欖香烯聯(lián)合三苯氧胺對(duì)乳腺癌MCF.doc

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1、欖香烯聯(lián)合三苯氧胺對(duì)乳腺癌MCF作者:周小娟,鄭棋,趙小麗,馬海琳【關(guān)鍵詞】乳腺癌;三苯氧胺;欖香烯;協(xié)同作用  摘要:目的觀察欖香烯和三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞的抑制效應(yīng),尤其是兩者聯(lián)合應(yīng)用有無(wú)協(xié)同增效作用。方法將MCF7細(xì)胞培養(yǎng)于RPMI1640培養(yǎng)基中,置入37℃,100%濕度,5%(體積分?jǐn)?shù))的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。接種細(xì)胞并加入實(shí)驗(yàn)藥物,用CCK8法檢測(cè)三苯氧胺聯(lián)合欖香烯對(duì)細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng),用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)量每孔吸光度值,計(jì)算每組細(xì)胞抑制率。結(jié)果無(wú)毒劑量的欖香烯與治療劑量的三苯氧胺聯(lián)合應(yīng)用,吸光度均值較單用三苯氧胺明顯下降,并且相應(yīng)的細(xì)胞抑

2、制效應(yīng)較單用組明顯上升。結(jié)論無(wú)毒劑量的欖香烯能夠使三苯氧胺對(duì)乳腺癌細(xì)胞的抑制效應(yīng)顯著增強(qiáng),提示欖香烯與三苯氧胺聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用?! £P(guān)鍵詞:乳腺癌;三苯氧胺;欖香烯;協(xié)同作用  Theinhibitoryeffectofelemenecombinedwithtamoxifen onthebreastcancerMCF7cellline  ABSTRACT:ObjectiveToexploreifelemenecansynergizetamoxifenthroughusingnoncytotoxicdoseofelemeneandtamoxif

3、enincombinationonMCF7celllineofbreastcancer.MethodsFirst,MCF7celllinewasculturedinRPMI1640.Then,TAMsinhibitoryeffectunitedwithelemeneonMCF7celllinewasanalyzedbyusingCCK8test.ResultsWhenaddingnoncytotoxicdoseofelemeneandcurativedoseoftamoxifenintothetwoexperimentalgroups,theab

4、sorptivityinthetwogroupsreducednotably,comparedwiththatofthegroupsusingtamoxifenalone;accordingly,theinhibitionrateintwomixinggroupsincreasedobviouslycomparedwiththatinsingledruggroups.ConclusionElemeneofinnocuousdosecanremarkablyenhancetheinhibitoryeffectoftamoxifen,whichind

5、icatesthatelemenemaysynergizetheeffectoftamoxifenonbreastcancer.  KEYWORDS:breastcancer;tamoxifen;elemene;synergisticeffect  乳腺癌是婦女中最常見(jiàn)的惡性腫瘤。它是一種全身性疾病,全身輔助治療可降低復(fù)發(fā)和死亡的風(fēng)險(xiǎn)[1]。乳腺癌內(nèi)分泌治療作為全身治療的方法之一,在乳腺癌術(shù)后預(yù)防復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移后的治療具有十分重要的作用[2]。三苯氧胺(tamoxifen,6TAM)作為內(nèi)分泌治療一線藥物已經(jīng)廣泛應(yīng)用于乳腺癌高危婦女的預(yù)防性治療[3]

6、以及乳腺癌雌激素受體陽(yáng)性(ER+)患者的輔助內(nèi)分泌治療[4]。然而同類抗雌激素藥物對(duì)于TAM治療失敗者卻效果甚微;第3代芳香化酶抑制劑作為絕經(jīng)后TAM治療失敗后的二線藥物,雖具有高效、選擇性、毒副作用少等特點(diǎn),但僅對(duì)絕經(jīng)后患者有效,且價(jià)格較TAM高。TAM作為乳腺癌患者內(nèi)分泌治療的首選藥物,長(zhǎng)期應(yīng)用有可能增加子宮內(nèi)膜癌的危險(xiǎn)性[56]。還會(huì)產(chǎn)生繼發(fā)耐藥或腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,均影響其臨床療效。本研究采用中藥莪術(shù)提取物欖香烯(elemene,ELE)和TAM聯(lián)合應(yīng)用于乳腺癌MCF7細(xì)胞系,探索ELE對(duì)TAM有無(wú)協(xié)同增效作用,從而為ELE參與乳腺癌的輔助

7、治療,提高內(nèi)分泌藥物的療效開(kāi)辟新的思路?! ?材料與方法  1.1主要試劑乳腺癌MCF7細(xì)胞株,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系提供;RPMI1640培養(yǎng)基和胰蛋白酶,購(gòu)自美國(guó)Gibco公司;胎牛血清(FBS)購(gòu)自(中國(guó))鼎國(guó)公司;胰島素、EDTA和三苯氧胺(TAM)系美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品;CCK8試劑由同仁化學(xué)研究所中國(guó)(上海)代辦處提供;欖香烯(ELE)4℃冰箱保存,系中國(guó)大連金港制藥有限公司產(chǎn)品。  1.2常用工作液的配制①磷酸緩沖液(PBS)的配制:稱取KCl0.2g,KH2PO40.2g,NaCl8.0g,Na2HPO4・1

8、2H2O2.89g,混合溶解于1000mL的雙蒸水中,并調(diào)定pH7.2-7.4。②消化液的配制:胰蛋白酶粉末0.25g,EDTA0.04

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