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《三七皂苷r1在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物分析論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、三七皂苷R1在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物分析論文【摘要】目的研究三七皂苷R1在大鼠體內(nèi)的代謝情況，闡述三七皂苷R1在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。方法以三七皂苷R1的微生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物為對(duì)照品；采用LC-ESI-MS/MS方法，檢測(cè)大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。結(jié)果在大鼠體內(nèi)共檢測(cè)到8個(gè)代謝產(chǎn)物，并利用對(duì)照品鑒定了它們的結(jié)構(gòu)分別為：20(S)-三七皂苷R2，20(R)-三七皂苷R2，20(S)-人參皂苷Rh1，20(R)-人參皂苷Rh1，人參皂苷Rh4.freeletabolitesofnotoginsenosideR1inrats.Methods
2、ThemicrobialtransformationmetabolitesofnotoginsenosideR1etabolismstudiesofnotoginsenosideR1inrats.ResultsThestructuresofeightmetabolitesofnotoginsenosideR1inratfecesbiotransformation.Theirstructuresmar-E-20(22)-24-diene-6-O-β-D-xylopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyra
3、noside.ConclusionNotoginsenosideR1isextensivelymetabolizedinratandhasthesamemetabolicpathicroorganismstosomeextent.KeyLC-MS(SanJose，CA，USA)，使用FinniganXcalibur數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。Thermo液相色譜儀，AgilentZorbaxSB-C18反相色譜柱(5μm，250mm×4.6mm)，AgilentZorbaxSB-C18保護(hù)柱(5μm，20mm×4mm)。1.2藥品
4、與試劑色譜純乙腈(Merck,Darmstadt,Germany)，去離子水經(jīng)過Milli-Q系統(tǒng)純化(Millipore,.freelg·kg-1劑量灌胃給予三七皂苷R1，置于代謝籠中，繼續(xù)禁食，于給藥后24，48，60和72h收集糞便，冷凍保存，待處理。將1g糞便稱重后研磨，加入2ml甲醇超聲提取30min后于3000r/min離心10min，上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾，續(xù)濾液備用。1.4HPLC-DAD分析條件流動(dòng)相為乙腈-水，梯度洗脫程序?yàn)?～30min，由15％的乙腈線性升至22％；50min，升至30％
5、；80min，升至40％；120min，升至60％。流速為1.0ml·min-1，柱溫為30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm。進(jìn)樣量20μl。1.5LC-MS分析條件流動(dòng)相為乙腈-0.2%醋酸水，梯度洗脫程序?yàn)?～10min，由20％的乙腈線性升至22％；20min，升至30％；50min，升至40％；70min，升至60％。電噴霧離子化(ESI)源，正離子模式；質(zhì)譜條件經(jīng)過反復(fù)優(yōu)化，最終確定為：鞘氣流速為40arb；助氣流速為10arb；噴霧電壓為4.5kv；毛細(xì)管溫度為300℃。2結(jié)果2.1代謝產(chǎn)物HPLC分析取糞便樣品
6、溶液，在“1.4”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)行HPLC-DAD檢測(cè)分析。共檢測(cè)到底物三七皂苷R1和7個(gè)代謝產(chǎn)物M1～M7的色譜峰。見圖2。經(jīng)與對(duì)照品進(jìn)行比對(duì)確定代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)分別為：20(S)-三七皂苷R2(M1)、20(R)-三七皂苷R2(M2)、20(S)-人參皂苷Rh1(M3)、20(R)-人參皂苷Rh1(M4)、人參皂苷Rh4(M5)、原人參三醇(M6)和人參皂苷F1(M7)。同時(shí)記錄所測(cè)的底物和4個(gè)主要的代謝產(chǎn)物的色譜峰面積，與時(shí)間作圖，記錄糞便中的含量變化。見圖3。2.2代謝產(chǎn)物L(fēng)C-MS/MS分析樣品經(jīng)LC/MS/
7、MS分析，進(jìn)行全離子和選擇離子掃描，檢測(cè)到了底物及8個(gè)代謝產(chǎn)物M1～M8。其LC/MS選擇離子流圖見圖4。分別對(duì)8個(gè)代謝產(chǎn)物進(jìn)行MS和MS/MS分析，將所得的碎片離子與對(duì)照品的相比較。在MS譜中，M1和M2均顯示m/z771［M+H］+的準(zhǔn)分子離子峰，比三七皂苷R1的m/z933［M+H］+少162amu，提示均為脫去一分子葡萄糖基的代謝產(chǎn)物。在MS/MS譜中上述兩個(gè)代謝產(chǎn)物均顯示了3個(gè)主要的碎片離子峰m/z441、423和405，提示代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)葡萄糖基和一個(gè)木糖基。將對(duì)照品20(S)-三七皂苷R2和20
8、(R)-三七皂苷R2進(jìn)行LC-MS/MS分析，所得到的MS和MS/MS數(shù)據(jù)及色譜保留時(shí)間與代謝產(chǎn)物相比較。分別與代謝產(chǎn)物M1和M2一致，所以這2個(gè)代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)分別鑒定為20(S)-三七皂苷R2和20(R)-三七皂苷R2。在MS譜中，M3、M4和M7均顯示m/z639［M+H］+的準(zhǔn)分子離子峰，比三七皂苷R1的m/z933［M+H］+少294a
