50×10-6、1.50×10-7、1.50×10-8mol/L)和4個不同
8、濃度的ELE(E1-E4,即6.15×10-1、6.15×10-2、6.15×10-3、6.15×10-4g/L)溶液,最后加入2種不同濃度的混合液,在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。然后每孔加入10μLCCK8液,培養(yǎng)4h,用酶標(biāo)儀在450nm測量每孔吸光度值,計算每組細(xì)胞抑制率?! ?.5數(shù)據(jù)分析用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件進行方差分析,采用LSD及Dunt法兩兩比較進行描述性統(tǒng)計,方差齊性