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《抑癌基因pten在上皮性卵巢癌中的表達及其與upa、mmp》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、抑癌基因PTEN在上皮性卵巢癌中的表達及其與uPA、MMP作者：徐京晶 朱潤慶 李銘 趙恒敏【關鍵詞】卵巢癌；免疫組織化學；原位分子雜交； 摘要：為探討抑癌基因PTEN表達在卵巢癌發(fā)生和演進中的作用及其與uPA、MMP2的相互關系，對8例正常上皮來源的卵巢組織、18例卵巢交界性腫瘤、60例上皮性卵巢癌石蠟切片組織，應用免疫組織化學SP法檢測PTEN蛋白、MMP2蛋白的表達，分子原位雜交法檢測uPA蛋白的表達。結果顯示，PTEN在正常卵巢、卵巢交界性腫瘤、上皮性卵巢癌中的陽性表達率分別為87.50%（7/8）、50.00%（9/18）、23.3
2、3%（14/60），PTEN的陽性表達率在上皮性卵巢癌中低于正常卵巢、卵巢交界性腫瘤，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01,P<0.05)；I/II期陽性表達率37.50%明顯高于III/IV期的13.89%（P<0.05）；卵巢內膜樣癌PTEN陽性表達率7.14%，顯著低于漿液樣34.78%或黏液樣囊腺癌44.44%（P<0.05）。PTEN表達與uPA表達呈負相關（P<0.05），與MMP2表達呈負相關（P<0.01）。關鍵詞：卵巢癌；免疫組織化學；原位分子雜交； PTEN腫瘤的發(fā)生與多種癌基因及抑癌基因的異
3、常激活、表達有關，腫瘤的侵襲和轉移是一多步驟、多因素參與的極其復雜的過程，涉及腫瘤細胞的黏附、分離、遷移，基底膜及細胞外基質的降解，腫瘤新生血管生成的諸多方面。PTEN是迄今為止發(fā)現(xiàn)的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因，在生長因子的細胞信號傳遞中起著復雜而重要的作用，通過抑制細胞有絲分裂、誘導細胞凋亡、參與調節(jié)細胞的黏附、轉移和分化等發(fā)揮抑癌基因的作用。尿激酶型纖維蛋白激活系統(tǒng)（uPA）通過水解纖溶酶原轉變?yōu)槔w溶酶降解細胞外基質進而使腫瘤不斷浸潤和擴散。金屬基質蛋白酶(MMPs)是降解細胞外基質組分時最重要的一大分子蛋白。我們應用免疫組化、分子原位
4、雜交技術檢測正常卵巢、卵巢交界性腫瘤和上皮性卵巢癌中PTEN、uPA、MMPs的表達，探討其在卵巢癌發(fā)生及演進中的作用及其在卵巢癌預后評估中的意義。1材料和方法11標本來源研究標本86例取自武漢市第八醫(yī)院1999年~2005年病理存檔的石蠟標本，所有手術患者術前均未接受過放療、化療或激素治療，診斷均經(jīng)常規(guī)病理切片證實。患者年齡32~65歲，中位年齡48歲。正常上皮來源的卵巢組織8例，卵巢交界性腫瘤18例，上皮性卵巢癌60例（其中漿液性囊腺癌23例，黏液性囊腺癌9例，卵巢內膜樣癌28例；高~中分化卵巢癌25例，中~低分化卵巢癌35例；按FIGO分
5、級，I/II期24例，III/IV期36例；卵巢癌伴淋巴結轉移15例，無淋巴結轉移45例）。12實驗試劑鼠抗人PTEN單克隆抗體、尿激酶型纖溶酶型活化因子即用型原位雜交試劑盒、鼠抗人MMP2單克隆抗體、SP試劑盒、DAB顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術開發(fā)公司。13方法石蠟塊標本制成4μm厚的切片，免疫組織化學染色程序按SP試劑盒說明進行，PBS代替一抗作陰性對照，已知乳腺癌陽性片作陽性對照。PTEN陽性表達為淡黃色至棕褐色物質，定位于細胞漿，高倍鏡下每張切片選5個視野，每個視野記數(shù)100個細胞。(-)：<25%;(+)：>25%。
6、MMP2以細胞出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性判定標準，MMP2表達的判定以染色強度和陽性細胞百分率的得分之積進行評估。（-）：0；（+）：1~3；（++）：4~6；（+++）：7~9。分子原位雜交按試劑盒說明，以未加入探針的預雜交液代替探針作為空白對照，已知乳腺癌陽性片作陽性對照。每張切片在高倍鏡下隨機選取10個視野，計算各實驗陽性細胞的平均百分數(shù)，陽性染色均為細胞質著色呈棕黃色顆粒。根據(jù)著色范圍劃分，（-）：無陽性染色細胞或著色率<5%；（+）：陽性細胞數(shù)5%~25%；（++）：陽性細胞數(shù)25%~50%；（+++）：陽性細胞數(shù)>50%。14
7、統(tǒng)計學處理所有數(shù)據(jù)采用CS2000軟件包分析，根據(jù)適用條件以Pearson未校正法或Yates校正法計算χ2值,或直接用確切概率法計算P值。PTEN、uPA與MMP2的表達關系采用配對四格表的相關分析Yates校正法。2結果21PTEN在正常卵巢、卵巢交界性腫瘤、上皮性卵巢癌中的表達PTEN在正常卵巢、卵巢交界性腫瘤、上皮性卵巢癌中的陽性表達率分別為87.50%（7/8）、50.00%（9/18）、23.33%（14/60），PTEN的陽性表達率在上皮性卵巢癌中低于正常卵巢、卵巢交界性腫瘤，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01,P<0.0
8、5)。22PTEN表達與卵巢癌臨床病理分期的關系PTEN表達與卵巢癌的臨床病理分期呈負相關（P<0.05），I/II期陽性表達率高于III/IV
