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《三七皂苷r1在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、三七皂苷R1在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物分析【摘要】 目的研究三七皂苷R1在大鼠體內(nèi)的代謝情況，闡述三七皂苷R1在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。方法以三七皂苷R1的微生物轉化產(chǎn)物為對照品；采用LC-ESI-MS/MS方法，檢測大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。結果在大鼠體內(nèi)共檢測到8個代謝產(chǎn)物，并利用對照品鑒定了它們的結構分別為：20(S)-三七皂苷R2，20(R)-三七皂苷R2，20(S)-人參皂苷Rh1，20(R)-人參皂苷Rh1，人參皂苷Rh4，原人參三醇，人參皂苷F1和3β,12β-二醇達瑪烷-E-20(22),24-二烯-6-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷。結論三七皂苷R1
2、在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物較多，且與微生物轉化產(chǎn)物具有很強的相似性?！娟P鍵詞】三七皂苷R1 代謝產(chǎn)物 高效液相色譜-質譜聯(lián)用 Abstract:ObjectiveToinvestigatethemetabolitesofnotoginsenosideR1inrats.MethodsThemicrobialtransformationmetabolitesofnotoginsenosideR1etabolismstudiesofnotoginsenosideR1inrats.ResultsThestructuresofeightmetabolitesofnotoginseno
3、sideR1inratfecesbiotransformation.Theirstructuresmar-E-20(22)-24-diene-6-O-β-D-xylopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside.ConclusionNotoginsenosideR1isextensivelymetabolizedinratandhasthesamemetabolicpathicroorganismstosomeextent. KeyLC-MS(SanJose，CA，USA)，使用FinniganXcalibur數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。Thermo液相色
4、譜儀，AgilentZorbaxSB-C18反相色譜柱(5μm，250mm×4.6mm)，AgilentZorbaxSB-C18保護柱(5μm，20mm×4mm)?！ ?.2藥品與試劑色譜純乙腈(Merck,Darmstadt,Germany)，去離子水經(jīng)過Milli-Q系統(tǒng)純化(Millipore,Bedford,MA,USA)，三七皂苷R1(昆明眾正生物科技有限公司，純度大于98%)，其余人參皂苷對照品由采用微生物轉化方法獲得，其純度均大于95%［7］。其余試劑均為分析純(國藥集團化學試劑公司)?！ ?.3樣品的采集及處理Sprague-Dag·kg-1劑量灌胃給予
5、三七皂苷R1，置于代謝籠中，繼續(xù)禁食，于給藥后24，48，60和72h收集糞便，冷凍保存，待處理。將1g糞便稱重后研磨，加入2ml甲醇超聲提取30min后于3000r/min離心10min，上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾，續(xù)濾液備用?！ ?.4HPLC-DAD分析條件流動相為乙腈-水，梯度洗脫程序為0～30min，由15％的乙腈線性升至22％；50min，升至30％；80min，升至40％；120min，升至60％。流速為1.0ml·min-1，柱溫為30℃，檢測波長為203nm。進樣量20μl?！ ?.5LC-MS分析條件流動相為乙腈-0.2%醋酸水，梯度洗脫程序為0～
6、10min，由20％的乙腈線性升至22％；20min，升至30％；50min，升至40％；70min，升至60％。電噴霧離子化(ESI)源，正離子模式；質譜條件經(jīng)過反復優(yōu)化，最終確定為：鞘氣流速為40arb；助氣流速為10arb；噴霧電壓為4.5kv；毛細管溫度為300℃?！ ?結果 2.1代謝產(chǎn)物HPLC分析取糞便樣品溶液，在“1.4”項色譜條件下進行HPLC-DAD檢測分析。共檢測到底物三七皂苷R1和7個代謝產(chǎn)物M1～M7的色譜峰。見圖2。經(jīng)與對照品進行比對確定代謝產(chǎn)物的結構分別為：20(S)-三七皂苷R2(M1)、20(R)-三七皂苷R2(M2)、20(S)-人
7、參皂苷Rh1(M3)、20(R)-人參皂苷Rh1(M4)、人參皂苷Rh4(M5)、原人參三醇(M6)和人參皂苷F1(M7)。同時記錄所測的底物和4個主要的代謝產(chǎn)物的色譜峰面積，與時間作圖，記錄糞便中的含量變化。見圖3。 2.2代謝產(chǎn)物LC-MS/MS分析樣品經(jīng)LC/MS/MS分析，進行全離子和選擇離子掃描，檢測到了底物及8個代謝產(chǎn)物M1～M8。其LC/MS選擇離子流圖見圖4。分別對8個代謝產(chǎn)物進行MS和MS/MS分析，將所得的碎片離子與對照品的相比較。在MS譜中，M1和M2均顯示m/z771［M+H］+的準分子離子峰，比三七皂苷R1的m
