牛心樸子草中有效成分的純化與表征論文

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1、牛心樸子草中有效成分的純化與表征論文【摘要】目的采用AB8大孔樹脂對(duì)牛心樸子草中的有效成分進(jìn)行提取和分離。方法采用大孔吸附樹脂柱層析、硅膠柱層析和重結(jié)晶等方法提取牛心樸子草中的有效成分。結(jié)果對(duì)分離到的化合物采用質(zhì)譜、紅外光譜圖、紫外光譜圖進(jìn)行表征，證明為牛心樸子草中的有效成分。結(jié)論牛心樸子草中的有效成分可以用AB8大孔吸附樹脂進(jìn)分離?！娟P(guān)鍵詞】牛心樸子草；活性成分；大孔吸附樹脂；結(jié)構(gòu)表征牛心樸子草CynanchumkomaroviiAl．Iljinski是我國西北旱沙地帶廣泛分布的草本植物［1］。研究發(fā)現(xiàn)，牛心樸子提取物有抗炎、抗菌、抗腫瘤及鎮(zhèn)痛等作用，具有較強(qiáng)的生物活性［2,3］。尤其

2、是其總堿中的7-脫甲氧基娃兒藤堿對(duì)煙草花葉病毒(TMV)有很強(qiáng)的抑制作用，超過了當(dāng)今公認(rèn)的抗植物病毒抑制劑。牛心樸子草作為植物農(nóng)藥屬于生物類天然型抗植物病毒抑制劑，還有促進(jìn)植物生長的復(fù)合作用［4］，但由于其活性成分難于提取和分離。因此，很難將其提取工藝應(yīng)用于生產(chǎn)。為了探索工業(yè)化提取牛心樸子草中活性成分的工藝路線.freeladzu(島津)公司)；紅外光譜儀(美國NicoletFT-IR紅外光譜儀)。2方法2.1大孔吸附樹脂柱層析樣品的制備用酸性乙醇溶液浸泡切碎的牛心樸子草地上部分，浸泡兩天后，分離草渣和浸取液，收集浸取液，草渣再進(jìn)行2次浸泡。浸泡兩天后，再分離草渣和浸取液，草渣棄之，合并兩次

3、浸取液，減壓蒸餾回收溶劑后，得黑色粘稠膏狀物。將黑色粘稠膏加入適量酸水溶解，控制pH=2左右。靜置，過濾，得濾液。黑色粘稠膏再加入酸水溶解，靜置，過濾，得濾液。反復(fù)幾次，以便能夠充分溶出粘稠膏中的生物堿。合并濾液即為生物堿鹽水溶液。2.2牛心樸子草中的活性成分在大孔吸附樹脂柱上的分離將制備的生物堿鹽水溶液加入大孔吸附樹脂層析柱內(nèi)，通過旋塞控制流速為2ml/min，使生物堿鹽在大孔吸附樹脂上進(jìn)行充分吸附。用碘化鉍鉀試劑對(duì)吸附后的流出液進(jìn)行沉淀試驗(yàn)，如果有桔紅色沉淀生成，則停止加入生物堿鹽水溶液。待層析柱上部不再存有生物堿鹽水溶液時(shí)，加入70%的乙醇水溶液進(jìn)行解吸，收集解吸液。用碘化鉍鉀試劑對(duì)解

4、吸液進(jìn)行檢測(cè)，如果無桔紅色沉淀生成，則停止加入70%的乙醇水溶液。向?qū)游鲋鶅?nèi)加入蒸餾水進(jìn)行清洗，直至洗出液無乙醇?xì)馕?。合并解吸液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收其中的乙醇得生物堿鹽水溶液。滴加氨水調(diào)節(jié)生物堿鹽水溶液的pH=8～9，使生物堿游離出來。加入氯仿進(jìn)行萃取，直至生物堿溶液滴加碘化鉍鉀試劑無桔紅色沉淀生成則停止萃取。合并氯仿液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收部分氯仿得生物堿濃縮液，生物堿濃縮液進(jìn)行硅膠柱層析。用石油醚進(jìn)行洗脫，洗脫部分回收溶劑后進(jìn)行重結(jié)晶得黃色針狀晶體化合物。3結(jié)果黃色針狀晶體mp：208～210℃。文獻(xiàn)值［6］212～214℃。晶體的結(jié)構(gòu)由紅外光譜圖、紫外光譜圖、質(zhì)譜圖表征。3.1紅外光譜解析晶

5、體的紅外光譜圖見圖1。晶體的紅外光譜圖解析見表1。圖1化合物的紅外光譜圖3.2紫外光譜解析晶體的紫外光譜圖見圖2。晶體的紫外光譜與稠環(huán)化合物菲的紫外光譜相似。稠環(huán)化合物菲的紫外光譜的三個(gè)吸收帶分別為252，295，330nm。晶體由于菲環(huán)上甲氧基的取代和氮原子的取代，因此，晶體吸收波長發(fā)生紅移。晶體在甲醇溶劑中的紫外吸收數(shù)據(jù)為：258，286，311，343，360nm。晶體的波長數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值一致。表1化合物的紅外光譜吸收峰3.3質(zhì)譜解析晶體的質(zhì)譜圖見圖3。從EI-MS圖譜得其分子離子峰為363(M+)，質(zhì)荷比m/z363，基峰為m/z294；由EI-MS分子離子峰363表明，該晶體化合物含

6、有奇數(shù)個(gè)氮。EI-MS圖譜中晶體化合物的質(zhì)荷比m/z363與碎片峰質(zhì)荷比m/z294相差69個(gè)單位，說明化合物能夠失去吡咯環(huán)，這是由于化合物進(jìn)行RDA裂解的結(jié)果；EI-MS譜中主要碎片峰為：m/z294，m/z279，m/z251,.freel/z263。晶體化合物的裂解方式見圖4。圖3化合物的質(zhì)譜圖圖4化合物的質(zhì)譜裂解方式及主要碎片綜上所述，由紅外光譜、紫外光譜、質(zhì)譜都與文獻(xiàn)［6］化合物7-脫甲氧基娃兒藤堿的相關(guān)數(shù)據(jù)一致。晶體化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：4結(jié)論以牛心樸子草為原料，對(duì)AB-8大孔吸附樹脂處理的牛心樸子草提取液中活性成分進(jìn)行了提取和分離。對(duì)分離得到的化合物采用質(zhì)譜、紅外光譜和紫外光譜

7、進(jìn)行了表征，經(jīng)鑒定該成分為牛心樸子草中最具有生物活性的化學(xué)成分7-脫甲氧基娃兒藤堿。【