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《砂仁及其混淆品的高效液相色譜指紋圖譜鑒別研究論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、砂仁及其混淆品的高效液相色譜指紋圖譜鑒別研究論文王祥培，吳紅梅，趙楊，孫宜春，靳鳳云，萬德光【摘要】目的建立砂仁及其混淆品的高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜鑒定方法。方法采用RP-HPLC（DAD）法，梯度洗脫，測定陽春砂、海南假砂仁及艷山姜的指紋圖譜.freelomumvillosumanditsadulterants.MethodsChromatographicfingerprintofAmomumvillosum，AmomumchinenseandAlpiniazerumbetinedbyRP-HPLC(DAD)andthe
2、gradientelutionmodeatographicseparation,datailarityEvalutionSoftilarityofsamples.ResultsThereomumvillosumanditsadulterants.ConclusionHPLCfingerprintmethodisrepeatableandfeasibleandcanbesuitableforidentifyingAmomumvillosumanditsadulterants.Keyomumvillosum;Adulterants;H
3、PLC;Fingerprint砂仁為姜科植物陽春砂AmomumvillosumLour.綠殼砂A.villosumLour.var.xanthioidesT.L.omumvillosumLour.的干燥成熟果實；海南假砂仁購于四川成都，經(jīng)筆者鑒定為姜科植物海南假砂仁AmomumchinenseChunexT.L.a公司DiamonsilC18（250mm×4.6mm,5μｍ）；流動相為乙腈（A）與0.1%磷酸（B）梯度洗脫，梯度條件0→11min，A（%）0.5～5，B（%）99.5～95，11→61min，A（%）5～20，B（
4、%）95～80，61→75min，A（%）20～25，B（%）80～75，75→80min，A（%）25～25，B（%）75～75；流速0.8ml/min；柱溫25℃；檢測波長258nm；參比波長360nm；分析時間80min；進樣量10μl。2.2供試品的制備精密稱取藥材細粉2.0g，加石油醚（60～90℃）50ml，超聲15min，濾過，殘渣揮干溶劑，加甲醇50ml回流1h，濾過。殘渣加甲醇50ml，繼續(xù)回流1h，濾過，合并兩次濾液。置蒸發(fā)皿水浴揮干溶劑，殘渣加甲醇溶解并定容至10ml。用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液
5、，即得。2.3對照品的制備精密稱取槲皮苷對照品適量，加甲醇制成24.72μg/ml的溶液，作為對照品溶液。2.4方法學(xué)考察以購于廣東深圳的陽春砂藥材為樣品，對其穩(wěn)定性﹑儀器精密度﹑重復(fù)性作了相應(yīng)考察，結(jié)果證明穩(wěn)定性及重復(fù)性良好。2.4.1精密度實驗取同一份供試品溶液，重復(fù)進樣6次，直觀觀察指紋圖譜的全貌無明顯差別，用相似度軟件計算，在同一臺儀器測得色譜指紋圖譜的相似度分別為：0.986，0.992，0.991，0.981，0.982，0.972，均大于0.95。表明該儀器的精密度良好。符合指紋圖譜檢測要求［3］。2.4.2穩(wěn)定性實
6、驗取同一份供試品溶液，分別在0，2，6，12，20，30h進行檢測，直觀觀察指紋圖譜的全貌無明顯差別，用相似度軟件計算，在同一臺儀器測得色譜指紋圖譜的相似度分別為：0.976，0.991，0.980，0.971，0.993，0.985，均大于0.95。表明在30h內(nèi)供試品溶液的成分是穩(wěn)定的。符合指紋圖譜檢測要求［3］。2.4.3重復(fù)性實驗取同一產(chǎn)地的供試品5份，同法檢測，直觀觀察指紋圖譜的全貌無明顯差別，用相似度軟件計算，在同一臺儀器測得色譜指紋圖譜的相似度分別為：0.981，0.955，0.965，0.973，0.979，均大于
7、0.95。表明該方法的重復(fù)性較好，符合指紋圖譜檢測要求［3］。2.5指紋圖譜建立精密吸取對照品與供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，按選定的色譜條件，進行檢測。同一實驗條件下，測定所有供試品HPLC色譜圖。根據(jù)不同供試品測定結(jié)果所給出的峰數(shù)、峰值（積分值）和峰位（相對保留時間）等相關(guān)參數(shù)進行分析、比較，制定優(yōu)化的指紋圖譜見圖1～3。2.6.1共有指紋峰標定比較購于貴州貴陽、四川成都及廣東深圳共10批的陽春砂供試品溶液給出的相關(guān)參數(shù)，其中17個峰是各批供試品共有，因此確定這17個峰為其共有指紋峰，由于槲皮苷峰較小，保留時間靠后
8、，沒有選作為參照峰。2.6.2陽春砂指紋圖譜相似度評價將購于貴州貴陽、四川成都及廣東深圳的陽春砂樣品測定數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥指紋圖譜相似度計算軟件，經(jīng)選峰，設(shè)定匹配模板，將峰自動匹配，然后設(shè)定標準模板，進行譜峰差異性評價和整體相似性評價。通過中藥指紋圖譜相
