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《欖香烯聯(lián)合生物大分子合成抑制劑對hca》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、欖香烯聯(lián)合生物大分子合成抑制劑對Hca作者:郭連英，陳駿，沈潔，邢嶸1，施廣霞，錢振超【摘要】目的本實(shí)驗(yàn)采用欖香烯與生物大分子合成抑制劑聯(lián)合處理小鼠肝癌細(xì)胞Hca-F，觀察腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡和形態(tài)學(xué)的變化，探討抑制/干擾腫瘤細(xì)胞的DNA、RNA或蛋白質(zhì)合成對欖香烯抗瘤作用的影響，以期為判斷欖香烯作用的可能靶點(diǎn)提供線索與依據(jù)。方法將Hca-F肝癌細(xì)胞用欖香烯（50μg/ml）、吡柔比星（THP）（10μmol/ml）、單獨(dú)和復(fù)合處理，設(shè)單獨(dú)瘤細(xì)胞（不處理）為陰性對照。Hca-F細(xì)胞濃度均為1×106/ml，每個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)均設(shè)3支復(fù)管，用臺盼藍(lán)拒染法計(jì)算細(xì)胞存活率，在透射電鏡下觀察欖香烯與TH
2、P聯(lián)合處理對腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響，用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期。結(jié)果欖香烯聯(lián)合吡柔比星處理Hca-F比單獨(dú)使用兩種藥物的抑瘤率都高。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)所用生物大分子合成抑制劑不能阻斷欖香烯的抗瘤作用，提示欖香烯抗腫瘤作用對新的蛋白質(zhì)表達(dá)依賴性較低。結(jié)合欖香烯處理后瘤細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化，提示欖香烯可能作用于腫瘤細(xì)胞膜或細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)（如酶）等而直接殺傷腫瘤靶細(xì)胞，使對欖香烯抗瘤作用靶點(diǎn)的認(rèn)識又進(jìn)了一步。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明欖香烯和THP合用可使抗癌作用增強(qiáng)，這對欖香烯聯(lián)合其他藥物治療腫瘤可能有一定參考意義。【關(guān)鍵詞】欖香烯；抑制劑；肝細(xì)胞癌Theeffectofelemenebinedacrom
3、olecularsynthesisforhepaticcancer【Abstract】ObjectiveInthisexperimentofHca-Fcells(amurinehepaticcellcarcinoma)enebinedacromolecularsynthesis，thEirproliferation，survival，cellcycle，apoptosisandmorphologyoreffectsofelemeneandtofindthepossibletargetsiteofelemene.MethodsTheHca-Fcellsingledtreatedene（50μ
4、g/ml），aloneorbinedol/ml），theHca-Fcells(ent)l，threetublesineverytimepoint.TocalculatetheproportionofsurvivalpactontheultrastructureofHca-FcellstreatedeneandTHPintransmissionelectronmicroscope，andexaminetheapoptosisandcellcyclesinfloeter.ResultsTheinhibitionrateofproliferationofHca-FtreatedeneandTHP
5、eneonly.ConclusionTheseresultsshooreffectsofelemenecouldnotabolishedbybinedtreatmentorpretreatmentoreffectsofelemenemaybeindependentontheirsynthesis.binedusageofelemeneene；inhibitor；hepatocellularcarcinoma欖香烯(elemene)是從中藥溫莪術(shù)（經(jīng)鑒定為我國特有新種定名為溫郁金，CurcumaI1640培養(yǎng)基（GIBCO，USA）。1.4Hca-F細(xì)胞懸液的制備將傳代保種的Hca-F腹水型
6、肝癌細(xì)胞常規(guī)接種于小鼠腹腔，0.2ml/只，收集第7～8天的腹水（腫瘤細(xì)胞生長最旺盛時(shí)期，死亡細(xì)胞和紅細(xì)胞含量較少），HS液破除紅細(xì)胞，PBS洗3次，計(jì)活細(xì)胞數(shù)，用含20%小牛血清RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)細(xì)胞數(shù)至所需濃度。1.5Hca-F肝癌細(xì)胞的處理將Hca-F肝癌細(xì)胞用欖香烯（50μg/ml）、吡柔比星（10μmol/ml）按本室常規(guī)方法單獨(dú)或復(fù)合處理，設(shè)單獨(dú)瘤細(xì)胞（不處理）對照。Hca-F細(xì)胞濃度均為1×106/ml，每個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)均設(shè)3支復(fù)管，加入相應(yīng)的藥品，以臺盼藍(lán)拒染法于不同時(shí)間計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，計(jì)算存活率。1.6單純欖香烯處理和欖香烯聯(lián)合THP處理對Hca-F增殖的影響用MTT法
7、測其OD值。1.7欖香烯聯(lián)合THP處理對瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響［3］Hca-F細(xì)胞用欖香烯、THP單一或復(fù)合處理，細(xì)胞濃度和處理方法同前，處理時(shí)間為1h，收細(xì)胞，用PBS洗3次，以2.5%戊二醛固定，常規(guī)包埋制片，鈾—鉛雙染色，透射電鏡下觀察攝片。1.8細(xì)胞凋亡的檢測和細(xì)胞周期的測定細(xì)胞收集同前，用PBS洗3次，加入PI染色液染色30min（避光、室溫）。上機(jī)檢測，Cellquest軟件低速獲取。用Modfit2.0軟件分
