應(yīng)激對肉雞盲腸菌群的影響及維生素c的緩解作用

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1、應(yīng)激對肉雞盲腸菌群的影響及維生素C的緩解作用刁海濤，鄭秀娟，周飛，姚維劍，韓雨，賀紹君（安徽科技學(xué)院，安徽鳳陽233100）基金項(xiàng)目：安徽省科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目（1508085QC61）；安徽省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目（AH201310879071；AH201410879033）摘要：目的：研究肉雞由于多種原因發(fā)生應(yīng)激對其盲腸微生物菌群的影響及飲水中添加維生素C的緩解作用.方法：試驗(yàn)選用AA肉雞60只，隨機(jī)均分為三個組即對照組、應(yīng)激組、VC+應(yīng)激組.試驗(yàn)從肉雞21日齡開始，持續(xù)3g/kg體重）7d，VC+應(yīng)激組注射地塞米松（2mg/kg體重）的同時，飲水按0.2%濃度劑量添加VC至

2、42d，正式試驗(yàn)3l甲醛15g高錳酸鉀對雞舍進(jìn)行熏蒸.試驗(yàn)雞采用籠養(yǎng)方式按7d接種新城疫，滴鼻或點(diǎn)眼，14d飲水接種法氏囊疫苗進(jìn)行免疫.自由采食和飲水定期清理糞便預(yù)試2L，振蕩，制成10-1稀釋液，用移液槍準(zhǔn)確吸取該稀釋液0.5mL到盛有4.5mL事先滅菌的試管中，振蕩，制成10-2稀釋液，依次進(jìn)行稀釋到10-7.（3）接種和培養(yǎng).大腸桿菌利用麥康凱培養(yǎng)基計數(shù)，乳酸桿菌利用MRS培養(yǎng)基計數(shù)，雙歧桿菌利用TPY培養(yǎng)基計數(shù)，分別吸取10-5和10-6稀釋液于無菌培養(yǎng)皿中，每個稀釋度2個重復(fù).（4）計數(shù).細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)后按可數(shù)性原則計數(shù).大腸桿菌選取粉紅色或紅色表面光滑、凸起、邊緣整齊不透

3、明、直徑2～2.5mm的圓形菌落進(jìn)行計數(shù).乳酸桿菌選取乳白色表面光滑、凸起、邊緣整齊不透明、直徑1～2mm的菌落進(jìn)行計數(shù).雙歧桿菌選取菌落光滑、凸圓、邊緣完整、乳脂至白色的雙歧桿菌進(jìn)行計數(shù).1.5數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)統(tǒng)計利用SPSS18.0軟件的ANOVA進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用LSD法進(jìn)行各組間多重比較.P<0.05和P<0.01分別為差異顯著和極顯著水平.2結(jié)果2.1應(yīng)激對肉雞盲腸內(nèi)乳酸桿菌的影響由表1可知，試驗(yàn)開始時21d肉雞盲腸內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量沒有明顯變化，差異不顯著（P>0.05）.在28d、35d、42d時，與對照組相比，應(yīng)激組和VC+應(yīng)激組肉雞盲腸內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量明顯降

4、低，且差異極顯著（P<0.01）.VC+應(yīng)激組與應(yīng)激組相比，肉雞盲腸內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量均升高，且差異極顯著（P<0.01）.2.2應(yīng)激對肉雞盲腸內(nèi)雙歧桿菌的影響由表2可知，試驗(yàn)開始時21d肉雞盲腸內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量差異不顯著（P>0.05）.在28d時，各實(shí)驗(yàn)組肉雞盲腸內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量差異不顯著（P>0.05）.在35d和42d時，與對照組相比，應(yīng)激組和VC+應(yīng)激組肉雞盲腸內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量均明顯下降，差異顯著或極顯著（P<0.05或P<0.01）；VC+應(yīng)激組與應(yīng)激組相比，肉雞盲腸內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量有明顯升高，差異極顯著（P<0.01）.2.3應(yīng)激對肉雞盲

5、腸內(nèi)大腸桿菌的影響由表3可知，試驗(yàn)開始時21d肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量無明顯差異（P>0.05）.在28d時，與對照組相比，應(yīng)激組和VC+應(yīng)激組肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量均明顯升高，且差異極顯著（P<0.01）；VC添加組與應(yīng)激組相比，（P>0.05）.在35d時，與對照組相比，應(yīng)激組和VC+應(yīng)激組肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量均升高極顯著（P<0.01）；VC+應(yīng)激組與應(yīng)激組相比，肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量有明顯下降（P<0.01）.在42d與對照組相比，應(yīng)激組肉雞盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量增高了9.03%，差異極顯著（P<0.01）；VC+應(yīng)激組與應(yīng)激組相比，肉雞盲腸

6、內(nèi)大腸桿菌數(shù)量明顯降低，且差異極顯著（P<0.01）.3討論3.1應(yīng)激與乳酸桿菌的關(guān)系乳酸桿菌目前是廣泛應(yīng)用的一種腸道益生菌，它是溫血動物腸道中的優(yōu)勢菌群[6].雖然乳酸桿菌不是雞腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌群，但普遍認(rèn)為乳酸桿菌是雞腸道的正常菌群成員[7，8].應(yīng)激時會對肉雞腸道內(nèi)的微生物菌群產(chǎn)生一定影響，研究報道，受到熱應(yīng)激時雞空腸和盲腸中的乳酸桿菌群數(shù)量減少，微生態(tài)平衡被破壞[9].本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，應(yīng)激時，28d、35d、42d肉雞盲腸內(nèi)的乳酸桿菌的數(shù)量降顯著（P<0.01），與上述結(jié)果是一致的.同時在飲水中添加VC可以緩解應(yīng)激對肉雞腸道的損傷作用，有助于恢復(fù)腸道內(nèi)乳酸桿菌的數(shù)

7、量.由上述可知，腸道是應(yīng)激損傷的主要靶器官，盲腸內(nèi)的乳酸桿菌的穩(wěn)定對腸道健康的維護(hù)有重要的作用，應(yīng)激時乳酸桿菌的平衡被打破，就會引起乳酸桿菌的數(shù)量發(fā)生變化，造成對機(jī)體的影響.3.2應(yīng)激與雙歧桿菌的關(guān)系雙歧桿菌和乳酸桿菌一樣都是腸道內(nèi)正常的菌群，在維護(hù)腸道健康和微生物平衡上具有重要作用.雙歧桿菌作為機(jī)體腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌、指示菌之一，對人體有著重要的保健功能[10，11].研究報道，應(yīng)激時會使肉雞空腸和盲腸內(nèi)的雙歧桿菌的數(shù)量減少，微生態(tài)平衡被破壞，試驗(yàn)結(jié)果顯示，應(yīng)激時35、