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1、楮實(shí)提取物體外抗氧化活性的研究吳蘭芳張振東景永帥楊娟【摘要】目的探討楮實(shí)提取物的體外抗氧化活性。方法先用80%乙醇,然后用蒸餾水對楮實(shí)進(jìn)行提取。其中醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,水提部分經(jīng)醇沉、干燥后得到楮實(shí)粗多糖。運(yùn)用羥基(·OH)自由基體系、二苯代苦味基肼(DPPH·)自由基體系和對Fe3+的還原能力實(shí)驗(yàn),比較楮實(shí)各提取物的抗氧化活性。結(jié)果楮實(shí)提取物對·OH自由基和DPPH·自由基均有較好的清除作用,其中總醇提取物對·OH自由基的清除能力最強(qiáng),其IC50值為0.28mg/ml;乙酸乙酯提取物對DPPH·自由基的清除效果最
2、好,其IC50值達(dá)到0.08mg/ml;各提取物對Fe3+均有較強(qiáng)的還原能力,乙酸乙酯提取物還原效果最為明顯。結(jié)論楮實(shí)提取物具有一定的抗氧化活性,在抗衰老方面有廣泛的應(yīng)用前景。【關(guān)鍵詞】楮實(shí);抗氧化活性;清除自由基;還原力【Abstract】ObjectiveTostudytheantioxidantactivitiesofextractsfromBroussoiapapyriferainvitro.MethodsB.papyriferaether,chloroform,ethylacetate,nbutanol.Atthesametime,
3、crudepolysaccharide.ResultsTheextractsfromB.papyriferahadgoodscavengingeffectonthehydroxylfreeradicalandDPPHfreeradical.Ethanolextracthadthebestscavengingeffectonhydroxylfreeradicalsystem,g/ml.EthylacetateextactshadthebestscavengingeffectonDPPHfreeradical,g/ml.Alloftheextrac
4、tshadstrongdeoxidizationabilityofFe3+.Amongofthem,ethylacetateextractshadsignificantdeoxidizationability.ConclusionsBroussoiapapyriferahasstrongerantioxidantactivitiesand處有最大吸收。取各萃取物50mg,用無水乙醇溶解并定容至25ml;取粗多糖50mg用蒸餾水溶解,定容至25ml,配制得2mg/ml的各樣品質(zhì)量濃度,再以該質(zhì)量濃度配制成所需濃度。依次加入樣品4ml,9mmol/
5、LFeSO40.5ml,9mmol/L水楊酸0.5ml,8.8mmol/LH2O20.5ml。該體系于37℃水浴中加熱30min,于510nm處測定樣品吸光度(Ai)。用4ml蒸餾水代替體系中的樣品,測定得空白吸光度(A0)。向體系中加入蒸餾水0.5ml代替8.8mmol/LH2O2,測定樣品本底吸光度(Aj)。每個(gè)質(zhì)量濃度樣品做3個(gè)平行,取其平均值,以Vc作陽性對照,按下式計(jì)算清除率:K(%)=〔A0-(Ai-Aj)〕/A0×100?! ?.4.2清除DPPH·自由基〔8〕 DPPH·自由基是一種穩(wěn)定的自由基,在有機(jī)溶劑中呈紫色,在517n
6、m波長有較大吸收,當(dāng)加入抗氧化劑一部分自由基被清除,使得在該波長下吸收減弱,可借此來評價(jià)物質(zhì)的抗氧化活性。取各萃取物50mg,用無水乙醇溶解并定容至25ml;取粗多糖50mg,用蒸餾水溶解并定容至25ml,配制得2mg/ml的各樣品質(zhì)量濃度,再以該質(zhì)量濃度配制成所需濃度;以無水乙醇配制0.16mmol/LDPPH·溶液,避光保存。取3ml待測樣品溶液加入3mlDPPH·溶液于25℃水浴中加熱15min,在517nm測得試樣吸光度(Ai)。取3ml蒸餾水代替樣品測得空白吸光度(A0)。向3ml樣品中加入3ml蒸餾水測得樣品本底吸光度(Aj),每個(gè)
7、質(zhì)量濃度樣品做3個(gè)平行,取平均值。以Vc作陽性對照,按下式計(jì)算清除率:K(%)=〔A0-(Ai-Aj)〕/A0×100。 1.4.3Fe3+還原能力測定〔9〕 取2.5ml不同質(zhì)量濃度的樣品乙醇溶液,加入0.2mol/L磷酸緩沖液2.5ml及1%鐵氰化鉀2.5ml,50℃水浴反應(yīng)20min后急速冷卻,加入10%三氟乙酸溶液2.5ml混勻,4000r/min離心10min,取上清液5ml,加入4ml蒸餾水及0.1%FeCl31ml,10min后于700nm處測定吸光值。以Vc作為陽性對照?! ?結(jié)果 2.1對·OH自由基的清除作用 由圖1
8、可以看出,大部分提取物對·OH自由基都表現(xiàn)出一定程度的清除能力,并在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)呈明顯的量效關(guān)系,但各部分提取物的清除能力都弱于Vc。清除能力大小依