資源描述:
《超聲波提取連翹葉總黃酮與總酚酸的實驗研究論文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、超聲波提取連翹葉總黃酮與總酚酸的實驗研究論文田粟唐龍妹許麗琴丁月新劉汝俊馬莉薛鵬【摘要】目的確定實驗室超聲波提取連翹葉總黃酮、總酚酸的最佳處理條件。方法采用正交設計法對甲醇濃度(A)、超聲時間(B)、提取次數(shù)(C)和提取溫度(D)4個因素進行考察,確定最優(yōu)超聲提取條件。結果因素D和C對測定指標均有顯著性影響,因素A、B為不顯著因素。結論以60%甲醇,超聲時間10min/次,提取3次,提取溫度45℃為最佳超聲提取條件?!娟P鍵詞】連翹葉;總黃酮;總酚酸;正交實驗;超聲提取Abstract:ObjectiveToascertai
2、ntheoptimalultrasonicconditionforextractionoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidsfromForsythiasuspenseleavesbyorthogonaldesign.MethodsInthemethodoforthogonaltest,methanolconcentration(60%,70%,and80%),ultrasonictime(10min,15minand20min),extractiontimes(1,2,and3)and
3、extractiontemperature(5℃,25℃,and45℃)peratureandextractiontimeshadsignificanteffectoneithertotalflavonoidsandtotalphenolicacidscontents,methanolconcentrationandultrasonictimeethanolandthreetimes(10mineachtime)at45℃alconditionforextractionoftotalflavonoidsandtotalph
4、enolicacidsfromForsythiasuspenseleaves.Keyg,置10ml量瓶中,加甲醇溶解定容,搖勻,得濃度為2mg/ml的蘆丁標準溶液。精確移取蘆丁的標準品溶液0.05,0.10,0.15,0.20,0.25,0.30ml分別置于10ml量瓶中,用甲醇補足1ml。加入蒸餾水4ml,混合放置5min后,加5%亞硝酸鈉溶液0.3ml和10%氯化鋁溶液0.3ml,搖勻,放置6min,加1mol/L氫氧化鈉溶液2ml后,.freell,充分混合。510nm處測定吸光度,以吸光度A(Y)與濃度C(X)進行
5、直線回歸,得回歸方程為Y=1.0963X+0.0677,r=0.9999。在0.01~0.06mg/ml線性關系良好。2.1.2樣品溶液測定精密取適當量的以下所得各樣品原液置于10ml量瓶中,用甲醇補足1ml,搖勻,作為供試品溶液。按標準曲線制備項下操作,測定總黃酮含量。2.2總酚酸含量測定方法2.2.1標準曲線的制備精密稱取沒食子酸對照品18.8mg,置100ml量瓶中,加甲醇溶解定容,搖勻,得濃度為1mmol/L的沒食子酸標準溶液。精確移取沒食子酸的標準品溶液0.015,0.030,0.045,0.060,0.075,
6、0.090ml分別置于3ml離心管中,用甲醇補足0.5ml。加入Folin-Ciocalteu試劑1ml,混合放置3min,加7.5%碳酸鈉溶液1ml,搖勻,放置90min,10000r/min離心10min,750nm處測定吸光度,以吸光度A(Y)與濃度C(X)進行直線回歸,得回歸方程為Y=16.229X+0.07,r=0.9999。在1.1×103~6.8×103mg/ml內線性關系良好。2.2.2樣品溶液測定精密取適當量的以下各樣品原液置于3ml離心管中,用甲醇補足0.5ml,搖勻,作為供試品溶液。按標準曲線制備項下
7、操作,測定總酚酸含量。2.3提取溶液的選擇精密稱取連翹葉粉末0.50g,18份,置于50ml離心管中,分別加入5ml石油醚進行脫色脫脂處理,3000r/min離心,棄去醚液,重復進行兩次后,將濾渣中的石油醚揮發(fā)干燥。分別加10ml沸水、甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、正己烷分3次超聲提取,20min/次,3000r/min離心,收集上清液減壓濃縮至干。殘渣用適量甲醇溶解,轉移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,作為樣品原液置于-18℃冰箱保存。稀釋至適當濃度后,用于測定總黃酮、總酚酸含量。結果見表1。表1不同提取溶劑提取總黃
8、酮、總酚酸含量的測定結果(略)從不同提取溶劑提取總黃酮、總酚酸含量的測定結果來看,甲醇提取物的總黃酮、總酚酸含量最高,說明甲醇提取連翹葉多酚成分的效果最好,故本研究選擇甲醇作為提取溶劑。2.4超聲提取條件的確定2.4.1正交實驗設計選用L9(34)正交表,每次實驗重復3次,考察甲醇濃度(A)、超聲時間(