探討楮實提取物的體外抗氧化活性論文

探討楮實提取物的體外抗氧化活性論文

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1、探討楮實提取物的體外抗氧化活性論文摘要:目的探討楮實提取物的體外抗氧化活性。方法先用80%乙醇,然后用蒸餾水對楮實進行提取。其中醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,水提部分經(jīng)醇沉、干燥后得到楮實粗多糖。運用羥基(·OH)自由基體系、二苯代苦味基肼(DPPH·)自由基體系和對Fe3的還原能力實驗,比較楮實各提取物的抗氧化活性。結(jié)果楮實提取物對·OH自由基和DPPH·自由基均有較好的清除作用,其中總醇提取物對·OH自由基的清除能力最強,其IC50值為0.28mg/ml;乙酸乙酯提取物對DPPH·自由基的清除效果最好,其IC50值達(dá)到0.08mg/ml;各提取物對Fe3均有較強的還

2、原能力,乙酸乙酯提取物還原效果最為明顯。結(jié)論楮實提取物具有一定的抗氧化活性,在抗衰老方面有廣泛的應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞:楮實;抗氧化活性;清除自由基;還原力  楮實子具有活血理氣、補腎清肝、明目、利尿的功效,多用于腰膝酸軟、虛勞骨蒸、頭暈?zāi)垦?、目生翳膜、水腫脹滿等癥〔1,2〕。一些含楮實子的經(jīng)典方藥經(jīng)多年臨床驗證具有確切的抗衰老、促智作用〔3〕。機體內(nèi)氧化自由基增加是導(dǎo)致衰老的主要原因,清除自由基可起到延年益壽的作用〔4〕。近年來研究發(fā)現(xiàn)楮實子油及楮實子黃酮成分有顯著的抗氧化和清除及抑制氧自由基作用〔5〕;楮實子紅色素能顯著清除超氧陰離子及羥基(·OH)自由基,抑制H2O2誘導(dǎo)小鼠紅細(xì)胞溶血和肝

3、勻漿自氧化,對肝線粒體也有保護作用〔6〕。但目前還未見到對楮實聚花果進行抗氧化活性評價的報道。本實驗運用水楊酸法、二苯代苦味基肼自由基(DPPH·)法、Fe3還原能力的方法對楮實不同極性溶劑提取物體外抗氧化能力進行評價,為楮實更廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥和開發(fā)新型保健品提供理論依據(jù)?! ?材料與方法  1.4.2清除DPPH·自由基〔8〕  DPPH·自由基是一種穩(wěn)定的自由基,在有機溶劑中呈紫色,在517nm波長有較大吸收,當(dāng)加入抗氧化劑一部分自由基被清除,使得在該波長下吸收減弱,可借此來評價物質(zhì)的抗氧化活性。取各萃取物50mg,用無水乙醇溶解并定容至25ml;取粗多糖50mg,用蒸餾水溶解并定容至

4、25ml,配制得2mg/ml的各樣品質(zhì)量濃度,再以該質(zhì)量濃度配制成所需濃度;以無水乙醇配制0.16mmol/LDPPH·溶液,避光保存。取3ml待測樣品溶液加入3mlDPPH·溶液于25℃水浴中加熱15min,在517nm測得試樣吸光度(Ai)。取3ml蒸餾水代替樣品測得空白吸光度(A0)。向3ml樣品中加入3ml蒸餾水測得樣品本底吸光度(Aj),每個質(zhì)量濃度樣品做3個平行,取平均值。以Vc作陽性對照,按下式計算清除率:K(%)=〔A0-(Ai-Aj)〕/A0×100。  1.4.3Fe3還原能力測定〔9〕  取2.5ml不同質(zhì)量濃度的樣品乙醇溶液,加入0.2mol/L磷酸緩沖液2.5ml

5、及1%鐵氰化鉀2.5ml,50℃水浴反應(yīng)20min后急速冷卻,加入10%三氟乙酸溶液2.5ml混勻,4000r/min離心10min,取上清液5ml,加入4ml蒸餾水及0.1%FeCl31ml,10min后于700nm處測定吸光值。以Vc作為陽性對照。2結(jié)果  2.1對·OH自由基的清除作用  由圖1可以看出,大部分提取物對·OH自由基都表現(xiàn)出一定程度的清除能力,并在實驗濃度范圍內(nèi)呈明顯的量效關(guān)系,但各部分提取物的清除能力都弱于Vc。清除能力大小依次為總醇提取物>氯仿提取物>正丁醇提取物>粗多糖>水層>乙酸乙酯提取物??紤]到樣品本底吸收的影響,本實驗樣品最高濃度為1mg/ml,未測定更高濃

6、度樣品的清除作用。石油醚提取部分效果不明顯,故未對其進行比較分析。楮實提取物對·OH自由基清除活性的半清除率濃度(IC50,mg/ml)值順序為:Vc(0.06)<總醇提取物(0.28)<氯仿提取物(0.31)<正丁醇提取物(0.41)<粗多糖(0.74)<水層部分(1.01)<乙酸乙酯提取物(12.44)。半清除率濃度與清除能力大小成負(fù)相關(guān),即半清除率濃度越小則清除能力越強,除乙酸乙酯提取物外,醇提物的各提取部分的半清除率濃度隨著提取溶劑極性增大而

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