資源描述：
《阻斷腎素.血管緊張素系統(tǒng)對(duì)糖尿病大鼠腎臟血管緊張素ⅱat1受體的》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、阻斷腎素.血管緊張素系統(tǒng)對(duì)糖尿病大鼠腎臟血管緊張素ⅡAT1受體的張莉，馬驥，顧勇，林善錟【關(guān)鍵詞】糖尿病腎病 Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofperoxiredoxin1（Prx1）overexpressiononresistanceofhumantumorcellstohydrogenperoxide.MethodspcDNA.Prx1plasmidanPC3prostatecancercells.TTassayonitoredbyol・L-1ofhydrogenp
2、eroxide，thePC3cellsstablytransfectedanPC3prostatecancercellstohydrogenperoxide. Keyalcontrolgroup，NC組）?！ ?.2糖尿病動(dòng)物模型制作 除正常對(duì)照組大鼠外，其余大鼠按55mg・kg-1體重一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ，Sigma公司），48h后尾靜脈采血，用快速血糖儀［oneTouchⅡ型，強(qiáng)生（中國(guó)）有限公司］測(cè)定全血血糖，血糖>16.7mmol・L-1同時(shí)用尿糖試紙測(cè)定尿糖+++～++++者
3、確定為糖尿病大鼠。成模后穩(wěn)定4～5d開始用藥干預(yù)，伊貝沙坦和福辛普利溶解于磷酸鹽緩沖液中制成7mg・ml-1的溶液（pH7.4），每日1次灌胃給藥，劑量:伊貝沙坦組和福辛普利組均為40mg・kg-1・d-1;合用組為兩藥各20mg・kg-1・d-1;對(duì)照組僅給予等量磷酸鹽緩沖液灌服。觀察時(shí)間為4周。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間不使用胰島素。1.3標(biāo)本制備 實(shí)驗(yàn)第4周末，大鼠空腹16h后在3%水合氯醛1ml・（100g）-1腹腔注射麻醉下行腹主動(dòng)脈插管，收集2ml全血
4、，注入預(yù)冷的含20μlEDTA的離心管，4℃離心（1500r・min-1）5min分離血漿。取1ml血漿，放入另一管已預(yù)冷的含有10μl酶抑制劑1和20μl酶抑制劑2（試劑盒中提供）的試管中搖勻，置于-20℃冰箱保存，待測(cè)AngⅡ。其余血標(biāo)本待作生化檢測(cè)。取血畢，經(jīng)腹主動(dòng)脈注入4℃預(yù)冷的生理鹽水反復(fù)灌洗至腎臟轉(zhuǎn)為蒼白，分離腎臟，截取厚度2mm左右的一片腎組織置于4%的中性甲醛緩沖液中固定。其余腎組織于液氮中暫存?！ ?.4實(shí)驗(yàn)方法 1.4.1血糖測(cè)定 由日立7170型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)得。1.4.2血漿AngⅡ水平測(cè)
5、定采用放射免疫法（試劑盒購(gòu)自中國(guó)原子能科學(xué)研究院）測(cè)定。1.4.3免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎臟AT1受體表達(dá) 腎組織標(biāo)本固定48h，石蠟包埋，切成4μm厚切片，常規(guī)脫蠟至水，1.5%H2O2.甲醇處理，加一抗1∶100兔抗大鼠AT1抗體（SantaCruz公司），4℃過(guò)夜，加二抗.HRP復(fù)合物（AntibodyDiagnosticaInc.）于37℃孵育30min，DAB（AntibodyDiagnosticaInc.）顯色4min，蘇木素復(fù)染。陽(yáng)性組織呈棕黃色，而陰性部分呈藍(lán)色?！ ?.4.42）來(lái)表示?！ ?.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
6、以ˉx±s表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，組間比較用方差分析或非參數(shù)檢驗(yàn)。(責(zé)任編輯：) 2結(jié)果 2.1各組血糖、AngⅡ水平的變化 SD大鼠腹腔單劑量注射STZ后觀察4周，模型組動(dòng)物血糖水平明顯升高，說(shuō)明已經(jīng)成功建立糖尿病動(dòng)物模型。各用藥組血糖水平與DC組相比無(wú)顯著性差異，提示在本研究觀察期間，各藥物干預(yù)對(duì)糖尿病大鼠的糖代謝無(wú)顯著影響。DC組血漿AngⅡ水平較NC組下降但尚未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），Ⅰ組AngⅡ水平較DC組和NC組分別增高達(dá)3.7倍和2.4倍。F組和IF組較DC組無(wú)明顯變化。提示各藥物
7、干預(yù)對(duì)循環(huán)AngⅡ的影響是不同的（表1）。表1各組大鼠血糖、AngⅡ水平變化比較（略） 2.2各組大鼠腎組織AT1受體免疫組織化學(xué)結(jié)果 如圖1所示，在正常大鼠腎臟，AngⅡ的AT1受體主要表達(dá)在近端小管、入出球小動(dòng)脈、系膜區(qū)、致密斑等部位。糖尿病大鼠除近端小管仍有明顯表達(dá)外，其它部位的染色明顯減弱。各用藥組的AT1受體表達(dá)明顯上調(diào)，特別在系膜區(qū)、毛細(xì)血管臟層上皮細(xì)胞、遠(yuǎn)端小管等部位免疫染色較糖尿病對(duì)照組及正常組均顯著增強(qiáng)?！ ?.3各組大鼠腎組織AT1受體，ANDERSONS.RoleofangiotensinⅡindia-bet
8、icnephropathy［J］.SeminNephrol，1997，17:441.447.［2］TAALM.RenoprotectivebenefitsofRASinh-ibition:fromACEItoangiot
