楮實(shí)提取物體外抗氧化活性的研究

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1、楮實(shí)提取物體外抗氧化活性的研究作者：吳蘭芳張振東景永帥楊娟【摘要】目的探討楮實(shí)提取物的體外抗氧化活性。方法先用80%乙醇，然后用蒸餾水對(duì)楮實(shí)進(jìn)行提取。其中醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，水提部分經(jīng)醇沉、干燥后得到楮實(shí)粗多糖。運(yùn)用羥基（·OH）自由基體系、二苯代苦味基肼（DPPH·）自由基體系和對(duì)Fe3+的還原能力實(shí)驗(yàn)，比較楮實(shí)各提取物的抗氧化活性。結(jié)果楮實(shí)提取物對(duì)·OH自由基和DPPH·自由基均有較好的清除作用，其中總醇提取物對(duì)·OH自由基的清除能力最強(qiáng)，其IC50值為0.28mg/ml；乙酸乙酯提取物對(duì)DPPH·自由基的清除效果最好，其IC5

2、0值達(dá)到0.08mg/ml；各提取物對(duì)Fe3+均有較強(qiáng)的還原能力，乙酸乙酯提取物還原效果最為明顯。結(jié)論楮實(shí)提取物具有一定的抗氧化活性，在抗衰老方面有廣泛的應(yīng)用前景。【關(guān)鍵詞】楮實(shí)；抗氧化活性；清除自由基；還原力【Abstract】ObjectiveTostudytheantioxidantactivitiesofextractsfromBroussoiapapyriferainvitro.MethodsB.papyriferaether,chloroform,ethylacetate,nbutanol.Atthesametime,crudepolysaccha

3、ride.ResultsTheextractsfromB.papyriferahadgoodscavengingeffectonthehydroxylfreeradicalandDPPHfreeradical.Ethanolextracthadthebestscavengingeffectonhydroxylfreeradicalsystem,g/ml.EthylacetateextactshadthebestscavengingeffectonDPPHfreeradical,g/ml.Alloftheextractshadstrongdeoxidization

4、abilityofFe3+.Amongofthem,ethylacetateextractshadsignificantdeoxidizationability.ConclusionsBroussoiapapyriferahasstrongerantioxidantactivitiesand處有最大吸收。取各萃取物50mg，用無(wú)水乙醇溶解并定容至25ml；取粗多糖50mg用蒸餾水溶解，定容至25ml，配制得2mg/ml的各樣品質(zhì)量濃度，再以該質(zhì)量濃度配制成所需濃度。依次加入樣品4ml，9mmol/LFeSO40.5ml，9mmol/L水楊酸0.5ml，8.8mm

5、ol/LH2O20.5ml。該體系于37℃水浴中加熱30min，于510nm處測(cè)定樣品吸光度（Ai）。用4ml蒸餾水代替體系中的樣品，測(cè)定得空白吸光度（A0）。向體系中加入蒸餾水0.5ml代替8.8mmol/LH2O2，測(cè)定樣品本底吸光度（Aj）。每個(gè)質(zhì)量濃度樣品做3個(gè)平行，取其平均值，以Vc作陽(yáng)性對(duì)照，按下式計(jì)算清除率：K(%)=〔A0-(Ai-Aj)〕/A0×100?！　?.4.2清除DPPH·自由基〔8〕　　DPPH·自由基是一種穩(wěn)定的自由基，在有機(jī)溶劑中呈紫色，在517nm波長(zhǎng)有較大吸收，當(dāng)加入抗氧化劑一部分自由基被清除，使得在該波長(zhǎng)下吸收減弱，可借此來(lái)

6、評(píng)價(jià)物質(zhì)的抗氧化活性。取各萃取物50mg，用無(wú)水乙醇溶解并定容至25ml；取粗多糖50mg，用蒸餾水溶解并定容至25ml，配制得2mg/ml的各樣品質(zhì)量濃度，再以該質(zhì)量濃度配制成所需濃度；以無(wú)水乙醇配制0.16mmol/LDPPH·溶液，避光保存。取3ml待測(cè)樣品溶液加入3mlDPPH·溶液于25℃水浴中加熱15min，在517nm測(cè)得試樣吸光度（Ai）。取3ml蒸餾水代替樣品測(cè)得空白吸光度（A0）。向3ml樣品中加入3ml蒸餾水測(cè)得樣品本底吸光度（Aj），每個(gè)質(zhì)量濃度樣品做3個(gè)平行，取平均值。以Vc作陽(yáng)性對(duì)照，按下式計(jì)算清除率：K(%)=〔A0-(Ai-Aj)

7、〕/A0×100?！　?.4.3Fe3+還原能力測(cè)定〔9〕　　取2.5ml不同質(zhì)量濃度的樣品乙醇溶液，加入0.2mol/L磷酸緩沖液2.5ml及1%鐵氰化鉀2.5ml，50℃水浴反應(yīng)20min后急速冷卻，加入10%三氟乙酸溶液2.5ml混勻，4000r/min離心10min，取上清液5ml，加入4ml蒸餾水及0.1%FeCl31ml，10min后于700nm處測(cè)定吸光值。以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照?！　?結(jié)果　　2.1對(duì)·OH自由基的清除作用　　由圖1可以看出，大部分提取物對(duì)·OH自由基都表現(xiàn)出一定程度的清除能力，并在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)呈明顯的量效關(guān)系，但各部分提取物的清除

8、能力都弱于Vc。清除能力